植物TFⅢ A型锌指蛋白

在植物中发现的锌指蛋白可以分成几种类型[1] 。其中经典的锌指蛋白是ＴＦⅢＡ型锌指蛋白 ,又称Ｃｙｓ2 /Ｈｉｓ2 或Ｃ2Ｈ2 ,模体为ＣＸ2— 4ＣＸ3 ＦＸ5 ＬＸ2 ＨＸ3— 5 Ｈ ,其中的两个Ｃｙｓ和两个Ｈｉｓ与锌原子形成配位键 ,进而形成包含一个β发夹和一个α螺旋的紧密指状结构 (图 1 ) [2 ] 。曾经认为锌指结构主要介导蛋白质与ＤＮＡ的互作 ,其中α螺旋与ＤＮＡ的大沟发生接触 ,然而最近发现有的转录因子中的一些ＴＦⅢＡ锌指只与蛋白质发生互作 ,而同一转录因子中的其他ＴＦⅢＡ锌指则与ＤＮＡ发生互作。第一个在植物中发现的ＴＦⅢＡ…     

B8Gly在胰岛素结构模体中的可能作用

在胰岛素结构模体ｎ１－Ｃｙｓ－Ｇｌｙ－Ｘ１０－Ｃｙｓ－ｎ２－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｘ３－Ｃｙｓ－Ｘ８－Ｃｙｓ－ｎ３中,有７个绝对保守的氨基酸残基,只有位于Ｂ８位的是Ｇｌｙ。通过定点突变将其改变为Ａｌａ,得到「Ｂ８Ａｌａ」人胰岛素,其受体结合能力和体内生物活力分别为天然猪胰岛素的２．５％和１０％。「Ｂ８Ａｌａ」人胰岛素和重组人胰岛素的远紫外圆二色谱比较表明,「Ｂ８Ａｌａ」人胰岛素的α－螺旋的相对含量有一家     

17个新的C2H2型锌指基因片段的分离与克隆

按照Ｃ２Ｈ２型锌指基因保守结构域的ＤＮＡ序列设计一对简并引物,以人基因组ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ同源扩增,将由此获得的锌指基因片段为探针,从人胎肾、骨骼肌、骨骼组织的ｃＤＮＡ分子库中筛选到２２个Ｃ２Ｈ２型锌指蛋白ｃＤＮＡ片段,经国际ＮＣＢＩ数据库查询检索,其中１７个为新的锌指基因片段。对从胎肾ｃＤＮＡ分子库中分离到的Ｋ３－４和Ｋ５－１２克隆进行了表达谱分析,发现Ｋ３－４在肾脏中的表达量明显高于其他几     

从织锦芋螺中克隆α芋螺毒素序列

为了从我国南海产织锦芋螺（Ｃｏｎｕｓｔｅｘｔｉｌｅ）中分离新的毒素序列并研究其应用价值,进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作．从织锦芋螺毒管中提取ｍＲＮＡ,以Ａ族芋螺毒素的信号肽编码部分和３′端非翻译部分的保守序列为引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增和序列分析方法获得新的芋螺毒素序列．结果得到两种不同的α芋螺毒素序列,两者都属于α４／７亚型芋螺毒素,预测其成熟肽序列分别为Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ｃｙｓ－Ｇｌｙ（Ｃ端Ｇｌｙ可能被酰胺化）和Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ａｌａ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｉｌｅ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ．采用传统的生化分离手段尚未从织锦芋螺中获得过α芋螺毒素序列,这两种α芋螺毒素作用的种属特异性、受体类型特异性和在小细胞肺癌的诊断和治疗中的应用价值有待进一步研究     

氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响

动脉平滑肌细胞（ｓｍ ｏｏｔｈ ｍ ｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）是动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）斑块中的主要细胞,它的增殖在ＡＳ形成过程中极其重要．利用体外培养的人主动脉ＳＭＣ,观察了天然高密度脂蛋白（ｎａｔｉｖｅ ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｎ－ＨＤＬ）及氧化修饰ＨＤＬ（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ＨＤＬ,ＯＸ－ＨＤＬ）对培养人主动脉ＳＭＣ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１（细胞周期蛋白Ｄ１）基因转录表达的影响．结果表明：（１）Ｎ－ＨＤＬ对ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达无影响（Ｐ＞ ０．０５）;（２）ＯＸ－ＨＤＬ使ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达显著增强（Ｐ＜０．０１）,其表达量随时间（２、１２、２４ ｈ）延长而增加．上述结果表明,ＯＸ－ＨＤＬ的致ＡＳ作用可能与其刺激ＳＭＣｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因表达增加有关．     

黑曲霉纤维素酶的化学组成

本文测定的黑曲霉纤维素酶各组分均为糖蛋白,但含糖量和组成各不相同,含糖量分别为：β－葡萄糖苷酶１１．３％,内切β－葡聚糖酶１１．８％,β－葡聚糖纤维二糖水解酶ＣＢＨ—１７．２％、ＣＢＨ－Ⅱ５．８％。各酶组分的氨基酸组成有一定的差异,但也有一些共同之处,即都含有较多的酸性氨基酸（Ａｓｐ、Ｇｌｕ）,碱性氨基酸（Ｈｉｓ、Ａｒｇ）含量较低。分析酶组分间的相似性时发现,β－葡聚精纤维二糖水解酶的ＣＢＨ－Ⅰ组分与内切β－葡聚糖酶在各种氨基酸的含量上较为相似,而同属于β－葡聚糖纤维二糖水解酶的两个组分ＣＢＨⅠ和ＣＢＨ—Ⅱ在氨基酸的含量上有一定的差异。     

大肠杆菌中一种对NF—IL63‘UTR专一的结合蛋白

在大肠杆菌ＴＧ１中,发现了一种与人白介素６核转录因子ｍＲＮＡ的３’非翻译区专一结合的蛋白,其Ｎ－端氨基酸序列为Ａｌａ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｉｌｕ－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－Ｇｌｙ－Ｃｙｓｓ（？）－Ｇｌｙ。对数据库检索未发现完全同源的蛋白。对于在大肠杆菌中发现真核ｍＲＮＡ专一结合蛋白的意义做了讨论。     

cAPK催化亚基的C端融合表达,纯化及其NMT底物活性作用

将小鼠ｃＡＭＰ依赖蛋白激酶催化亚基α（ｍＣα）基因从３＇端截去９６ｂｐ后与Ｈｉｓ－ｔａｇ融合,构建Ｃ端融合Ｈｉｓ６的表达质粒ｐＺＰｍＣα４Ｈ。该质粒在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中得到了高效表达,目的蛋白ｍＣα４Ｈ的表达量与ｍＣα相近。该蛋白在３７℃表达时主要以包含体形式存在,而２２℃表达时则大部分可溶。利用固定化金属离子（Ｎｉ＾２＋）配体亲和层析,分别从破菌上清涂和包含体中纯化ｍＣα４Ｈ,结果表明     

黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质

由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶,依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ,７６ｋＤａ,２４ｋＤａ和２３ｋＤａ,Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃,ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ,Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％,而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖,其产物有所不同。     

HCV非结构蛋白(NS2/NS3)基因表达载体的构建及其一级结构分析

应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,从ＨＣＶ感染者血清中扩增编码ＨＣＶ病毒蛋白酶的ＮＳ２－ＮＳ３ｃＤＮＡ片段,在其５′和３′端分别引入ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ限制性内切酶位点,定向克隆至真核表达载体ｐｃＤＮＡ３,构建重组载体ｐｃＤＮＡ－ＮＳ２３,重组表达载体经限制性内切酶消化鉴定．用ＳＰ６和Ｔ７通用引物对目的基因片断进行序列分析．序列同源性分析结果表明,与ＨＣＶ－Ｊ、ＨＣ－Ｃ２有高度的同源性,与ＨＣＶ－１、ＨＣＶ－Ｊ６、ＨＣＶ－Ｊ８同源性差,提示所克隆的基因属ＨＣＶⅡ型．该区内重要的功能位点如Ｚｎ２＋依赖性金属蛋白酶催化中心、丝氨酸蛋白酶催化中心等均高度保守     

氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖

平滑肌细胞（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）增殖在动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）形成中起着重要作用。氧化修饰ＨＤＬ（ｏｘｉｄｉｘｅｄ ＨＤＬ,ＯＸ－ＨＤＬ）可刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入培养人动脉ＳＭＣ的ＤＮＡ,促进ＳＭＣ增殖。以四甲工偶氮唑盐９ＭＴＴ）法直接观察ＯＸ－ＨＤＬ对培养人动脉ＳＭＣ增殖细胞数的影响。结果显示,天然ＨＤＬ（ｎａｔｉｖｅ ＨＤＬ Ｎ－ＨＤＬ）对     

啤酒酵母DNA修复基因RAD24温度敏感突变株的分离及其特性的初步研究

以ＹＣｐｌａｃ系列带Ｔｒｐ、Ｈｉｓ和Ｕｒａ标志基因的载体为骨架构建含野生型和经羟胺处理的突变型的啤酒酵母ＲＡＤ２４基因质粒,用质粒替换方法分离ＲＡＤ２４基因温度敏感突变株（ｒａｄ２４－ｔｓ３）．紫外生存试验发现,ｒａｄ２４－ｔｓ３对紫外线敏感;同位素（３Ｈ－ＴｄＲ,３Ｈ－ＵＲ,３Ｈ－Ｌｅｕ）参入试验表明,该突变株ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质合成均较野生型明显降低．     

血红素加氧酶的研究进展

血红素加氧酶（ＨｅｍｅＯｘｙｇｅｎａｓｅ,简称ＨＯ）是血红素分解代谢的主要酶类。现发现有两种同工异构酶ＨＯ－１、ＨＯ－２,不同哺乳动物的ＨＯ－１之间及ＨＯ－２之间均有很大的同源性。ＨＯ－１可以被诱导生成,分子量３２ｋＤａ左右,在肝脏、脾脏中有较大的活性,ＨＯ－１与血红素结合的中心配基为Ｈｉｓ２５。ＨＯ－１可以为血红素、加热、重金属、紫外线等所诱导,其基因上游有热激元件（ｈｅａｔ－ｓｈｏｃｋｅｌｅｍｅｎｔ,简称ＨＳＥ）、Ｅ－ｂｏｘ序列、ＡＢＩ序列、ＮＦ－ＫＢ结合点等特定序列负责ＨＯ－１的调控。ＨＯ－２尚未发现有诱导反应,分子量３６ｋＤａ左右,主要存在于脑及精巢中,ＨＯ－２与血红素结合的中心配基为Ｈｉｓ４５。     

四种蚤染色体组型及C分带研究

本文首次在国内报道了住鼠客蚤、猫栉首蚤指名亚种、人蚤和秃病蚤蒙翼亚种的染色体组型和Ｃ分带研究结果。１、印鼠客蚤２ｎ＝１８＝１０ｍ＋６ｓｍ＋２ｓｔ,ＸＸ／ＹＹ．２猫蚤２ｎ＝１２＝１０ｍ＋２ｓｍ,ＸＸ／ＹＹ,核型特点为２号染色体的多态性和３号与６号染色体间发生不对称性易位。３、人蚤核型特点是：（１）染色体数目多态现象,变异范围８－１２,以９－１２者多见,ＸＸ／ＹＹ性染色体决定机制。（２）染色体结构重组     

正常小鼠高频心电图时域值和功率谱的研究

本文用南京新博公司生产的ＮＨＥ－１０００型心电高频信息检测分析仪研究了正常小鼠（昆明种）高频心电图（ＨＦ－ＥＣＧ）的时域值和ＱＲＳ波群的功率谱。主要结果如下（以正导为例,－Ｘ±ＳＤ）：心率６０３±８８次／ｍｉｎ（ｎ＝７４）;Ｐ－Ｒ间期相对较长。为３４．９±４．７ｍｓ（ｎ＝５８）,占心动周期的３４．９±４．９％,这与人类有很大的不同;ＱＲＳ波宽９．２±１．２ｍｓ,占心动周期的９．２±１．４％（ｎ＝７４）,这一结果与以前的文献报道相差较大。Ｔ波宽１０．３±３．２ｍｓ,占心动周期的１０．３±３．２％;Ｑ－Ｔ间期１９．４±３．２ｍｓ,占心动周期的１９．５±３．６％;ＱＲＳ波群峰－峰值（Ｖｐ－ｐ）为１．４５６±０．４８０ｍＶ;Ｔ波高０．３３６±０．１１５ｍＶ;７３只动物Ⅱ导联高频切迹总数只有３个,扭挫２６个。Ⅱ导联ＱＲＳ波群的功率谱特点：０—８０Ｈｚ的相对能量为４５．４８±１５．３２％;８０—２００Ｈｚ为４３．９７±９．９５％;２００—３００Ｈｚ为８．８９±７．３８％;３００—１０００Ｈｚ为１．６６±２．７４％。     

木毒蛾核型多角体病毒形态结构及理化性质的研究

木毒蛾核型多角体病毒属昆虫杆状病毒科,核型多角体病毒属,多粒包埋型。在扫描电镜下,多角体呈不规则多面体,大小下一,平均直径为１．４μｍ,病毒粒子杆状,大小约为３９４×５６ｎｍ,经ＳＤＭ－ＰＡＧＥ分析,病毒多角体蛋白分子量为３０．５ｋＤ,病毒粒子结构蛋白由１９条多肽组成,分子量范围在８８－１７ｋＤ之间。多角体富含Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、而Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、和Ｈｉｓ含量较少。其酸碱氨基酸之比为１．２６。病毒核酸为一环状ＤＮＡ,长度约为３８μｍ,经ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲⅠ和ＢｇｌⅠ单酶切以及ＢａｍＨⅠ＋ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ＋ＰｓｔⅠ、ＢａｍＨⅠ＋ＢｇＩⅠ和Ｘｈｏｌ＋ＥｃｏＲⅠ双酶切分析,ＤＮＡ总分子量约为７１．６×１０￣６Ｄａｌｔｏｎｓ。     

道路农田防护林系统水分关系研究

道路农田防护林系统水分关系研究任勇,王佑民（北京林业大学,１０００８３）（西北林学院,陕西杨陵７１２１００）ＷａｔｃｒＲｅｌａｔｉｏｎｓｉｎＦａｒｍｌａｎｄＳｈｅｌｔｅｒｂｅｌｔＳｙｓｔｅｍｂｙｔｈｅＲｏａｄｓ．ＲｅｎＹｏｎｇ￥（ＢｅｉｊｉｎｉｇＦｏｒｅｓｌｒｙＵｚｉｕｅｒｓｉｔｙ,１０００８３）,ＷａｎｇＹｏｕｍｉｎ（ＮｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ,Ｙａｎｇｌｉｎｇ,Ｓｈａａｎｘｉ,７１２１００）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（４）：ｌ－６．ＩｎｔｈｅｒｅｇｉｏｎｆｒｏｍｌｏｅｓｓｐｌａｔｅａｕｔｏＮｏｒｔｈＷｅｉＲｉｖｅｒ,２０－１００ｃｍｓｏｉｌｌａｖｅｒｉｓｔｈｅｍａｉｎｌａｖｅｒｆｒｏｍｗｈｉｃｈｔｈｅｒｏｏｔｓｙｓｔｅｍｏｆＰ．×ｄａｋｕａｎｅｎｓｉｓＨｓｕａｂｓｏｒｂｓｗａｔｅｒ,ａｎｄ０－０．１ＨｉｓｔｈｅｒａｎｇｅｉｎｗｈｉｃｈＰ．×ｄａｋｕａ－ｎｅｎｓｉｓｂｙｔｈｅｒｏａｄｓｓｔｒｏｎｇｌｙａｆｆｄｃｔｓｂｙｔｈｅｒｏａｄｓｓｔｒｏｎｇｌｙａｆｆｅｃｔｓｍｏｉｓｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｆａｒｍｌａｎｄ．Ｔｈｅａｎｎｕａｌ     

以粘粒为基础产生重组单纯疱疹病毒HSV1-lacZ的研究

将总长度为１５２ｋｂ的单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ－１）（１７株）基因组分成５个相互间有部分重叠的大片段（约３５－４０ｋｂ）,分别克隆到粘粒ＳｕｐｅｒＣｏｓＭＷ中,依次称为ｃｏｓ４８、ｃｏｓ２８、ｃｏｓ６、ｃｏｓ１４和ｃｏｓ５６（ＤａｖｉｓｏｎＡＪｅｔａｌ,１９９３）。此５个粘粒用ＰａｃⅠ切去粘粒骨架后共转染细胞,可发生同源重组而产生野生型ＨＳＶ－１。以此为基础,利用粘粒ｃｏｓ５６的ＨＳＶ－１ＵＬ４４基因中含有一个ＸｂａⅠ单一酶切位点的特点,将一个两端加有ＸｂａⅠ位点的ＣＭＶ－ｌａｃＺ－ｐｏｌｙＡ片段插入其中,构建成ｃｏｓ５６－ｌａｃＺ。将ｃｏｓ５６－ｌａｃＺ与其它４个粘粒经ＰａｃⅠ酶切后,用ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ转染试剂共转染ＢＨＫ－２１细胞,３７℃培养２－３天,开始出现细胞病变及噬斑。５天后将病变细胞连同培养液一起冻融３次,取上清０．１ｍｌ感染新鲜的ＢＨＫ－２１细胞,３７℃培养２４小时,用Ｘ－ｇａｌ染色３０－６０分钟,镜下观察可见大量蓝色噬斑。蓝色噬斑数占噬斑总数的５０％以上。经空斑纯化的蓝斑病毒可稳定传代。这种方法同将外源基因表达盒插入ＨＳＶｔｋ基因中构建成重组质粒,再与ＨＳＶ－１基因组ＤＮＡ共转染细     

腹腔注射重组腺病毒诱导的免疫反应

为研究重组腺病毒接种实验动物后的免疫反应性,利用ＲＴ－Ｐ　Ｃ　Ｒ方法,从ＨＡＶ的ＲＮＡ中克隆了结构蛋白基因插入穿梭质粒ｐＸＣＸ２Ｎｏｔ　Ｉ,通过磷酸钙－ＤＮＡ共　沉淀技术,将复制缺陷型腺病毒载体与线形化的ｐＸＣＸ２－ＣＭＶ－ＨＡＶ共转染２９３细胞。一系列检测方法证明产生了重组腺病毒ｒＡｄＨＡＶ。纯化后的ｒＡｄＨＡＶ滴度为１×１０９ＴＣＩＤ５０／ｍＬ　,腹腔注射免疫昆明种小白鼠后,可诱导产生抗ＨＡＶ　ＩｇＧ和ＨＡＶ中和抗体。复制缺陷型腺病毒　可作为发展基因工程病毒疫苗载体的有效系统。     

庐山鹅掌楸(Liriodendron chinense)幼苗蒸腾特性研究

庐山山地上的鹅掌楸幼苗,在夏季晴天土壤供水充足的条件下,其叶片蒸腾速率的日变化为午后高峰型,日蒸腾量为７０９２ｍｏｌＨ２Ｏｍ＾２ｄ＾１,最大蒸腾速率达３．９ｍｍｏｌＨ２Ｏｍ＾－２ｓ＾－１,叶／敢温度差,敢孔导率,相对湿度等对蒸腾速度的影响最显著;鹅掌楸地的水分利用率日平均为４．１４２ｍｍｏｌＣＯ２３ｍｏｌ＾－１Ｈ２Ｏ最高可达１１．８ｍｍｏｌＣＯ２ｍｏｌ＾－１Ｈ２Ｏ。