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TransformationofOrychophragmusviolaceusUsingAgrobacteriumtumefaciensAndRegenerationofTransgenicPlantsa¥ZHOUJi-ming(周冀明);WEIZh... 相似文献
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芽孢杆菌植酸酶分子生物学研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
来源于芽孢杆菌的中性植酸酶具有良好的热稳定性,适合作为消化道呈中性鲤科鱼类的饲料添加剂。该植酸酶晶体具有独特的螺旋桨样空间结构,钙离子在其稳定性和催化活性的结构功能关系中具有重要作用,并表现出特有的催化机理。该基因与已知植酸酶基因的结构有所不同,是一种新的植酸酶。目前主要采用多种原核表达系统对其进行表达。比较表明,芽孢杆菌表达系统和酵母表达系统是实现芽孢杆菌植酸酶规模化生产的有效途径。 相似文献
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黑曲霉N25株产植酸酶及酶促反应条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从植物种子中研究筛选出高产植酸酶的黑曲霉N25,进行了最适液体培养基的筛选,研究了黑曲霉N25在玉米半合成液体培养基中所产植酸酶的最适酶促反应条件。结果表明:在四种培养基中,玉米半合成液体培养基为最适培养基,黑曲霉N25产植酸酶高峰期在96h,黑曲霉N25所产植酸酶的酶促反应最适pH为2.6和4.6,并具有很好的热稳定性,一定浓度的Ca^2 ,Mg^2 ,Mn^2 ,Cr^3 ,Li^ ,EDTA和高磷是植酸酶活性的抑制剂,1.0mmol/ml聚乙二醇1000,0.3nmol/mL Fe^2 和低磷对植酸酶活性具有激活作用。 相似文献
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类产碱假单胞菌杀虫蛋白的激光拉曼光谱研究 总被引:3,自引:0,他引:3
类产碱假单胞菌是一种新发现的昆虫病原微生物,其代谢产生的杀虫蛋白对蝗虫具有较强的毒杀作用,经由杀虫蛋白的水和重水溶液的拉曼光谱,按照Lippert的方法计算它的二级结构含量,β折叠含量为58%,无规卷曲为34%,侧链C—C—S—S—C—C构型为反式-扭曲-反式.它的酪氨酸残基大部分暴露在分子表面,小部分埋藏在疏水环境中.并讨论了杀虫蛋白结构有可能导致的杀虫机理. 相似文献
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类产碱假单胞菌谷氨酸脱氢酶的提纯、鉴定及某些特性的初步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从类产碱假单胞菌纯化出电泳纯的谷氨酸脱氢酶,用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为290 kD,亚基分子量为47 kD,提示该酶为六聚体.该酶对NADP(H)和底物均具有高度专一性,对谷氨酸、α-酮戊二酸及NADP+ 的Km 值分别为:28 m m ol/L、1.2m m ol/L及0.063 m m ol/L.用Hill作图法求得酶对NH+4 和NADPH 的[S]0.5分别为24 m m ol/L和0.037 m m ol/L.最适反应温度为50℃,催化氨化反应和脱氨反应的最适pH 分别为8.0和8.8,在热稳定性方面不及嗜热细菌的谷氨酸脱氢酶稳定.提纯的谷氨酸脱氢酶在低温(4℃)条件下,可在Tris-HCl缓冲液中贮存半年以上,活力无明显下降,冷冻则可导致纯酶液迅速失活.氮源对菌体谷氨酸脱氢酶水平有显著影响. 相似文献
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根癌农杆菌介导转化诸葛菜获得转基因植株 总被引:8,自引:0,他引:8
以诸葛菜下胚轴和子叶为材料,在附加BA和NAA的MS培养基上诱导芽再生,在1/2MS培养基上诱导生根,获得完整再生植株,建立了诸葛菜组织培养高频再生体系,再用很癌农杆菌介导转化诸葛菜下胚轴和子叶,在附加一定量的氨苄青霉素、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选,并培养再生成苗,获得完整抗性再生植株,移植到盛有土壤的花盆中均可存活,生长正常。将再生植株叶片,进行GUS、NPTⅡ酶活性测定和Southernblot分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中,并高效表达。 相似文献
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石斑鱼性反转相关基因 ECaM的克隆及表达特征分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用甲睾酮片饲喂 2 ~ 4 龄赤点石斑鱼 (Epinephelus akaara) , 6 周后 90% 以上的雌鱼性逆转为功能性雄鱼 . 运用抑制性差减杂交技术 (SSH) ,结合 SMART cDNA 合成和 RACE-PCR 方法,从性反转雄鱼性腺中克隆到钙调蛋白基因 (ECaM). 该基因 cDNA 全长为 582 bp ,开放阅读框长 450 bp ,编码的蛋白质由 149 个氨基酸组成, 5 ′端非编码区 74 bp , 3 ′端非编码区 58 bp. 虚拟 RNA 印迹表明, ECaM 在性反转雄鱼性腺中表达,而在正常雌鱼性腺中表达微弱 . 各种组织的半定量 RT-PCR 显示, ECaM 在脑、心、肝、脾、肾都有转录,在精巢和下丘脑中表达水平较高,而在肌肉中表达甚弱 . 性反转不同时期性腺的半定量 RT-PCR 及蛋白质印迹表明,性逆转过程中性腺里 ECaM 的表达量逐渐增加 . 上述结果提示钙调蛋白可能在赤点石斑鱼性逆转过程中发挥着作用, ECaM 可能是促使石斑鱼由雌向雄转变的重要功能基因之一 . 相似文献
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应用ISSR标记研究仲彬草属植物的遗传变异 总被引:3,自引:1,他引:2
利用ISSR标记对仲彬草属14个种和1个变种共32份材料进行了研究。结果表明:仲彬草属材料间ISSR标记多态性较高,变异较大。12个引物共扩增出593条带,其中535条(90.2%)具有多态性,每个引物可扩增出11~80条多态性带,平均44.6条。ISSR标记遗传相似系数在种间变化范围为0.430~0.866,平均值为0.620。从聚类分析得知,ISSR标记能将32份仲彬草属材料完全分开,32份材料聚为4类。同种不同居群的材料分别聚在一起,亲缘关系较近,同时,在分子水平上种内不同居群间也存在分化;种间存在明显的遗传差异;形态相似、地理分布一致的物种倾向于聚类在一起,有一定的亲缘关系。因此,ISSR分子标记能有效地评价仲彬草属物种的亲缘关系。 相似文献
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