非同位素反向Northern筛选法

此文介绍了一种非同位素简单快速的反向Northern筛选方法。采用非同位素法标记探针,操作简便,不涉及污染环境。在杂交过程中采用三次校正,结果可靠,重复性好。该方法能有效地,高通量地验证差异表达基因。     

一种快速mRNA差异显示技术及用于分离辐射诱导转录子

介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速ｍＲＮＡ差异显示技术．其特点是不用同位素标记,操作简便,在普通琼脂糖凝胶电泳中就能分辨差异显示的ｃＤＮＡ带,便于ＤＮＡ回收和进一步重组克隆．用此方法成功地分离到电离辐射诱导转录子．     

一种简便实用的限制性核酸内切酶定量测活方法

对限制性核酸内切酶进行酶学研究,无论在理论上或应用上都有着重要的意义。准确而简便的定量测活方法,是进行酶学研究的前提之一。目前这类酶的定量测活,多采用同位素标记法或微光密度扫描法,但前者受到标记底物来源、同位素半衰期和比强度的影响;后者需要昂贵的仪器,故它们的使用范围受到一定     

原子时钟——漫谈碳~(14)方法在测定年代上的应用

自然界中,有着无穷无尽的奥秘,等待人们去发现和探索。你相信吗——凡有生命的物体,在它死亡几万年内,由于本身含有一种带β射线粒子,它按照自己的规律不断地蜕变着,它的蜕变速度不受压力、温度和地壳变动的影响。这种β放射线用精密仪器探测时,能相应地发出“哒哒”的响声,     

血管活性肠多肽结合核苷酸性质的研究

采用光亲和技术检测了血管活性肠多肽(VIP)与核苷酸之间的相互作用,发现VIP可以特异性结合同位素标记的GTP,还发现未标记的GTP以及其它三磷酸核苷抑制这种结合,这意味着VIP与上述三磷酸核苷之间的结合是一种典型的可逆性的结合反应.发现低浓度的GDP,GMP不但不抑制VIP与同位素标记GTP的结合反应,反而增强这种结合.联系到其它研究者关于GTP影响VIP与其受体结合反应的结果,可认为VIP能可逆性地连接一种三磷酸核苷,这种连接受反应系统中不同核苷酸比例影响,通过这种连接来调节VIP与其受体之间的反应.     

新的酵母细胞自动计数仪

BioScience Technology 05／2005（增刊）10页报道：美国新不伦瑞克科学公司最近推出了一种可以在30秒内自动计数酵母细胞的新的仪器,从而结束了手工计数酵母细胞的历史。与原先可以自动计数哺乳动物细胞的核计数仪相似,这种新的可用于计数酵母细胞的YC-100型核计数仪,包含荧光显微镜、CCD照相机和整合影像分析软件,可快速而准确地对酵母细胞进行计数。它可以根据DNA在数秒钟内进行细胞计数,     

一种简便实用的限制性核酸内切酶定量测活方法

对限制性核酸内切酶进行酶学研究,无论 在理论上或应用上都有着重要的意义。准确而 简便的定量测活方法,是进行酶学研究的前提 之一。目前这类酶的定量侧活,多采用同位素 标记法或微光密度扫描法。一”,但前者受到标记 底物来源、同位素半衰期和比强度的影响;后者 需要昂贵的仪器,故它们的使用范围受到一定限制。下面介绍我们建立的一个简便实用的方 法,即对酶切凉脂糖凝胶电泳拍照记录,其负片置测微光度计上进行测定,以此来对酶活力进 行定量。     

核酸分子的化学发光标记和化学发光检测

非同位素标记是核酸分子杂交和检测的关键技术,在已知的各种非同位素标记检测方法中,化学发光标记和检测以其灵敏度高,安全无害和操作简便等优点,愈来愈受到重视,本对核酸分子的化学发光标记和核酸杂交分子的化学发光检测作一简要介绍。     

标记基因探针的快速简易制备

在基因探针制备过程中,常通过琼脂糖电泳分离目的DNA片段和载体,然后采用电洗脱、冻融等方法回收并纯化目的片段,再作同位素或非同位素标记。为减轻非特异性本底,往往还需要分离出标记探针,以去除游离标记物,整个过程比较繁琐费时。我们在工作中尝试了一种简便的方法,将探针的制备、回收、纯化     

尼龙膜cDNA阵列的图像处理和表达量化

高密度的cDNA阵列是大规模基因组织表达谱研究的重要技术。目标细胞的cDNA样品用同位素标记时,尼龙膜cDNA阵列对杂交信号探测的灵敏度高、线性范围大,对低表达量的cDNA也能进行有效分析。但是同位素标记的杂交样点也存在易污染、易扩散和表达量取值误差大等问题。为此,首先按同位素辐射感光原理建立严格的样点理论模型,然后对样点进行精确定位、饱和补偿、干扰校正处理,实现了样点表达量的精确提取,显著提高了量化结果的重复性。     

同位素标记相对和绝对定量蛋白组技术研究进展

近年来定量蛋白组学技术迅速发展,目前常用的有双向荧光差异凝胶电泳、同位素亲和标记、15N同位素标记、同位素标记相对和绝对定量和细胞培养条件下稳定同位素标记技术等。同位素标记相对和绝对定量技术以其高通量、高灵敏度、高重复性、高动态检测限和能对各种复杂样品进行相对和绝对定量研究等优势而备受研究者青睐,目前已发展到在同一实验中分析8组样品,增加了实验设计的灵活性。我们就同位素标记相对和绝对定量技术在定量蛋白组史中的地位作用、研究策略,以及在病毒致病机制研究和医药临床相关问题中的应用做简要综述。     

谈谈放射遗传学

什么是放射遗传学从实验得知,辐射特别是电离辐射对于生物体的生长和发育有很大的影响。什么是电离辐射?电离辐射一般是穿透性很强、能够引起被穿过物质离子化的射线。这包括宇宙线、x射线、γ射线、α射线、β射线、中子等等。这些射线有的是波长很短的电磁波,例如x射线和γ射线等;有的是物质小颗粒,例如β射线、中子等。放射性同位素     

DAS—1型数字式电安全测定仪的研制

医用电气设备的安全检测是十分重要的。仪器漏电流大于100微安,如直接通过人的心脏,就有室颤的危险。国家标准GB9706对医用电气设备的电安全指标有明确的规定。但是要在医疗仪器的使用现场按标准规定的线路和方法测试电安全性能十分困难。因此设计一种能适应现场简便测试的仪器是十分迫切的要求。 DAS—1电安全仪能快速简便的实现标准规定的     

放射自显影技术(Autoradiography)在昆虫学中的应用

一、基本原理 利用放射性物质放射出来的粒子,打到照象底片或带有乳胶层的玻璃底板上,使乳胶中银盐还原而出现黑点。放射性强的银盐还原多,故洗出象片黑点密集,放射性弱的则黑点少而稀。首次用生物材料作放射自显影是远在1895年法国物理学家H.Bee-querel观察到铀矿石能使照相底片感光后,就有人在蛙皮上涂以镭的化合物,然后放在照象底片上,洗出后就明显地看到蛙体上镭涂过的部位。放射性同位素放出的粒子为α-、β-粒子(或软β-和硬β-粒子),放射出的射线为γ-射线。α-粒子是电离很密的粒子,能量大、射程很短,可以得到很明显的影象,在组织化学上应用较多的为放射β-粒子及γ-射线的元素。β-粒子小、轻、射程大,能量高,但造成影象的清晰度则随能量加大和射程增远而降低,如P~(32)放射的β-粒子要比S~(35)的高16倍以上,放射的能量愈大,射程愈远,β-粒子     

气液催化交换法制备氚标记脱氧腺嘌呤核苷三磷酸

近年来应用气液催化交换法制备氚标记化合物越来越广泛。这一方法是在催化剂的存在下,将氚气和溶液中的有机分子接触,引起氚-氕同位素交换,经分离纯化制得所需的标记化合物。与其它氚标记制备方法相比较,有操作简便、催化交换效率高的优点,而且不受前体来源困难的限制。用这种方法制得的~3H-dATP,其比度和放化纯度都可以满足开展分子生物学和遗传工程学科研工作的需要。     

临床生化标记免疫分析技术的一些新进展

二十多年来,临床生物化学在诊断应用和化学病理学的研究方面有了显著进展,其中起重要促进作用的是同位素、非同位素标记免疫分析技术的推广和应用。有人认为,标记免疫分析技术的建立和应用是生化分析的一次革命。看来这种说法似乎并不过份。本文拟就临床生化工作者所重视的放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析和化学发光免疫分析等标记免疫分析技术有关方法学方面的新进展做一扼要介绍。     

反符合屏蔽低本底NaI(Tl)γ谱仪

本文报告了一台全NaI(T1)晶体的反符合屏蔽低本底γ谱仪。采用交替物质屏蔽,选用含放射性杂质少的结构、屏蔽材料,采用反符合、符合技术等措施降低谱仪的本底。主探测器在井形探测器反符合屏蔽条件下,在0.05—2.0兆电子伏能量范围内,谱仪的积分本底为35计数/分。对~(137)Csγ射线的康普顿减少因子为3.5。当样品和本底测量时间分别为1,000分钟,置信水平为95％时,对单一的~(137)Cs点源的探测灵敏度为7×10~(-13)居里。本谱仪较大地提高了低水平γ放射性测量工作的质量;可用于外环境生物样品和人体尿、粪、血液样品的分析,亦可用于其它弱γ放射性样品的测量。     

一种用于心肌梗塞预后的单克隆抗体

据Centocor公司(美国的一家生物技术公司)报道,该公司研究出一种在心肌梗塞形成后能快速鉴别心坏死和局部缺血的放射性标记的单克隆抗体,这可以改善心脏病患者的预后。该抗体叫作Myoscint,它选择了细胞内心肌成分肌浆球蛋白的重链,该肌浆球蛋白是在心脏病发怍后胞膜破裂时暴露出来的。因此,铟-Ⅲ标记的Myoscint可排它性地凝结在心坏死细胞上,用一种普通γ-射线照相机即可获得这些影像。在心肌梗塞形成初起注射该抗体后     

辣根过氧化物酶标记DNA探针及光增强检测DNA指纹图在法医应用的研究

本文介绍了用辣根过氧化物酶直接标记DNA探针,光增强检测DNA指纹图的技术,所得图谱清晰易读,分辨率高,灵敏度为0.8μg,接近~(32)P同位素标记的水平。就150名无关个体的DNA指纹图分析表明两个个体图谱完全相同的机率是3.7×10~(-14);方法稳定性测定表明,足以取代同位素标记,用作准确的个人识别和亲子鉴定,为侦破强奸、凶杀等案件提供重要科学依据,该法简便,快速,适用于各实验室,易于推广应用。     

一种微生物生长动态的研究仪器Biotran Ⅲ的用法

微生物生长动态的重要参数是细胞群体中细胞数目、形态和大小的变化。这些参数的测量虽很重要,但由于实验费时、费力,且有操作人员主观上的误差,从而影响了我国这方面研究工作的开展。最近由美国引入一批自动计数及求积的仪器——Biotran Ⅲ,是New Brunswich Scientific Co.Ine.生产的,该仪器能自动计数菌落,而且在与显微镜或其它图象放大仪联用时,