雷公藤次生代谢产物雷公藤红素含量与环境因子相关性分析

采用多元逐步回归分析对分布于浙江、福建、湖南、湖北和贵州5个省内6类不同居群药用植物雷公藤（Tripterygium wilfordil）的160株个体进行了雷公藤红素含量和环境因子的相关性分析。结果表明,在空间分布上,各居群间的雷公藤红素含量差异较大,其中湖南黄岩居群雷公藤红素含量最高,为1．0585×10^-2g·g^-1,贵州雷山和福建泰宁居群最低,分别为4．9889×10^-3g·g^-1和4．9887×10^-3g·g^-1;而在居群内的雷公藤红素含量相对一致,基本呈正态分布。实验结果表明,雷公藤中雷公藤红素的积累在很大程度上受环境因子的影响。进一步利用SPSS软件对各个环境因子作逐步回归分析,表明年均日照时长（X）、年均降雨量（X2）和土壤含氮量（蚝）是影响雷公藤中雷公藤红素含量（Ⅵ的主导因子,且各因素均与雷公藤红素含量呈负相关。经检验,回归方程为Y=19．308-0．01X1-0．02X2—0．062X5,雅达到0．917,F检验回归方程的线性关系显著。研究结果表明,环境因子,特别是日照、水分和土壤含氮量能够影响雷公藤中雷公藤红素的含量。该文还对提高雷公藤中药用成分雷公藤红素含量的研究策略进行了讨论。     

环境胁迫对雷公藤中雷公藤红素含量的影响

雷公藤(Tripterygium wilfordii)是我国的名贵药用植物, 其药用成分雷公藤红素是医药研究中重要的化学单体。环境胁迫能促进药用植物次生代谢物质的合成与积累, 该文通过正交设计, 探讨了水分、光照、土壤氮含量三因素两水平轻度胁迫处理对雷公藤幼苗中雷公藤红素含量的影响。研究结果表明: 根部是雷公藤红素含量最丰富的部位; 雷公藤幼苗在水分、光照及土壤氮含量胁迫条件下根系中雷公藤红素的含量分别提高了10.8％、14.4％和13.0％, 光照对雷公藤红素含量的增加最明显, 短期的轻度胁迫可提高根中雷公藤红素的含量。     

HSF1-PGC1α介导雷公藤红素代谢调节作用

<正>雷公藤红素(celastrol)有调节机体能量平衡与代谢稳态的药理作用,并能有效抵御肥胖。新近研究揭示,雷公藤红素抵抗肥胖的药理作用,是由热休克因子1(heat shock factor-1,HSF1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)参与介导的。Ma等研究人员利用小鼠模型发现,雷公藤红素可激活转录因子HSF1与PGC-1α,     

雷公藤红素抑制Cd2+诱导的神经毒性北大核心CSCD

镉(cadmium,Cd)是环境中常见的一种重金属,Cd^(2+)可以通过穿透血脑屏障,产生神经毒性,从而诱发各种神经退行性疾病,雷公藤红素是雷公藤的一种有效成分,具有抗癌、抗炎等一系列药理作用,本文探究雷公藤红素对Cd^(2+)诱导的相应神经毒性的影响作用。通过细胞增殖实验、细胞膜完整性实验、细胞形态实验探索了Cd^(2+)对小胶质细胞HMC3活力的影响;通过一氧化氮(NO)检测实验、脂质过氧化(malondialdehyde,MDA)检测实验、蛋白免疫印迹实验分析了Cd^(2+)的神经毒性以及雷公藤红素对Cd^(2+)诱导的相应神经毒性的影响。结果表明:与对照组相比,当Cd^(2+)浓度达到40μmol/L时,对HMC3细胞增殖抑制率为(57.17±8.23)%(P<0.01,n=5),继续增大Cd^(2+)浓度,细胞活性将进一步降低;当Cd^(2+)浓度达到40μmol/L以上时,HMC3的细胞膜明显受到破坏,并且破坏作用与浓度呈剂量依赖性关系;随着Cd^(2+)浓度的增加,细胞形态开始变化,贴壁效果变差。Cd^(2+)使HMC3细胞释放的NO量显著增加,而雷公藤红素能够有效地抑制Cd^(2+)诱导的HMC3细胞NO的释放;Cd^(2+)使HMC3细胞脂质过氧化水平显著增加,加入10^(-7) mol/L雷公藤红素后,MDA的释放量显著减少;Cd^(2+)会使p-PI3K蛋白含量增加,而加入了雷公藤红素(10^(-7)、10^(-6) mol/L)后,p-PI3K蛋白和p-AKT蛋白的激活均被抑制,从而抑制了细胞凋亡。综上所述,雷公藤红素能够抑制Cd^(2+)诱导的小胶质细胞毒性,从而起到神经保护作用。     

雷公藤内酯醇对 PC12细胞增殖的抑制作用及机制初探

目的:研究雷公藤内酯醇(triptolide)对PC12细胞增殖的影响及其作用的机制,为其在临床上治疗肿瘤提供实验依据.方法:利用形态学观察、四甲基偶氮唑(MTT)比色分析、流式细胞术和逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测雷公藤内酯醇对体外培养的嗜铬细胞瘤细胞(PC12 cell)增殖的影响.结果:雷公藤内酯醇(5×103、25×103 g/L)与PC12细胞作用24 h、48 h或72 h均可抑制PC12细胞的增殖,并且这种抑制作用可随着雷公藤内酯醇浓度的增加而增强.但低浓度的雷公藤内酯醇(1×103g/L)对PC12细胞增殖无明显影响.5×103 g/L雷公藤内酯醇与PC12细胞作用24 h后,可使细胞周期中的G0～G1期比例增加,S期比例下降.PC12细胞与雷公藤内酯醇作用后,细胞的翻译延伸因子2A3-2的表达减弱,而且作用48 h与作用24 h相比,2A3-2的表达减弱更为明显.结论:雷公藤内酯醇可抑制PC12细胞的增殖,该抑制可能是通过改变2A3-2基因的表达从而阻止细胞的G0～G1期向S期过渡来实现的.     

鳖的形态学统计分析

利用生物统计学的方法对鳖的形态进行了分析 ,结果如下 :鳖的年龄 (Y)与体重 (X)的一元回归方程为 :Y =0 0 0 736 1X 0 4 534,年龄 (Y)与腹甲长 (X)的一元回归方程为 :Y =0 2 4 59X- 0 5480 ;雌雄鳖尾长差异显著 (P <0 0 5) ,雄鳖体重 (Y)对尾长 (X)的一元回归方程为 :Y =2 56 6 4X - 82 8 6 0 ;野生鳖体重 (Y)对背甲长 (X1)、体高 (X5)、头长 (X8)、眼径 (X9)、口裂 (X12 )等 13个形态学指标的最优多元回归方程为 :Y =880 51 6 79 16X1- 10 6 0 91X5 146 4 72X8- 82 96 6 4X9- 3142 0 9X12 ;控温条件下快速生长鳖体重 (Y)对腹甲宽 (X4 )、体高 (X5)、头发 (X8)、眼间距(X10 )、尾长 (X13)等 13个形态学指标的最优多元回归方程为 :Y =- 97 4 6 38 99X4 30 2 6X5-2 9 34X8 140 83X10 - 30 4 2X13.     

响应面法优化枯草芽孢杆菌NHS1产芽孢发酵培养

为提高枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NHS1菌株发酵液中芽孢含量,采用单因素试验与响应曲面法优化试验相结合的方式,对该菌发酵培养基中的碳源、氮源以及无机盐等组成成分进行了优化。通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验以及BoxBchnken试验构建响应方程,得到方程为:Y=-3.30+3.853X1+0.0928X2+0.623X3-0.913X1×X1-0.00704X2×X2-0.0433X3×X3-0.0033X1×X2-0.0700X1×X3+0.00167X2×X3。利用该方程预测得到最优培养基:淀粉1.88 g·L~(-1)、Na Cl 6.83 g·L~(-1)、玉米粉5.60 g·L~(-1),酵母粉10g·L~(-1),蛋白胨10 g·L~(-1),牛肉膏15 g·L~(-1),葡萄糖2 g·L~(-1),Mg SO43 g·L~(-1)。利用优化培养基,在36℃、170 r·min~(-1)条件下摇瓶发酵72 h,芽孢数达到2.42×109cfu·m L~(-1),比优化前提高1.5倍。     

雷公藤红素对FADU细胞增殖抑制和促进凋亡作用

目的:探索不同浓度雷公藤红素(celastrol)对下咽癌FADU细胞增殖抑制及促进其凋亡的机制。方法:用不同浓度(0μmol/L,1μmol/L,3μmol/L,5μmol/L)雷公藤红素作用于FADU细胞,倒置显微镜下观察雷公藤红素干预后细胞形态变化情况;CCK-8法检测不同时间段(24、48、72 h)药物干预后FADU细胞的增殖变化;流式细胞仪检测雷公藤红素干预24 h后细胞凋亡率变化;Western-Blot检测不同药物浓度作用24 h后FADU细胞PI3K信号通路中与凋亡相关的关键蛋白的表达变化情况。结果:与对照组相比,在倒置显微镜下FADU细胞形态明显改变,细胞数量明显减少,细胞边界模糊不清,漂浮细胞增多,而随着用药浓度的增加细胞的增殖能力被显著抑制,PI3K、AKT、P-m TOR、Bcl-2蛋白表达明显减少,并且肿瘤细胞的凋亡率明显增高。结论:雷公藤红素对FADU细胞具有显著的增殖抑制效果,同时能够促进细胞凋亡,其原理主要与通过下调PI3K信号通路凋亡相关蛋白的表达有关。     

不同居群山苍子果实精油和柠檬醛含量及其与地理-气候因子的相关性

采用水蒸气蒸馏法和气相色谱技术对取自浙江富阳、贵州毕节和织金、湖南永州、福建永安和建瓯、云南景东、四川长宁、江西安远和分宜10个居群的山苍子[ Litsea cubeba (Lour.) Pers.]果实精油含量和柠檬醛含量进行测定,并分析了果实精油含量和柠檬醛含量与地理-气候因子的相关性;在此基础上对供试居群进行了聚类分析.测定结果表明:各居群的果实精油含量和柠檬醛含量差异显著,精油含量均值为3.60％,变异系数(CV)为1.54％～10.46％;柠檬醛含量均值为3.52％,CV为24.78％ ～40.54％;云南景东居群精油含量最高(4.56％)、江西分宜居群最低(3.14％);福建永安居群柠檬醛含量最高(7.01％)、贵州毕节居群最低(1.85％),且柠檬醛含量的表型分化系数为57.87％,说明居群间柠檬醛含量的变异幅度大于精油含量,且居群间柠檬醛含量的变异程度大于居群内.相关性分析结果显示:山苍子果实精油含量与经度和7月均温呈极显著负相关,与年降雨量呈显著负相关,与海拔呈极显著正相关;柠檬醛含量与经度和年降雨量分别呈显著和极显著正相关,说明精油含量随经度增大而降低,且受环境水分和温度变化的影响较大;而柠檬醛含量随经度增大而提高,并明显受生境中水分条件的调节.聚类分析结果表明:在欧氏距离15处,供试的10个山苍子居群主要分成3类,根据地理位置大体可划分为西南部和东南部2个种质类型,其中福建永安居群较为特殊.研究结果表明:不同居群山苍子果实精油含量和柠檬醛含量差异与遗传特性、地理分布和生境气候条件均有一定的相关性.     

Cu胁迫对紫背萍的生长及活性氧清除系统的影响

通过水培实验研究了重金属铜(Cu)胁迫下的紫背萍的生理响应。结果表明:Cu对紫背萍的生长有低浓度(≤1.8mg.L-1)促进、高浓度(>1.8mg.L-1)抑制作用。紫背萍的植物体数(Y1)、叶绿素含量(Y2)均与Cu浓度(X)呈显著负相关,回归方程为:Y1=-0.53X 34.47、Y2=-0.035X 0.90;Cu对紫背萍的植物体净增殖量、叶绿素含量的4天半数抑制浓度(4d-IC50)分别为5.48mg.L-1和12.12mg.L-1。紫背萍体内的SOD活性(Y3)和CAT活性(Y4)与Cu浓度(X)之间均呈曲线相关,回归方程分别为:Y3=-5.367X2 140.56X-59.25、Y4=-7.146X2 123.65X 1101.03。POD活性在Cu浓度不超过10mg.L-1时,较之对照相差不大,但在18mg.L-1时则大幅度下降。     

湖南省花臭蛙复合体分类及分布格局

运用形态特征系统聚类和分子系统学分析,研究先前报道的湖南省花臭蛙(Odorrana schmackeri)各地理种群的分类组成及其分布格局。结果显示,原认定的花臭蛙湖南省各地理种群已分化为花臭蛙和黄岗臭蛙(O.huanggangensis)两个物种。分布于湘西南及南部雪峰山和南岭的花臭蛙种群应修订为黄岗臭蛙,为湖南省臭蛙属物种新发现,湘西北及湘东南罗霄山脉的种群为花臭蛙,黄岗臭蛙与花臭蛙在张家界市武陵源景区同域分布。湘西北武陵山与雪峰山之间以及湘中丘陵地带花臭蛙种群的分类归属,黄岗臭蛙和花臭蛙在湖南省分布格局的形成以及同域分布的机制值得探讨。     

外来入侵植物北美车前繁殖及光合生理生态学研究

 北美车前（Plantago virginica）原产北美,20世纪50年代进入我国华东地区,近年来其种群呈现爆发式增长态势,已分布到上海、浙江、江西、江苏等省区,是一种典型的生态入侵种。本文计测了该种在不同密度下的繁殖指标,统计了种群密度与繁殖指标间的关系;应用LAC-4 (ADC英国)光合和蒸腾系统测定了该种及其伴生杂草一年蓬（Erigeron annuus）、小飞蓬（Conyza canadensis）、野塘蒿（Conyza bonarinsis）、马缨丹（Lantana camara）、空心莲子草（Alternathera philoxeroides）、菊芋（Helianthus tuberoses）、蓖麻（Ricinus communis）、紫茉莉（Mirabilis jalapa）、车前（Plantago asiatica）、苦苣菜（Sonchus oleraceus）、羊蹄（Rumex japonicus）、藜（Chenopedium album）和黄鹌菜（Youngia japonica）等杂草的光合作用指标,作出了它们的光合 光响应曲线。主要实验结果有：1）北美车前个体花穗重（Y1）、花数／穗（Y2）与种群密度（X）呈现倒数关系（Y1 = 0.138 2+15.959 8/X, Y2 = 46.306 9+6 914.07/X）;随着种群密度增加,北美车前的繁殖投资（Y3）、与繁殖投资关系密切的种子数／营养器官重（Y4）呈线性增加（Y3 = 0.046 9＋0.000 2X,Y4 = 130.24＋0.023 9 X）; 2） 随着北美车前种群密度的增加,个体间的大小不整齐性（Y5）变小(Y5 = 0.374 8 - 0.000 02X);　3）种群个体间大小不整齐性（Y5）与繁殖投资（X）呈明显负相关(Y5 = 0.379 3 - 0.106 6 X),即随着个体大小不整齐性的增加,北美车前种群的繁殖投资减少;4）以自然条件下测得的光合作用数据为基础,拟合得到了北美车前及其它13种伴生杂草的光合 光响应曲线。北美车前的光合 光响应曲线符合Y= - 7E-06X2+0.022 3X-0.831 2,光补偿点、光饱和点和最大净光合速率分别为37.32 μmol·m－2·s－1、159 3 μmol·m－2·s－1和16.93 μmol CO2·m－2·s－1,说明北美车前是典型的阳生杂草。从光补偿点分析,北美车前的耐荫能力比车前、黄鹌菜、小飞蓬、一年蓬、野塘蒿、蓖麻、加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)、苦苣菜、羊蹄和马缨丹的要弱;北美车前净光合速率比一年蓬、小飞蓬、野塘蒿和加拿大一枝黄花等要低些,但是比藜、苦苣菜、蓖麻等的要高,与同属的车前比较接近;5）在5月下旬,杂草性极强的一年蓬、小飞蓬和空心莲子草的光合午休现象不明显,逸生杂草紫茉莉具有明显的光午休现象,北美车前是早春杂草,在5月下旬也有明显的光合午休现象,反映出该种不能够很好地适生于5月下旬的高温强光环境。通过分析,得出如下结论：1）随着种群密度的增加,北美车前产生种群自疏作用,使个体大小不整齐性下降;高密度给北美车前种群造成某种逆境状态,种群以r-对策的生存方式适应环境,提高其繁殖投资,产生尽可能多的种子,以保证后代的生存,这反映出北美车前在繁殖策略上灵活的调节能力;2）北美车前种群在定居后,如果定居点不再受到人为干扰,其种群将被快速更替,这与其粘液性的种子、较高的光补偿点有关;3）通过保护植被,定植高秆植物,减少对环境的干扰,能够有效地治理该外来杂草。     

安西荒漠植被的多元分析

应用数量分类(TWINSPAN)和排序(DCA)方法分析了安西砾石戈壁荒漠植被,并应用逐步回归分析方法确定了群落和环境因素的关系方程。结果表明,该区砾石戈壁荒漠植被可分为6个主要群落类型。这些群落类型与土壤总含盐量、氯化物含量、硫酸盐含量及年降水量有密切的关系。群落按低盐到高盐和干旱到极旱的环境梯度分布。60个样地在DCA排序第一轴的位置(X_1)与土壤含盐量(S)、氯化物含量(Cl)、硫酸盐含量(SO)显著相关,而第二轴的位置(X_2)与年降水量(R)有密切的关系,其关系式为:1/X_1=2.1992 0.0225/S-0.0188/Cl-0.0567/SO(R=0.797,P<0.01);X_2=-82.8561 117.9219logR(R=0.817,P<0.01)。     

番茄田二代棉铃虫发生规律及药剂防治

第 2代棉铃虫Helicoverpaarmigera是危害番茄最严重的世代 ,95 %左右的卵产在番茄植株顶尖至第 4复叶层的嫩梢、嫩叶、果萼和茎基上 ,6月 2 0日至 7月 5日累计平均每株落卵 32 8粒。在番茄上第 2代棉铃虫的卵量和幼虫量与第 1代蛾量密切相关 ,卵量 (Y1)与第 1代蛾量 (x)关系式为 :Y1=-31 5 9+ 1 7783X ,n =6 ,r=0 85 6 2 ,幼虫量 (Y2 )与第 1代蛾量 (X)关系式为Y2 =31 3+ 0 1 34X ,n =6 ,r=0 86 5 2 。在第 2代棉铃虫产卵初盛期应用Bt菌剂含孢子 1 0 0亿个 mL ,2 0 0倍液喷雾 3次 ,或 1 8%阿维菌素 1 2 1 5g (a .i.) hm2 兑水喷雾 2次 ,防效显著。     

钉螺分布与滩地环境因子的关系

长江中下游滩地钉螺的分布与滩地的地下水位关系显著,当地下水位为３２ｃｍ左右时,钉螺密度和有螺框出现率分别达到其最大值。活螺密度（Ｙ）与地下水位的回归方程为：Ｙ＝－１．９６８６＋０．２５１２Ｘ－０．００４０１３Ｘ＾２;有螺框出现率（Ｙ）与地下水位的关系为：Ｙ＝－５５．９７２０＋７．５６８９Ｘ＝－０．１１８０Ｘ＾２;５月份钉螺适宜在土壤含水率３０％左右的土壤表层生活。当土壤含水率为２８－３０％时,滩面     

Celastrol suppresses IFN-gamma-induced ICAM-1 expression and subsequent monocyte adhesiveness via the induction of heme oxygenase-1 in the HaCaT cells

Celastrol, a quinone methide triterpenoid derived from the medicinal plant Tripterygium wilfordii, possesses various biological activities such as anti-oxidant, anti-tumor, and anti-inflammatory activities. In this study, we examined the suppressive effect of celastrol on IFN-γ-induced expression of ICAM-1 and the molecular mechanism responsible for these activities. We found that celastrol induced mRNA and protein expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in the human keratinocyte cell line HaCaT. Treatment of HaCaT cells with tin protoporphyrin IX (SnPP), a specific inhibitor of HO-1, reversed the suppressive effect of celastrol on IFN-γ-induced protein and mRNA expression of ICAM-1. HO-1 knockdown using small interfering RNA (siRNA) led to reverse inhibition of IFN-γ-induced up-regulation of ICAM-1 by celastrol. In addition, SnPP reversed suppression of IFN-γ-induced promoter activity of ICAM-1 by celastrol. Furthermore, blockage of HO-1 activity by SnPP and HO-1 siRNA reversed the inhibitory effect of celastrol on IFN-γ-induced adhesion of monocytes to keratinocytes. These results suggest that celastrol may exert anti-inflammatory responses by suppressing IFN-γ-induced expression of ICAM-1 and subsequent monocyte adhesion via expression of HO-1 in the keratinocytes.     

Celastrol protects human neuroblastoma SH-SY5Y cells from rotenone-induced injury through induction of autophagy

Celastrol, an active component found in the Chinese herb tripterygium wilfordii has been identified as a neuroprotective agent for neurodegenerative diseases including Parkinson’s disease (PD) through unknown mechanism. Celastrol can induce autophagy, which plays a neuroprotective role in PD. We tested the protective effect of celastrol on rotenone-induced injury and investigated the underlying mechanism using human neuroblastoma SH-SY5Y cells. The SH-SY5Y cells were treated with celastrol before rotenone exposure. The cells survival, apoptosis, accumulation of α-synuclein, oxidative stress and mitochondrial function, and autophagy production were analyzed. We found celastrol (500 nM) pre-treatment enhanced cell viability (by 28.99%, P < 0.001), decreased cell apoptosis (by 54.38%, P < 0.001), increased SOD and GSH (by 120.53% and 90.46%, P < 0.01), reduced accumulation of α-synuclein (by 35.93%, P < 0.001) and ROS generation (by 33.99%, P < 0.001), preserved MMP (33.93 ± 3.62%, vs. 15.10 ± 0.71% of JC-1 monomer, P < 0.001) and reduced the level of cytochrome C in cytosol (by 45.57%, P < 0.001) in rotenone treated SH-SY5Y cells. Moreover, celastrol increased LC3-II/LC3 I ratio by 60.92% (P < 0.001), indicating that celastrol activated autophagic pathways. Inhibiting autophagy by 3-methyladenine (3-MA) abolished the protective effects of celastrol. Our results suggested that celastrol protects SH-SY5Y cells from rotenone induced injuries and autophagic pathway is involved in celastrol neuroprotective effects.     

黄鳝体内寄生胃瘤线虫的染色体核型及G-带分析

采用常规空气干燥法制片,对寄生于黄鳝(Monopterus albus)体腔内的胃瘤线虫(Eustrongylidesignotus)染色体核型进行分析。结果表明:胃瘤线虫体细胞有12条染色体,为二倍体,核型公式为2n=12=10 m+2 sm。由5对常染色体和1对性染色体组成,性别决定模式为XX-XY,其中X、Y和1～4号染色体都为中着丝粒染色体,5号为亚中着丝粒染色体。每对染色体都有特定的G-带带型。     

Primary Study on Interrelation Between Plant Communities and Environmental Factors in the North Shore of Qinghai Lake

Eighteen plant communities were surveyed by quaduats in the north shore of Qinghai Lake. The communities were analyzed using PCA (principal component analysis) ordination and regression procedure to determine the distribution patterns of the plant communities and relationship between the communities and environmental factors. The results showed that the distribution of the plant communities were closely related to the moisture and salt content of soil. The correlation between species diversity or ecological dominance of the communities and gradient of environmental factors was not significant, but the two indexes of community showed multivarient line relationship with the first principal component, or the gradient of soil water, and the regression model as below: Y =- 4.85 4–1.47X1 4- 10.71X2 (P<0. 01).