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石斑鱼性反转相关基因 ECaM的克隆及表达特征分析
引用本文:李尚伟,文建军,刘世贵,龙章富.石斑鱼性反转相关基因 ECaM的克隆及表达特征分析[J].生物化学与生物物理进展,2005,32(2):147-153.
作者姓名:李尚伟  文建军  刘世贵  龙章富
作者单位:1. 四川大学生命科学学院,成都,610064;贵州大学昆虫研究所,贵阳,550025
2. 电子科技大学生命科学与技术学院,成都,610054
3. 四川大学生命科学学院,成都,610064
基金项目:“863”国家高技术研究发展计划资助项目(2001AA620111)和国家大洋协会项目(4-2-4).
摘    要:用甲睾酮片饲喂 2 ~ 4 龄赤点石斑鱼 (Epinephelus akaara) , 6 周后 90% 以上的雌鱼性逆转为功能性雄鱼 . 运用抑制性差减杂交技术 (SSH) ,结合 SMART cDNA 合成和 RACE-PCR 方法,从性反转雄鱼性腺中克隆到钙调蛋白基因 (ECaM). 该基因 cDNA 全长为 582 bp ,开放阅读框长 450 bp ,编码的蛋白质由 149 个氨基酸组成, 5 ′端非编码区 74 bp , 3 ′端非编码区 58 bp. 虚拟 RNA 印迹表明, ECaM 在性反转雄鱼性腺中表达,而在正常雌鱼性腺中表达微弱 . 各种组织的半定量 RT-PCR 显示, ECaM 在脑、心、肝、脾、肾都有转录,在精巢和下丘脑中表达水平较高,而在肌肉中表达甚弱 . 性反转不同时期性腺的半定量 RT-PCR 及蛋白质印迹表明,性逆转过程中性腺里 ECaM 的表达量逐渐增加 . 上述结果提示钙调蛋白可能在赤点石斑鱼性逆转过程中发挥着作用, ECaM 可能是促使石斑鱼由雌向雄转变的重要功能基因之一 .

关 键 词:石斑鱼,钙调蛋白,性腺,性反转,抑制性差减杂交

Cloning and Characterization of a Sex-Reversal-Related Gene ECaM in Epinephelus akaara Gonads
LI Shang-Wei,WEN Jian-Jun,LIU Shi-Gui and LONG Zhang-Fu.Cloning and Characterization of a Sex-Reversal-Related Gene ECaM in Epinephelus akaara Gonads[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2005,32(2):147-153.
Authors:LI Shang-Wei  WEN Jian-Jun  LIU Shi-Gui and LONG Zhang-Fu
Institution:1) College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China; 2)Institute of Entomology, Agricultural College, Guizhou University, Guiyang 550025, China;School of Life Science and Technology, University of Electronic Science and Technology of China, Chengdu 610054, China;College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China;College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China
Abstract:
Keywords:Epinephelus  calmodulin  gonad  sex reversal  suppressive subtraction hybridization (SSH)
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