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根据 β珠蛋白的N末端和C末端氨基酸序列的保守性设计 2 0bp长的简并引物 ,用RT PCR方法扩增并克隆了鲤、草鱼、鲫的 β珠蛋白基因cDNA。结果显示克隆 3种鱼的 β珠蛋白基因cDNA全长为 4 4 1bp。对它们所编码的氨基酸序列的比较可以看出虽然它们都属于鲤科但氨基酸的组成却有较大的差异。根据所克隆的cDNA分别设计特异引物用PCR方法克隆了 3种鱼的基因组DNA全长 ;从起始密码子到终止密码子的长度分别为鲤 6 6 7bp、草鱼6 2 9bp、鲫 6 6 7bp。 3种鱼中均含有 3个外显子和 2个内含子且内含子的插入位置相同。内含子的碱基序列差异很大。鲫与鲤内含子 1和 2的长度完全相同 ,而与草鱼的内含子长度则相差较大。 相似文献
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Sox9基因是一个重要的转录调控因子,参与性别决定及软骨等多种组织和器官的发育过程。本研究利用简并引物扩增鲤鱼基因组DNA,首次发现在鲤鱼中存在两种形式的Sox9基因。二者在保守盒区编码的氨基酸序列相同,并都存在一个内含子,但内含子序列差异很大,分别长704bp和616bp。在此基础上采用RACE技术克隆了鲤鱼Sox9b基因的5’端和3’端,通过拼接获得了2447bp 的全长cDNA序列,编码428个氨基酸。其中96-174位共79个氨基酸为HMG保守盒。将鲤鱼Sox9b基因与三刺鱼等九种动物的氨基酸序列相比较发现,它们的同源性高达75%以上,显示Sox9 基因在进化中较保守。应用半定量RT-PCR技术对成体鲤鱼不同组织中Sox9b基因的表达进行了分析,结果表明该基因广泛表达,尤以脑及精巢中表达最为丰富。 相似文献
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在哺乳动物中,Y染色体决定着雄性性别,这是由于在其短臂上存在一个编码睾丸决定因子 (TDF) 的基因。1990年,人们克隆了睾丸决定因子基因并命名为SRY。序列分析表明SRY基因中存在一个保守区,与染色体高迁移率组 (HMG) 蛋白质上的DNA结合结构域具有一定的相似性。基于HMG基序的保守性人们发现了一个新的基因家族Sox基因家族。凡是在HMG区域与SRY基因具有50%以上相似性的基因被称为Sox基因。Sox基因在早期胚胎发育过程中参与多种发育途径,具有重要的作用。参与诸如性别决定、骨组织的发育、血细胞生成过程、神经系统的发育、晶状体的发育等多种早期胚胎发育过程。 虎(Panthera tigris)作为世界上最濒危的兽类之一,东北虎(Panthera tigris altaica Temminck)是其中的一个亚种,被列为一类珍稀动物。本文对其发育基因家族—SOX基因进行了研究。 利用肌肉组织为材料制备基因组DNA, 应用特异于HMG-box区域的兼并引物, 扩增了东北虎的SOX基因。在扩增产物中发现一条220bp的扩增带。经过克隆与序列测定和同源性检索,发现5个基因片段(Fig.1&2)。其与人SRY基因的相似性分别为75%、56%、51%、67% 和48%;与小鼠Sry基因的相似性分别为73%、54%、57%、66% 和 48% (Table 1)。因此这5个DNA片段为东北虎的5个Sox基因片 相似文献
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两种泥鳅RAPD标记遗传稳定性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用从20个随机引物中筛选出的7个引物对泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)和大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)及其自交与杂交子代进行了RAPD遗传稳定性分析。结果表明,RAPD谱带主要呈孟德尔式遗传,该类带纹明亮稳定,在泥鳅子代中占99.11%;在大鳞副泥鳅子代中占100%;在杂交子代中占99.36%。也存在非孟德尔式遗传谱带,该类带纹较暗、稳定性差,在泥鳅子代中为0.89%;在杂交子代中为0.64%;在大鳞副泥鳅中未见此类带纹。实验结果说明RAPD谱带具有很高的遗传稳定性。 相似文献
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鱼类性别决定和分化机制极为复杂,通过性腺组织切片鉴定得出黄河鲤从未分化性腺发育为Ⅱ期精巢、卵巢的时间为受精后第40天到第80天。选取一些可能参与黄河鲤性别决定分化相关的基因(amh、ar、cyp19a、cyp19b、dax1、dmrt1、er、foxl2、nobox、sox9a、sox9b、zp2)进行实时荧光定量PCR分析各个基因在受精后40d、45d、50d、55d、65d和80d的表达情况。结果显示性别决定相关基因在50d都有高表达,推测45-50 d为性别决定的关键时间。ar、amh、dax1、dmrt1、sox9a、sox9b六个基因在80d雄性表达量升高,且雄性明显高于雌性,推测这些基因参与精巢分化发育过程。cyp19a、cyp19b、foxl2、nobox、zp2五个基因在80d雌性表达升高,且高于雄性,推测其可能参与卵巢分化发育。 相似文献
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具有内含子的大鳞副泥鳅Sox8基因(英文) 总被引:3,自引:0,他引:3
鱼类在脊椎动物系统进化过程中起着承先启后的作用,其性别决定具有原始性、多样性和可塑性。深入研究鱼类的性别决定和分化具有重大的理论意义。Sox基因家族是九十年代发现的一个新的基因家族,其中的许多成员都与性别决定和分化具有直接的关系。大鳞副泥鳅是一种常见的小型鱼类,属于鲤形目鳅科,是少数具有异形性染色体中的一种。本文根据已发表的Sox蛋白质的序列资料,选择在不同物种中保守程度最高的区段设计兼并引物。该组引物可以特异扩增 Sox基因的 HMG盒区。以大鳞副泥鳅基因组 DNA为模板,在扩增产物中有三条主带,其大小分别为220bp,550bp和1500bp,另有一条相当弱的带,大小为700bp(Fig.1)。雌雄个体中扩增结果一致。经克隆和DNA序列分析,从550bp扩增带中得到一新的基因片段,长500bp,编码53个氨基酸;其余部分长340bp,可能为一内含子,且符合“GT…AG”规律(Fig.2)。其可能编码的蛋白质氨基酸序列与小鼠的 Sox8, 9, 10,SRY基因的相似性分别为 96%, 94%, 90%和 47%;与人类 Sox 8, 9, 10, SRY基因的相似性分别为64%, 94%, 58%和40%(Fig.3)。 相似文献
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鱼类在脊椎动物系统进化过程中起着承先启后的作用,其性别决定具有原始性、多样性和可塑性。深入研究鱼类的性别决定和分化具有重大的理论意义。Sox基因家族是九十年代发现的一个新的基因家族,其中的许多成员都与性别决定和分化具有直接的关系。大鳞副泥鳅是一种常见的小型鱼类,属于鲤形目鳅科,是少数具有异形性染色体中的一种。本文根据已发表的Sox蛋白质的序列资料,选择在不同物种中保守程度最高的区段设计兼板,在扩增产物中有三条主带,其大小分别为220bp550 bp和1500bp,另有一条相当弱的带,大小为700bp(Fig.1)。雌雄个体中扩增结果一致。经克隆和DNA序列分析,从550bp扩增带中得到一新的基因片段,长500bp,编码53个氨基酸;其余部分长340bp,可能为一内含子,且符合“GT…AG”规律(Fig.2)。其可能编码的蛋白质氨基酸序列与小鼠的Sox8,9,10,SRY基因的相似性分别为96%,94%,90%和47%;与人类SOX8,9,10,SRY基因的相似性分别为64%,94%,58%和40%(Fig.3)。根据这些特性将命名为PdSox8。Northern杂交结果表明PdSox8在成体脑及肝脏组织中有宏量表达(Fig.4)。 相似文献
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泥鳅性腺发生和分化的组织学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过人工繁殖技术获得泥鳅幼体,采用石蜡显微切片技术对幼体性腺发生和分化的组织学特征进行了系统观察.结果表明泥鳅性腺发生于出膜后12 d,40日龄卵巢开始分化,至55日龄卵巢分化完全;精巢于出膜后55 d左右开始分化,100 d左右分化完全.卵巢分化早于精巢.从性腺分化开始,将要发育为卵巢的性腺还表现为体积快速增大,向体腔中间靠拢,横截面变宽;而将要发育为精巢的性腺则呈两端尖中间稍突的梭形,增生并不明显.这些特征可能与雌雄性腺的发育及生殖细胞的分化速度有关,可以作为泥鳅性腺早期分化的形态特征. 相似文献