雷公藤次生代谢产物雷公藤红素含量与环境因子相关性分析

采用多元逐步回归分析对分布于浙江、福建、湖南、湖北和贵州5个省内6类不同居群药用植物雷公藤(Tripterygium wi lfordi i)的160株个体进行了雷公藤红素含量和环境因子的相关性分析。结果表明, 在空间分布上, 各居群间的雷公藤红素含量差异较大, 其中湖南黄岩居群雷公藤红素含量最高, 为1.058 5×10-2g.g-1, 贵州雷山和福建泰宁居群最低,分别为4.988 9×10-3g.g-1和4.988 7×10-3g.g-1; 而在居群内的雷公藤红素含量相对一致, 基本呈正态分布。实验结果表明, 雷公藤中雷公藤红素的积累在很大程度上受环境因子的影响。进一步利用SPSS软件对各个环境因子作逐步回归分析, 表明年均日照时长(X1)、年均降雨量(X2)和土壤含氮量(X5)是影响雷公藤中雷公藤红素含量(Y)的主导因子, 且各因素均与雷公藤红素含量呈负相关。经检验, 回归方程为Y=19.308-0.01 X1-0.02 X2-0.062 X5, R值达到0.917, F检验回归方程的线性关系显著。研究结果表明,环境因子, 特别是日照、水分和土壤含氮量能够影响雷公藤中雷公藤红素的含量。该文还对提高雷公藤中药用成分雷公藤红 素含量的研究策略进行了讨论。     

雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1299增殖与凋亡的影响

目的：研究雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1299的杀伤作用及相关调控机制。方法：用细胞计数法测定不同浓度雷公藤红素对H1299细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测H1299细胞的细胞周期;用Western blotting检测剪切的（cleaved）聚ADP核糖聚合酶（PARP）、cleaved caspase-3和低氧诱导因子-1（HIF-1）的表达水平;用DCF-DA染色和荧光显微镜检测细胞内的活性氧（ROS）水平;用萤光素酶活性测定法检测NFκB的活性。结果：雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并使细胞阻滞在G2/M期。同时,雷公藤红素显著上调cleaved PARP和cleaved caspase-3的表达,提高细胞内的ROS水平,并且抑制NFκB的活性。结论：雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并诱导caspase依赖性的细胞凋亡,具体机制与细胞内ROS的积累和NFκB的活性抑制有关。     

Cr^3＋胁迫对苦草叶片活性氧清除系统和叶细胞超微结构的影响

研究了不同浓度Cr^3＋胁迫对苦草[Vallisneria natarts（Lour．）Hara]叶片活性氧清除系统及细胞超微结构的影响。结果表明,随Cr^3＋浓度的提高（0．5-15．0mg·L^-1）,苦草叶片中O2^-·和MDA含量、SOD和POD及CAT活性均呈现先上升后显著下降的变化趋势,且在10．0和15．0mg·L^-1 Cr^3＋胁迫条件下显著低于对照（P〈0．05）。在1．0mg·L^-1Cr^3＋胁迫条件下,O2^-·的含量达到最高（0．96 OD·g^-2）;在2．0mg·L^-1Cr^3＋胁迫条件下,MDA含量和SOD、POD及CAT活性最高。随Cr^3＋胁迫浓度的提高,苦草叶片细胞超微结构受损程度逐渐加深,导致核仁和高尔基体消失;线粒体脊突膨胀,线粒体膜受损并出现囊泡状结构;叶绿体变形、类囊体膨胀受损并最终导致叶绿体破损。表明高浓度Cr^3＋胁迫对苦草叶片细胞产生了不可逆的伤害。     

不同地理种源云南红豆杉的遗传多样性与紫杉醇含量相关性分析

应用AFLP和HPLC方法研究了云南红豆杉（Taxus wallichiana var．wdlwhiana）的遗传多样性与紫杉醇含量之间的关系。AFLP指纹图谱显示7个居群谱带明显分为两种式样。PopGenel．31和Arlequin3．1软件分析结果表明：云南红豆杉居群内遗传比较稳定,居群间遗传分化极其显著（L=0．67）。测定当年生小枝叶紫杉醇含量结果表明：紫杉醇含量在居群间和居群内个体差异都较大。天然林中潞西居群的紫杉醇平均含量为0．0185％;腾冲和永德居群的紫杉醇含量比较低,分别为0．0049％和0．0087％;禄丰栽培居群紫杉醇含量比较高,平均为0．0225％。在居群水平上,遗传多样性和紫杉醇含量有一定程度的关联,但在个体水平上明显无对应关系。     

不同品种菊花和贵州产野菊花中木犀草素的含量比较

目的测定并比较不同品种菊花和贵州产野菊花中木犀草素的含量。方法用高效液相色谱法测定木犀草素的含量。色谱柱为ODS柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-水-冰醋酸（体积比45：55：0．4）,检测波长为254nm,流速1．0mL／min。结果7个菊花样品的木犀草素含量,以贵州野菊花的木犀草素含量最高（3．876mg／g）,杭菊的木犀草素含量最低（0．302mg／g）。结论贵州产野菊花中木犀草素的含量均高于其他品种菊花,具有较高的药用价值。     

普通野生稻保护和未保护居群遗传多样性的比较

为了评价普通野生稻自然居群遗传多样性,用24对SSR引物对5个保护居群（江西东乡庵家山JXD、湖南茶陵HNC、湖南江永HNJ、广东高州大岭GDD、海南儋州HND）和3个未保护居群（广西武宣GXW、广西来宾GXL、广东高州朋山GDP）,共计356个单株进行了遗传多样性分析。24个位点均表现为多态,其中18个位点表现杂合子不足,RM339位点观察杂合度最高,RM336位点预期杂合度最高。SSR分析结果表明,8个居群的遗传多样性都较高,其中5个保护居群的Ae变幅为1．780（JXD）～2．504（HNJ）,肌变幅为0．397（JXD）～0．555（HNJ）;3个未保护居群Ae变幅为2、153（GDP）～3．226（GXL）．He变幅为0．492（GDP）～0．640（GXL）。5个保护居群与3个未保护居群之间的遗传距离较大（0．6585）。这说明虽然有些居群得到了保护,但未保护居群的保护、收集价值仍然很大。居群间遗传分化明显（Fst=0．399）,居群间遗传距离最小的HNJ居群与GXL居群的相似系数也只有0．43。F一统计显示所用居群都偏离了Hardy—Weinbery平衡（Fis=0．147）,其中GDD、GDP、HND居群Fis〈0,表现为杂合子过剩;居群JXD的Fis为0．109,表现轻微的杂合子缺乏;HNC、HNJ、GXW、GXL的F括〉0,Fis值变幅为0．315（GXW）～0．473（HNJ）,说明这4个居群中杂合子不足,可能与这些居群自交比例高有关。     

可见分光光度法测定人尿中痕量1-萘酚

目的：建立一种可见分光光度法单独测尿中痕量1-萘酚的新方法。方法：在碱性介质中,1-蔡酚（1-NAP）与氯霉素作用生成蓝色物质导致体系的吸光度增加,2-NAP不干扰测定。结果：该蓝色产物的最大吸收波长Amax=472．0nm,其吸光度与1-NAP摩尔浓度在7．64×10^-7mol／L-6．31×10^-4mol／L范围内线性关系良好,线性回归方程为△A=0．3146C＋0．0239,相关系数r=0．9973,检出限为2．29×10^-7mol／L,相对标准偏差RSD为3．25％-6．42％,加标回收率为95．3％-105．7％。结论：本方法灵敏、简单、快速、易于推广,用于人尿中1-NAP含量的单独测定结果满意。     

雷公藤内酯醇对 PC12细胞增殖的抑制作用及机制初探

目的:研究雷公藤内酯醇(triptolide)对PC12细胞增殖的影响及其作用的机制,为其在临床上治疗肿瘤提供实验依据.方法:利用形态学观察、四甲基偶氮唑(MTT)比色分析、流式细胞术和逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测雷公藤内酯醇对体外培养的嗜铬细胞瘤细胞(PC12 cell)增殖的影响.结果:雷公藤内酯醇(5×103、25×103 g/L)与PC12细胞作用24 h、48 h或72 h均可抑制PC12细胞的增殖,并且这种抑制作用可随着雷公藤内酯醇浓度的增加而增强.但低浓度的雷公藤内酯醇(1×103g/L)对PC12细胞增殖无明显影响.5×103 g/L雷公藤内酯醇与PC12细胞作用24 h后,可使细胞周期中的G0～G1期比例增加,S期比例下降.PC12细胞与雷公藤内酯醇作用后,细胞的翻译延伸因子2A3-2的表达减弱,而且作用48 h与作用24 h相比,2A3-2的表达减弱更为明显.结论:雷公藤内酯醇可抑制PC12细胞的增殖,该抑制可能是通过改变2A3-2基因的表达从而阻止细胞的G0～G1期向S期过渡来实现的.     

骨钙素减轻糖尿病大鼠血-视网膜屏障的损伤

目的：研究骨钙素（Osteocalcin）对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血-视网膜屏障的影响。方法：取健康SD大鼠24只,随机分为正常对照组、糖尿病1月（DM1）组、糖尿病骨钙素干预（DM1＋OCGY）组。尾静脉注射STZ建立DM模型,成模后DM1＋OCGY组腹腔注射骨钙素（2．57mg·kg·1·d^-1）,DMl组腹腔注射等量生理盐水,1个月后处死动物。用伊文思蓝方法检测大鼠血-视网膜屏障的改变。结果：造模1月后大鼠视网膜血管渗透性显著增加,共聚焦显微镜显示红色荧光斑点主要分布在视网膜血管周围,给予骨钙素后,红色荧光斑点明显减少,进一步定量显示1M糖尿病大鼠视网膜伊文思蓝含量为57．4±8．7μg·g^-1,骨钙素能够改变这种变化,DM1＋OCGY组伊文思蓝含量为26．1±3．8μg·g^-1。结论：骨钙素能抑制糖尿病视网膜病的血管渗漏,对糖尿病引起的血一视网膜屏障破坏有保护作用。     

血清降钙素原在鉴别细菌性感染与自身免疫性疾病活动期中的应用价值

目的：探讨血清降钙素原（procalcitonin,PCT）在鉴别诊断自身免疫性疾病活动期与细菌感染中的应用价值。方法：选择析深圳市保健办2011年1月-2012年3月收治的30例自身免疫性疾病活动期和34例细菌感染患者为研究对象,测定其血清c反应蛋白（C-reactive protein,CRP）和PCT的水平。结果：感染组患者CRP水平为（0．1162±0．0873）gm,PCT水平（2．37±7．02）±10^-3gm,自身免疫活动期患者CRP水平（0．0639±0．0687）gm,PCT浓度（0．09±0．08）×10^-3g／L。ROC曲线下面积（AUC）和95％可信区间（CI）分别为0．75和0186,0．61-0．83和0．74-0．94,差异具有统计学意义（P〈0．05）。CRP联合PCT水平预测的AUC为0．82．其与单独PCT水平相比没有显著性差别（P=0．74）。CRP的最佳临界值为0．0722g／L,灵敏度为73．5％,特异性为69．2％;PCT的最佳临界值为0．09×10^-3g/L,其灵敏度为82．1％,特异性为72．5％。结论：在鉴别活动期自身免疫疾病患者与细菌感染时,PCT的灵敏度与特异性比CRP高,但其联合CRP对此类诊断并无显著意义。     

贵州九香虫营养成分分析

分析贵州产九香虫Aspongopus chinensis Dallas体内的营养成分。结果表明:从江和习水产九香虫都具有丰富的营养,其中粗蛋白分别为350.9mg·g-1和356.5mg·g-1、粗脂肪432.6mg·g-1和436.2mg·g-1、粗灰分22.9mg·g-1和22.8mg·g-1;总氨基酸含量为334.3mg·g-1和253mg·g-1,其中必需氨基酸占总氨基酸的41.22%和33.34%,必需氨基酸与非必需氨基酸之比分别为0.70和0.50;九香虫体内脂肪酸多以油酸和软脂酸为主,其中油酸占总脂肪酸的49.48%和41.54%;含有丰富的矿物质和微量元素,尤其是Mg的含量达到1.26mg·g-1和1.32mg·g-1,且不含有对人体有害的Hg、Pb和As;含有多种维生素,其中维生素C含量最为丰富,为0.78mg·g-1和0.79mg·g-1。作为具有保健功能的中药昆虫,同时具有丰富的营养成分,九香虫是极具潜力的药食两用食品。     

不同脱水速率对木奶果种子脱水敏感性及抗氧化酶活性的影响

研究了脱水速率对木奶果种子脱水敏感性和抗氧化酶活性的影响。木奶果种子初始含水量高达1.72gH2O·g^-1DW,萌发率为86.67%。含水量降至0.90gH2O·g^-1DW左右时,慢速脱水种子的萌发率为97.78%,而快速脱水的种子萌发率仅为64.44%。快速脱水至含水量为0.76gH2O·g^-1DW时萌发率为21.67%,而慢速脱水至0.68gH2O·g^-1DW时,萌发率仍高达55.56%。确定了木奶果种子是对慢速脱水耐受性更高的顽拗性种子。在种子脱水过程中,相对电解质渗透速率和脂质过氧化产物（TBARs）都呈升高趋势,但慢速脱水后的种子,其TBARs升高的速率较快速脱水的慢。快速脱水的种子中超氧化岐化酶（SOD）、脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）的活性较慢速脱水的高,而过氧化氢酶（CAT）活性较慢速脱水的低,未检测出谷胱甘肽还原酶（GR）的活性。这些结果表明,在木奶果种子脱水耐性获得过程中过氧化氢酶比其他抗氧化酶作用更大。     

油菜愈伤组织中烯丙基硫苷的积累和某些外源碳氮化合物对其含量的影响

油菜愈伤组织在培养中生长34d的增殖量最大,增殖倍数为7．08倍,烯丙基硫苷的含量在第6天最高;外源L-缬氨酸明显促进烯丙基硫苷的积累,其浓度为2和4mmol·L^-1时烯丙基硫苷含量分别达到98．5和97．40mg·g^-1（DW）;蔗糖最有利于油菜愈伤组织的生长和其中烯丙基硫苷的积累,浓度以30g·L^-1。的蔗糖为最佳。     

苦苣菜属5种植物的黄酮类成分含量分析

菊科（Compositae）苦苣菜属（Sonchus L．）的许多种类在民间作为药用植物使用,大多具有清热解毒、消肿排脓及凉血利湿等功效。苦苣菜属植物主要含有黄酮类及倍半萜类活性成分,其中苦苣菜（S．oleraceus L．）中的总黄酮对脑缺血缺氧小鼠及实验性肝损伤均有明显的保护作用。     

几种树木的树皮中绿色组织的光合特性初探

测定10个树种树木上的三年生枝条树皮内绿色组织的叶绿素含量、光合速率和枝干的呼吸速率的结果表明：10个树种树皮内叶绿素含量为0.0649～0.3460mg·g^-1（FW）,叶绿素a/b为1.05～1.91,均低于叶片或针叶;树皮内绿色组织的光合速率为0.21（红松）～2.06（水曲柳）μmol（O2）·m^-2·s^-1,枝干呼吸速率1.76（红松）～3.21（落叶松）μmol（O2）·min^-1·g^-1（FW）。树皮内绿色组织的光补偿点（LCP）、光饱和点（LSP）低于叶片,而表观量子效率（AQY）高于叶片或针叶。据此认为,树皮内绿色组织适应于阴生环境,所以有较强的耐阴能力。     

体外装配核小体过程组蛋白浓度依赖的动力学模型

为探索组蛋白浓度对核小体体外装配的影响,本研究表达纯化了4种组蛋白,通过控制实验反应体系中组蛋白的浓度,利用盐透析法在体外装配了核小体,检测分析了组蛋白浓度与核小体组装效率的关系。以此实验数据为基础,提出了核小体组装过程组蛋白浓度依赖性的动力学模型。实验结果发现,反应体系中组蛋白浓度与核小体生成量呈典型的线性关系。依据动力学理论模型,进行线性回归拟合,回归系数达到0.963;经计算601 DNA序列组装核小体的反应速率常数k为1.49×10^-5mL·h·μg^-1。CS1序列验证动力学模型的线性回归相关系数为0.989,反应速率常数为1.52×10^-5mL·h·μg^-1。该实验方法及动力学模型中反应速率常数k可用于评价相同长度的DNA序列组装核小体的能力、组蛋白与其突变体以及组蛋白变体之间形成核小体结构能力的差异。该动力学模型的建立为理解核小体装配、核小体定位、染色质结构等相关问题提供了理论指导。     

雌激素对成骨细胞增殖及IGF-2表达的调控作用

目的 探讨雌激素对大鼠成骨细胞功能的影响及胰岛素样生长因子2（insulin-like growth factor 2,IGF-2）表达的调控机理。方法应用1×10^-10mol／L、1×10^-8mol／L、1×10^-6mol／L浓度的雌二醇（estradiol,172）分别作用原代培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞24h;采用MTT法和对硝基酚磷酸盐法检测成骨细胞增殖能力和细胞中碱性磷酸酶（ALP）活性;应用实时定量PCR和Western印迹杂交分析成骨细胞中IGF-2的mRNA和蛋白质的表达规律。结果1×10^-6mol／L浓度的磁使大鼠成骨细胞增殖能力和ALP活性分别增加了67％和55％,使IGF-2的mRNA与蛋白质的表达水平分别增加了90％和140％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论雌激素对成骨细胞中IGF-2基因的表达具有正性调控作用。成骨细胞中IGF-2的高表达可能与雌激素调节成骨细胞增殖和分泌功能相关。     

人参愈伤组织的PSY基因遗传转化

将八氢番茄红素合成酶基因（PSY）重组于植物双元表达载体pBin438,得到重组质粒pBin438-PSY。用冻融法将其导入农杆菌EHA101中,采用叶盘法转化人参愈伤组织,对所获得的抗性细胞系进行PCR和Southern检测,并对表达产物进行了薄层层析（TLC）、光谱分析、高效液相色谱（HPLC）检测及含量测定。结果表明PSY基因已成功导入人参愈伤组织细胞基因组,并已得到高效表达,表达产物β-胡萝卜素含量为143μg·g^-1人参细胞干重。本研究利用转基因方法在人参愈伤组织细胞中成功地表达了八氢番茄红素合成酶基因,为进一步提高人参的营养价值奠定了基础。