亚硒酸钠诱发的晶状体上皮细胞DNA损伤及修复

观察了亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞（ＲＬＥｃｅｌｌｓ）而造成的ＤＮＡ单链断裂（ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｓ,ＳＳＢ）,并对其ＤＮＡ损伤、修复动力学做了初步研究．发现ＳＳＢ严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其ＳＳＢ重接修复约在３０～６０ｍｉｎ内完成．还作了有关非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的检测,发现与ＳＳＢ相比,ＵＤＳ发生迟且持续时间更长,提示Ｎａ２ＳｅＯ３可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成ＳＳＢ以外,还可能造成其它种类的ＤＮＡ损伤．     

亚硒酸钠对大鼠晶体上皮细胞αA晶体蛋白基因转录的影响

在体外观察了亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）作用于大鼠晶体上皮细胞（ＲＬＥｃｅｌｌｓ）而引起其晶体蛋白基因转录的改变,对不同浓度的硒在体外对αＡ晶体蛋白基因转录的影响作了初步的研究,结果发现,随着亚硒酸钠浓度的升高,αＡ基因的转录下降;而当亚硒酸钠浓度升至５×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ时,αＡ基因的转录又呈反跳性回升,提示硒在致障过程中对晶体蛋白基因转录的影响作用不可忽视。同时αＡ晶体蛋白在晶体细胞内,至少应     

Se和环境中富里酸对小麦种子发芽的影响及其生理特性

利用种子发芽实验研究了亚硒酸钠（ＮＶ２ＳｅＯ３）和从土壤中提取的富里酸（Ｆｕｌｖｉｃ ａｃｉｄ, ＦＡ）对小麦种子发芽和生长的影响,以及 ＦＡ对亚硒酸钠毒性的抑制作用．结果表 明．ＦＡ和低浓度Ｎａ２ＳｅＯ３对种子发芽及发芽后的生长有促进作用,高浓度 Ｎａ２ＳｅＯ３明显 降低种子发芽率、种子活力、α－淀粉酶活性及幼苗的生长,ＦＡ对亚硒酸钠的毒性有一定的 抑制作用．     

亚硒酸钠对大鼠晶体上皮细胞αA晶体蛋白基因转录的影响

在体外观察了亚硒酸钠（Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３）作用于大鼠晶体上皮细胞（ＲＬＥｃｅｌｌｓ）而引起其晶体蛋白基因转录的改变,对不同浓度的硒在体外对αＡ晶体蛋白基因转录的影响作了初步的研究。结果发现,随着亚硒酸钠浓度的升高,αＡ基因的转录下降;而当亚硒酸钠浓度升至５×１０（－５）ｍｏ１／Ｌ时,αＡ基因的转录又呈反跳性回升。提示硒在致障过程中对晶体蛋白基因转录的影响作用不可忽视;同时αＡ晶体蛋白在晶体细胞内,至少应答于高浓度的硒,可能作为一种应激蛋白表达。     

TNT体外大鼠白内障模型中的DNA单链断裂及其重接修复的研究

在大鼠晶状体器官培养的条件下,运用单细胞电泳法（ＳＣＧ）,对远在晶状体混浊之前的晶状体上皮细胞进行了有关ＴＮＴ致其ＤＮＡ损伤（ＳＳＢ）与修复的初步观察。提示ＤＮＡ损伤也是体外ＴＮＴ性白内障中的早期变化。     

TNT体外大鼠白内障模型中的DNA单链断裂及其重接修复的研究

在大鼠晶状体器官培养的条件下,运用单细胞电泳法（ＳＣＧ）,对远在晶状体混浊之前的晶状体上皮细胞进行了有关ＴＮＴ致其ＤＮＡ损伤（ＳＳＢ）与修复的初步观察,提示ＤＮＡ损伤也是体外ＴＮＴ性白内障中的早期变化．     

亚硒酸钠对四氯化碳损伤草鱼肝原代细胞与肝组织的保护作用

不同浓度四氯化碳（ＣＣｌ４）对草鱼肝原代细胞的损伤实验中,ＣＣｌ４浓度为１０μｌ／ｍｌ可引起细胞血清中丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）、天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）逸出量与细胞破损率显著增高,培养液中添加亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）０．２μｇ／ｍｌ,则可降低ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ的逸出量,减轻细胞破损程度。Ｎａ２ＳｅＯ３保护实验中,Ｎａ２ＳｅＯ２＋ＣＣｌ４组预先腹腔注射（ｉｐ）０．１ｍｇ／ｋｇ．ｂｗ连续三日,末次ｉｐＣＣｌ４混合液１ｍｌ／ｋｇ．ｂｗ,２４ｈ内肝组织超氧物歧化酶（ＳＯＤ）相对活性比ＣＣｌ４组提高达９１．５％,第七日仍提高达５４．５％,与对照组的水平基本接近;血清中丙氨酸氨基转氨酶（ＡＬＴ）水平逐渐降低。本实验还观察到Ｎａ２ＳｅＯ３可引起肝脂质过氧化物显著降低,肝微粒体蛋白含量与细胞色素Ｐ—４５０活性升高;组织切片观察显示肝组织损伤程度减轻,７２ｈ后细胞核增多。表明Ｎａ２ＳｅＯ３可提高草鱼肝清除自由基能力,增强肝脏解毒功能。     

超氧阴离子对心肌细胞Ca^2＋平衡的影响及硒的保护作用

在超氧阴离子（Ｏ２＾－）作用下,心肌细胞内游离钙深度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）显著升高;心肌细胞膜通透性明显增强;膜脂流动性下降。一定深度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）亚硒酸钠（ＮａＳｅＯ３）可不同程度地拮Ｏ２＾－的影响。前者作用更为显著。这两种硒化合物也能提高谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性。综上所述,硒缺乏,高自由基及心肌细胞Ｃａ＾２＋平衡失调三者之间存在着相关性。在Ｏ２＾－作用下,心肌细胞内     

箬叶多糖及其化学修饰物、亚硒酸钠和GSH对Cu~(2+)诱导的LDL氧化修饰的保护作用

研究了箬叶多糖ＦⅢ－ａ及其化学修饰物、亚硒酸钠和ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白氧化修饰的保护作用．其结果表明箬叶多糖、硫酸酯多糖、硒酸酯多糖可显著抑制脂质过氧化产物（ＴＢＡＲＳ）及荧光物质的生成,彼此之间无明显差异．但对ＶＥ的消耗有着不同的保护作用,其顺序是ＦⅢ－ａ＞Ｓ－ＦⅢ－ａ＞Ｓｅ－ＦⅢ－ａ,并且具有明显的量效关系．硒或ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的ＬＤＬ氧化修饰无明显的抑制,但联合使用在０．１２５ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ及１２．５μｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．０２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ的浓度下能强烈地抑制ＴＢＡＲＳ的生成,甚至比正常的ＬＤＬ还要低．但是对ＶＥ的消耗只有较弱的保护作用,硒酸酯多糖与此相似．Ｎａ２ＳｅＯ３在０．１２５ｍｍｏｌ／Ｌ时可以明显抑制荧光物质的生成．     

超氧阴离子对心肌细胞Ca~（2＋）平衡的影响及硒的保护作用

在超氧阴离子（Ｏ~－_２）作用下,心肌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ~（２＋）］_ｉ）显著升高;心肌细胞膜通透性明显增强;膜脂流动性下降。一定浓度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）或亚硒酸钠（Ｎａ_２ＳｅＯ_３）可不同程度地拮抗Ｏ~－_２的影响。前者作用更为显著。这两种硒化合物也能提高谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性。综上所述,硒缺乏,高自由基及心肌细胞Ｃａ~（２＋）平衡失调三者之间存在着相关性。在Ｏ~－_２作用下,心肌细胞内Ｃａ~（２＋）平衡失调比膜通透性的改变更为敏感。     

羟自由基对心肌线粒体膜的影响及硒的效应

由Ｈ２Ｏ２和ＦｅＳＯ４体系产生的羟自由基（ＯＨ·）作用于大鼠心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在观测时间内,其脂类自由基与自旋捕捉剂形成的自旋加合物的电子自旋共振（ＥＳＲ）信号强度随着孵育时间的延长而加强。一定浓度的硒代蛋氨酸（Ｓｅ—Ｍｅｔ）或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显清除ＯＨ·并抑制脂类自由基的产生。在ＯＨ·的影响下,荧光探针ＤＰＨ在心肌线体膜脂中的荧光寿命和膜脂流动性的测试结果发生了明显变化。与此同时,心肌线粒体膜的能量转换过程（氧化磷酸化效率和呼吸控制率）也发生了显著的改变。１．０μｍｏｌ／Ｌ的Ｓｅ—Ｍｅｔ或２．３μｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗ＯＨ·的上述影响。前者的作用更为显著。     

铜锌超氧物歧化酶对几种羟自由基产生系统的影响

应用脱氧核糖降解法研究了ＣｕＺｎ－ＳＯＤ对几种·ＯＨ产生系统的作用机理．结果证明：ＳＯＤ对Ｆｅ（３＋）·Ｏ·Ｈ２Ｏ２系统中·ＯＨ的产生有明显的抑制作用,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它的抑制作用不大;在Ｆｅ（２＋）·Ｈ２Ｏ２和ＣＵ（２＋）·Ｈ２Ｏ２系统中,ＳＯＤ、失活ＳＯＤ和ＢＡＳ均能抑制·ＯＨ的产生;在Ｆｅ（２＋）·Ｏ系统中,ＳＯＤ对·ＯＨ产生作用不大,而失活ＳＯＤ或ＢＳＡ对它有明显的抑制作用．由此推测ＳＯＤ对·ＯＨ形成可能有三方面的影响：１．对Ｏ的清除作用,阻断Ｈａｂｅｒ－Ｗｅｉｓｓ反应;２．对金属离子的络合作用,降低·ＯＨ的产额;３．促进Ｈ２Ｏ２的积累,加快Ｆｅｎｔｏｎ反应．     

NNK诱发BEP2D细胞产生活性氧及其对DNA的损伤

通过测定细胞内和细胞上清中活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ,ＲＯＳ）水平,以及ＤＮＡ 加合物——８－羟基脱氧鸟嘌呤核苷（８－ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅ,ＯＨ８ｄＧ）含量,对烟草特异亚硝胺类化合物４－甲基亚硝胺－１（３－吡啶基）－１－丁酮（４－（ｍ ｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍ ｉｎｏ）－１－（３－ｐｙｒｉｄｙｌ）－１－ｂｕｔａｎｏｎｅ,ＮＮＫ）诱发人乳头状病毒永生化的人支气管上皮细胞（ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍ ａｖｉｒｕｓ－ｉｍ ｍ ｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｈｕｍ ａｎｂｒｏｎｃｈｉａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ,ＢＥＰ２Ｄ）产生的ＲＯＳ及其对ＤＮＡ 的氧化损伤进行研究,并观察纳米硒的保护作用．结果表明,ＢＥＰ２Ｄ 细胞经不同浓度的ＮＮＫ 作用后,细胞内和细胞上清中ＲＯＳ以及ＯＨ８ｄＧ含量均显著增加,并有较好的剂量效应关系．１ μｍ ｏｌ·Ｌ－ １纳米硒（ｎａｎｏｓｅｌｅｎｕｉｍ ,ＮＳ）能明显抑制ＮＮＫ 诱发ＢＥＰ２Ｄ细胞产生的ＲＯＳ及ＯＨ８ｄＧ 水平．揭示ＮＮＫ 能造成细胞的氧化损伤,而ＮＳ对ＮＮＫ 所致细胞的氧化损伤有保护作用．     

酒色着色菌内膜系统光依赖性同化亚硒酸钠为硒半胱氨酸的研究

分离的酒色着色菌（Ｃｈｒｏｍａｔｉｕｍｖｉｎｏｓｕｍ）内膜系统在光照和Ｏ乙酰丝氨酸（ＯＡＳ）存在的条件下,能以３５９纳摩尔／毫克细菌叶绿素·小时（ｎｍｏｌ·ｍｇＢｃｈｌ－１·ｈ－１）的速度催化ＳｅＯ２－３合成硒半胱氨酸。用超声波处理的内膜系统,催化速度仅为处理前的１１％,加入谷胱甘肽（ＧＳＨ）和还原型辅型Ⅱ（ＮＡＤＰＨ）后,其速度增加至处理前的８８３％,该反应对光具有依赖性,进一步实验表明,纯化的谷胱甘肽还原酶,在有半胱氨合酶、ＯＡＳ和ＮＡＤＰＨ共存时,能催化ＳｅＯ２－３转化为硒半胱氨酸,表明ＳｅＯ２－３在内膜系统中能被光偶联的谷胱甘肽还原酶还原为Ｓｅ２－,然后经半胱氨酸合酶的催化作用转化为硒半胱氨酸     

D—半乳糖对神经元和成纤维细胞拟老化作用的实验研究

实验用体内、外相结合的方法,观察了Ｄ－半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｅ,Ｄ－ｇａｌ．）对细胞的促老化作用。结果表明,Ｄ－ｇａｌ使培养大鼠胎脑神经元出现生长发育缓慢、突起脱落、死亡率增高等退行性变;大鼠肺成纤维细胞的体外分裂代数减少;人胎儿肺二倍体成纤维细胞（ＨＢＳ）分裂周期中Ｇ２－Ｍ期细胞减少、Ｇ－Ｇ１期细胞增加、ＤＮＡ含量下降,细胞增殖速度减慢;大鼠胎脑神经细胞和ＨＢＳ中ＳＯＤ含量降低,丙二醛（ＭＤＡ）水平升高,这些结果与次黄瞟呤（ＨＰＸ）－黄瞟呤氧化酶（ＸＯＤ）系统产生的超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）作用一致。提示,Ｄ－ｇａｌ抑制细胞生长发育和分裂繁殖,加速细胞老化,其机理可能与Ｏ－２·等活性氧（ＲＯＳ）过荷引起的脂质过氧化有关。     

.OH在博莱霉素A5介导的DNA断链反应中的作用

利用ＥＳＲ技术研究了博莱霉素Ａ５（ＢＬＭＡ５）、Ｆｅ＾２＋,Ｏ２体系中．ＯＨ的产生。并用ＴＢＡ反应检测了该系对ＤＮＡ的断链作用。以Ｆｅ＾３＋,Ｃｕ＾＋或Ｃｕ＾２＋替换Ｆｅ＾２＋,则体系中无．ＯＨ产生,同时也失去对ＤＮＡ的断链作用;一定浓匠．ＯＨ清除剂可完全清除．ＯＨ,地对ＤＮＡ断链影响甚微;还原剂可淬灭体系中的．ＯＨ,却能促进ＤＮＡ的断链反应;ＳＯＤ可清除体系中的．ＯＨ,失活的ＳＯＤ夫此功能,但两     

Na_2SO_3对不同状态CF_1－ATPase活力的促进作用

Ｎａ２ＳＯ３对ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用与酶所处状态有关。ＣＦ０降低ＣＦ１对Ｎａ２ＳＯ３的亲和力和Ｎａ２ＳＯ３促进的最大反应速率。在Ｎａ２ＳＯ３作用下,膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的活化能高于游离的。膜上和游离ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ的γ亚基上二硫键的还原可以提高Ｎａ２ＳＯ３对酶活力的促进作用。Ｎａ２ＳＯ３对甲醇活化的ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力的促进作用只有在甲醇活化的亚适浓度下才能充分表现出来。Ｎａ２ＳＯ３对Ｍｇ２＋抑制的解除作用因ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ处于不同活化状态而不同。     

Na_2SO_3和NaHCO_3对叶绿体CF_1－ATPase活力作用的机制

Ｎａ２ＳＯ３对热－ＤＴＴ活化的游离ＣＦ１及类囊体膜上ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ活力均有显著的促进作用,ＮａＨＣＯ３亦有明显的促进作用。Ｎａ２ＳＯ３和ＮａＨＣＯ３的促进作用与它们解除Ｍｇ２＋的抑制作用有关。从ＮａＨＣＯ３和Ｎａ２ＳＯ３及它们与Ｍｇ２＋之间的竞争性关系,表明三者是结合在酶的同一部位上。Ｎａ２ＳＯ３可明显降低热－ＤＴＴ活化的游禹ＣＦ１－ＡＴＰａｓｅ催化反应的活化能,这可能与促进产物ＡＤＰ的释放有关。     

硒拮抗超氧阴离子导致的心肌线粒体膜损伤

由黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子作用于心肌线粒体后,其膜脂双层内产生了脂类自由基。在一定时间内,脂类自由基与自旋捕捉剂形成的加合物的ＥＳＲ信号强度随着孵育时间的增加而加强。１．０μｍｏｌ／Ｌ硒代蛋氨酸（Ｓｅ－Ｍｅｔ）或２．３μｍｏｌ／ＬｍＮａ２ＳｅＯ３可显著清除并抑制脂类自由基的产生。在的影响下,荧光探针ＤＰＨ在膜脂双层中的荧光寿合和膜脂流动性发生了明显改变。一定浓度的Ｓｅ－Ｍｅｔ或Ｎａ２ＳｅＯ３可明显拮抗的上述影响,前者的作用更为显著。     

刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中作用的探讨

目的探讨大鼠实验性肝癌发病中刺五加对肌体免疫功能和抗氧化酶活性的影响。方法４６只ＳＤ雄性大鼠被随机分成对照组（喂普通饲料）、３－甲基４－双甲氨基偶氮苯（３－Ｍｅ－ＤＡＢ）组（喂含０．０６％３Ｍｅ－ＤＡＢ饲料 １０周）和刺五加组（饲喂同 ３－Ｍｅ－ＤＡＢ外、另加入刺五加 ４．５ｇ／ｋｇ饲料,用常规方法检测全血谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量,用微量化学发光造检测吞噬细胞活性（ＰＭＮ－ＣＬ）。结果１．ＰＭＮ－ＣＬ检测峰值、积分值和吞噬细胞指数,３－ＭｅＤＡＢ组较正常组和刺五加组均有显著升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）２．全血ＧＳＨ－ＰＸ活性、ＳＯＤ活性,刺五加组较３－ＭｅＤＡＢ组均有显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＡ含量刺五加组和３－ＭｅＤＡＢ组均较正常组升高（均Ｐ＜０．０５）。结论刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中有提高抗氧化酶活性和对抗致癌剂引起的机体中性粒细胞吞噬功能代偿性增高的作用。