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2-型纤溶酶原激活抑制剂(PAI-2)是尿激酶型纤溶酶原激活剂的高效专一抑制剂。PAI-2具有较高的稳定性,可以发生自我聚合。PAI-2可与细胞内的细胞型纤溶酶原激活剂、纤连蛋白、谷氨酶胺转移酶等多种分子发生反应。PAI-2与尿激酶型纤深酶原激活剂的反应遵循丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用机制,其自我聚合的发生可能遵循环-片层机制。PAI-2在肿瘤的侵润和扩散、皮肤组织受伤和治疗、炎症以及多种疾病的发生过 相似文献
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纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)是组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和尿型纤溶酶原激活物(u-PA)的特异性抑制剂。对PAI-1分子的结构与功能的认识,有助于了解PAI-1作用的机理。本综述了近年来对PAI-1蛋白分子结构与功能研究的进展,介绍了PAI-1分子中一些区域的作用以及影响PAI-1抑制活性的一些因子。 相似文献
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对从HepG2细胞培养液中分离得到植基化和非糖基化PAI-1(1型纤溶酶原激活物抑制剂),以及从pYZHBI-66表达菌中纯化的非糖基化重组PAI-1的某些性质和功能进行比较,结果显示,糖基化PAI-1对tPA(组织型纤溶酶原激活物)有较强的抑制,能较显著地被蛋白质变性剂所激活,对热有较强的稳定性,糖基化与非糖基化PAI-1在pH2.5-9.0的范围内都相当稳定。纤维蛋白原和肝素能明显提高两者对tPA的抑制作用。 相似文献
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用原位杂交和荧光免疫定位方法研究了组织型(t)和尿激酶型(u)纤溶酶原激活因子tPA、uPA和相应的抑制因子PAI-1、PAI-2在人和恒河猴胎盘中的定位和分布。结果表明:(1)激活因子tPA、uPA(Fig.1&4)和抑制因子PAI-1(Fig.2)、PAI-2(Fig.3)一般都在不同程度上定位于两者胎盘的相同部位;(2)它们主要分布在绒毛干和蜕膜的血管壁、 ROhr’s和Nitabuch’s纹间的基盘外绒毛滋养层细胞、滋养壳、蜕膜细胞和腺体细胞。并且发现;tPA和它的抑制因子PAI-1更明显地定位于邻近母体组织离层界面的区域,而uPA和抑制因子PAI-1更集中在绒毛滋养层和外绒毛滋养细胞中;(3)激活因子和抑制因子的mRNA和蛋白的定位和分布基本上一致,但是、在绒毛核体滋养层细胞上未发现其mRNA表达,却有很强的免疫荧光的分布;(4)激活因子和抑制因子合成和分布部位与其作用底物,即纤蛋白类分子的产生部位一致;(5)未发现上述分子在人和恒河猴胎盘分布上的不同。上述实验结果说明,在妊娠的各个阶段 PA和它的抑制因子协同表达,局限在作用范围很小的特定产生底物的区域。它们的相互作用可能是维持正常妊娠所必需。在妊 相似文献
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用PCR方法从pPAIJ.7中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)基因,与pPUC18重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人PAI-2基因.PAI-2基因与表达载体pPIC9重组,构建受乙醇氧化酶1基因(AOX1)启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115宿主菌,经表型筛选和PCR扩增筛选阳性克隆,用甲醇诱导表达,重组PAI-2以分泌型表达,占分泌总蛋白的30%,具PAI-2抗原性,与低分子量尿激酶形成了抗SDS复合物,具抑制纤溶的活性(91.4AIU/ml).对培养条件也进行了探讨. 相似文献
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为研究和比较纤深酶原激活剂抑制物2型(plasminogen activaor inhibitor type 2,PAI-2)及其突变体的生物化学性质,用PCR、体外定点突变技术构建PAI-2突变体PAI-2CD和PAI-2QcDNA,将突变体cDNA与原核表达载体重组并转化怕杆菌。经诱导表达,SDS-PAGE证实表达出相应蛋白质,均占全菌总蛋白的14%。Wetern印迹、溶圈抑制及纤维蛋白翻转板 相似文献
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重组PAI-2对肿瘤细胞降解细胞外基质的影响曹祥荣(南京师范大学生物系,210024)关键词纤溶酶原激活剂抑制剂-2,基因重组,细胞外基质降解肿瘤细胞转移过程中最重要的因素是肿瘤细胞侵袭能力,其生化过程即为细胞外基质(EOM)降解作用。纤溶酶系统(纤... 相似文献
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纤溶酶原激活剂抑制物2型的结构与功能 总被引:3,自引:0,他引:3
田昱 《国外医学:分子生物学分册》1997,19(1):31-33
纤溶酶原激活剂抑制物2型具纤溶抑制活性,是尿激酶特异的抑缺点蛾。uPA在肿瘤浸润过程中起了十分关键的作用,PAI-2亦因此成为当今研究的热点。 相似文献
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将纤深酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)突变体PAI-2CD和PAI-2QcDNA与真核表达载体pcDNA3重组,构建真核表达质粒并转染HeLa细胞,经G418筛选,Northern迷鉴定和ELISA检测,筛选出稳定表达PAI-2CD和PAI-2Q的阳性细胞株。ELISA结果表明PAI-2突变蛋白质在转染细胞中的表达量与相应野生型PAI-2在阳性细胞克隆中的表达量基本相近,PAI-2及其突变体在理 相似文献
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精制溶栓酶对家兔血浆t-PA和PAI的影响雷丹青广西医科大学蛇毒研究所南宁530021纤溶系统是机体阻止血栓形成的屏障,t-PA(纤溶酶原激活剂)是纤溶系统的关键物质,t-PA对纤维蛋白原有极高的亲和力,它能选择性的激活血凝块中的纤溶酶原生成纤溶酶,... 相似文献
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用PCR方法从pPAIJ.7中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)cDNA,与pUC18重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人PAI-2cDNA.PAI-2cDNA与原核表达载体重组,构建原核表达质粒并转化大肠杆菌.经温度诱导表达,重组PAI-2占全菌总蛋白的14%,以可溶性形式存在,具纤溶抑制活性.工程菌发酵、压榨后,用硫酸铵分级沉淀,沉淀物经分子筛、离子交换和疏水性色谱的分离,每升菌液可获得约30mg纯度达90%的蛋白质,比活性为11866AIU/mg蛋白质,得率为19.2%. 相似文献
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t—PA cDNA基因转移与基因治疗 总被引:2,自引:0,他引:2
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)能够特异、高效地溶解血栓,在纤溶系统中起着重要作用,t-PA与其抑制物(PAI)平衡失调,可导致多种疾病的发生。基因转移技术使外源t-PA cDNA成功地在血管内皮细胞中得以表达,为防治以血栓形成为主要病理变化的血管性疾病开辟了广阔的前景。 相似文献
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用正常人胎肺细胞体外培养,从其培养液中分离纤溶酶原活化物(PA),通过CM-SephadexC-50层析,硫酸铵沉淀和Fibrin-Sepharose,Lysine-Sepharose亲和层析及SephadexG-50凝胶过滤等步骤,从10.5l条件培养液中分离纯化得到两种类型的纤溶酶原活化物,t-PA90μg,u-PA800μg.在还原条件下SDS-PAGE均显示单带,分子量t-PA为72kD,u-PA为54kD,纤溶比活分别为156000IU/mg蛋白和106000IU/mg蛋白. 相似文献
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利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子-1(rPAI-1)具有许多与天然PAI-1相同的性质,rPAI-1对u-PA抑制活性研究的内容包括:几种化学物质(盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、SDS、氯化钠等)对rPAI-1的激活作用、盐酸胍激活rPAI-1的浓度与温度效应、显色底物法和SDS-PAGE纤维蛋白自显影对rPAI-1活性的测定、活性态rPAI-1向潜状态的转变及其与盐浓度和pH值的关系。 相似文献
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测定38例不稳定性心绞痛(UAP)患者血中纤维蛋白原(Fg)含量、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性、血管性假血友病因子(vWF)活性和血小板聚集率水平(PAgT)并与21名正常人对比。患者中18例用蝮蛇抗栓酶治疗,20例行常规治疗。结果显示:UAP患者血中PAI-1、vWF以及PAgT水平明显增高,t-PA水平明显降低;蝮蛇抗栓酶组治疗后血中Fg、PAI-1、PAgT水平均明显下降,使t-PA水平明显升高;常规治疗组治疗前后各项指标无明显变化。认为蝮蛇抗栓酶对UAP有可靠疗效 相似文献
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利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子-1(rPAI-1)具有许多与天然PAI-1相同的性质,rPAI-1对u-PA抑制活性研究的内容包括:几种化学物质(盐酸胍,尿素,硫氰酸钾,SDS,氯化钠等)对rPAI-1的激活作用,盐酸胍激活rPAI-1的浓度与温度效应,显色底物法和SDS-PAGE纤维蛋白自显影对rPAI-1活性的测定,活性态rPAI-1向潜状态的转变及其与盐浓度和pH值的关系。 相似文献
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目的:了解性激素对血栓形成的影响,方法:用发色底物方法测定去卵巢大白鼠及对照组血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)与其抑制物(PAl)活性,结果:去卵巢组大白鼠血浆t-PA与对照组比较无显著性差异(P〉0.05)。而去卵巢组大白鼠血浆PAI比对照组明显降低,两组比较有显著性差异(P〈0.05),结论:去卵巢组血浆中PAI降低,可能与卵巢激素的减少有关。卵巢激素会促使 PAI合成释放增加,这可能是服 相似文献
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应用蝮蛇抗栓酶3号(以下简称Svate—3)治疗心血管病高凝状态24例,剂量1.0u稀释后静滴,qd,3周为一疗程。治疗后患者全血粘度、血浆粘度、血小板聚集率、组织纤溶酶原激活物抑制剂(TPI)、血栓素B2(TXB2)、组织纤维连结蛋白(FN)均有显著下降,而组织纤溶酶原激活剂(TPA)、6-酮前列腺素Fα(6-Keto-PGFα)明显升高。提示,该药治疗心血管病高凝状态有效。 相似文献