不同系统聚类算法对昆虫包涵体病毒模式的识别

随着分析微生物学技术的不断发展,毛细管裂解色谱法（PyrolysisGaschromatography,简称pyGC）业已用干鉴定微生物［‘－‘1和分析鉴别化学成分、结构极为复杂的生物大分子［’］,并证明了利用nyoc分析鉴定昆虫包涵体病毒的可行性K］。系统聚类分析是统计模式识别的重要方法之一,已广泛应用于化学模式的识别。我们使用欧氏距离系数的8种常规系统聚类算法,对48株典型昆虫包涵体病毒株,即26株核型多角体病毒（NPV）、13株颗粒体病毒（GV）和9株质型多角体病毒（CPV）,用PyGC制备的气象色谱（GC）图进行聚类分析,并对不同聚类算…     

裂解气相色谱法和聚类分析在病毒识别中的应用研究

应用裂解气相色谱法和系统聚类分析对56株不同地方分离株昆虫病毒（其中NPV29株,CPV11株,GV16株）进行了识别分析．利用欧氏距离系数的8种系统聚类算法所得聚类树状图谱,结果表明,通过裂解指纹图特征峰的分析,可明显地区分NPV、CPV、GV彼此间的差异和相同亚群的不同分离株间的异同．用聚类分析进一步证明裂解气相色谱法对昆虫病毒识别的可行性,从而为病毒的分类鉴定提供了准确、快速、重复性好的一种现代分析方法。     

11株核型多角体病毒的裂解气相色谱分析

本文介绍了茶毛虫、蓖麻蚕,棉铃虫、斜纹夜蛾、黑点银纹夜蛾以及美国白蛾等6种昆虫的11株核型多角体病毒裂解色谱图的绘制方法。通过指纹图的分析,可明显地鉴别(区分)相同亚群的不同毒株。11株核型多角体病毒既有峰群的特异性,亦有峰高比值的特异性。指纹图分析结果表明,它们是各不相同的毒株,证明了裂解气相色谱法分析鉴定核型多角体病毒的可行性。     

鸟类传播昆虫病毒的观察

在三年时间内,在2个自然保护区和一个集体林场里,敢了鸟类在自然情况下有否携带昆虫病毒包涵体的调查,共436份标本,109种鸟类分属于31科。发现在自然情况下,带昆虫病毒包涵体的鸟类数量不多,占调查总数的1％,含有病毒包涵体的鸟粪可以使昆虫致病,包涵体在鸟粪中6小时后很少发现其存在。     

中国棉铃虫核多角体病毒VHA273毒株多角体蛋白的纯化及某些理化性质的测定

中国棉铃虫核多角体病毒(Heliothis armigera NPV,HaNPV)VHA273毒株,属杆状病毒科杆状病毒属A亚组。1981年通过省级鉴定,该毒株可望发展成商品杀虫剂。本文首次报道VHA273株多角体蛋白的纯化方法及某些理化性质的测定结果,这对该昆虫杆状病毒的分类鉴定及病毒制剂的标准化工作具有实用意义。     

意大利蝗痘病毒一些特性研究

电镜观察意大利蝗痘病毒的包涵体大多数为椭圆形,少数为近圆形,大小相差极为悬殊。病毒粒子呈卵圆形,表面桑椹状。病毒粒子髓核呈圆筒状,其纵切面内绳索结构折叠2—3次,横切面可以看到2—3个圆点,侧体也圆筒状,均匀包围在核衣壳外面。DNA经限制性内切酶LoR I酶切产生16个DNA片段,据此求得DNA分子量为135.7×106D。 意大利蝗痘病毒包涵体的裂解释放病毒速度快,在相同条件下比亚洲小车蝗痘病毒包涵体裂解释放病毒粒子快。当温度恒定(37℃),在一定的pH值内(pH 9.0—11.5),随pH值的升高包涵体裂解释放病毒粒子速度加快。当pH值恒定(11.2),在一定的温度范围内(25～40℃),随温度的升高包涵体的裂解释放病毒粒子速度加快。     

几株杆状病毒包涵体蛋白双向高压电泳指纹图谱比较

用蔗糖密度梯度离心提纯的6种昆虫病毒包涵体(BsNPV1,BsNPV2,BtNPV,EpNPV,PrGV,PxGV)经DAS碱解,粗提纯的包涵体蛋白经Sepharose-6B柱层析和Caaalco-prep-disc法进一步纯化后,在SDS-PAGE中显示为一条分子量约28,000d的带。用常规双向免疫扩散法检查各种包涵体蛋白之间的差异,结果表明血清学BsNPV与BtNPV,PrGV与PxGV之间都是不可分辩的。6种包涵体蛋白的双向高压指纹图谱表明,它们的指纹图谱都不同程度地存在着一些相同或十分相似的肽点。就每种病毒的指纹图谱又都是独特的,NPV间相似性低于GV间相似性。我们认为NPV和GV的包涵体蛋白在结构上存在着一些相同的或相似的保守区域,但不同种之间在整个一级结构上是有差异的。利用包涵体蛋白的指纹图谱鉴定杆状病毒是个灵敏可行的方法。     

宽边小黄粉蝶颗粒体病毒的研究初报

宽边小黄粉蝶(Eurema heeobe L.)颗粒体病毒的包涵体平面图象多呈椭圆形,大小约300-500×150-300μm.病毒粒子杆状,两端圆滑,微弯,大小约200-250×50-60am,属杆状病毒属(Baculovirus)B亚组。此株病毒对经济昆虫家蚕、柞蚕和昆虫天敌七星瓢虫无致病性。     

显示SARS病毒包涵体的技术探讨

SARS病毒包涵体是一种非常微小的微生物 ,在一般的情况下用光学显微镜是不易被发现的 ,但当它侵及细胞并形成小体时 ,则可用光学显微镜来检测 ,但较难寻找。为了寻找较有效的病毒包涵体染色方法来显示SARS病毒包涵体 ,我们对现有的病毒染色法如Macchiavello氏法的改良法、Mann氏法、Lendram氏法进行对照应用 ,经实验认为 ,Macchiavello氏的改良法效果最好 ,该法应用省时、易操作 ,可将病毒包涵体显示为鲜红色。至今为止 ,认为引起SARS的病毒是变性的冠状病毒 ,但由于该病毒非常微小 ,必须依靠电镜才能对其进行鉴定和鉴别。由于进入细…     

昆虫病毒gp37/fusolin基因研究进展

昆虫病毒gp37fusolin基因属病毒复制非必需基因,其编码的蛋白能形成一种纺锤形包涵体(spindlebodies,SBs),该包涵体内不含有病毒粒子。Fusolin蛋白形成的SBs与纯化的Fusolin蛋白均能提高靶昆虫对杆状病毒的敏感性,推测GP37蛋白也具有类似的功能。对gp37fusolin基因的深入研究,有可能开发出新型病毒增效剂 。     

毛细管气相色谱分析昆虫病毒包涵体中的脂肪酸

病毒脂肪酸的定性和定量,可作为病毒分类鉴定的辅助证据。有关细胞脂肪酸的研究已有报道［１～２］,但对病毒多角体（ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｎｓ）和颗粒体（ｇｒａｎｕｌｅｓ）中脂肪酸成份的研究尚未见报道。本研究在病毒单糖分析的基础上［３］,用毛细管气相色谱法,对...     

Pathology and Development of the Grasshopper Inclusion Body Virus in Melanoplus sanguinipes

Grasshoppers, Melanoplus sanguinipes (F.), infected with the grasshopper inclusion body virus (GIBV) showed a general torpor, took longer to develop, and had abnormally high rates of mortality. Infection was found only in the fat body, and developing viruses and inclusion bodies were observed in the nuclei and cytoplasm of infected cells. Although the size of the inclusion bodies in cells varied at different stages of infection, the inclusion bodies appeared to grow during the infection. Electron microscopic investigations of viral replication showed that at about 8 days after inoculation presumptive viral particles had developed as buds or protrusions from precursor granular masses; thereafter, these particles underwent internal differentiation and were incorporated into developing inclusion bodies. The GIBV was similar to insect viruses in the genus Vagoiavirus Weiser and to pox viruses, particularly vaccinia.     

Recent advances in biological control of pest insects by using viruses in China

Insect viruses are attractive as biological control agents and could be a feasible alternative to chemical insecticides in the management of insect infestations. This review describes recent advances in the development of wild-type and genetically modified viruses as insecticides. A new strategy of application of insect viruses in China is reviewed. Also, the assessment of biosafety of genetically modified Helicoverpa armigera Nucleopolyhedovirus (HearNPV) is emphasized as a case-study. Foundation itims: The 863 projects (2006AA10A210) from MOST.     

Recent Advances in Biological Control of Pest Insects by Using Viruses in China

Insect viruses are attractive as biological control agents and could be a feasible alternative to chemical insecticides in the management of insect infestations. This review describes recent advances in the development of wild-type and genetically modified viruses as insecticides. A new strategy of application of insect viruses in China is reviewed. Also, the assessment of biosafety of genetically modified Helicoverpa armigera Nucleopolyhedovirus (HearNPV) is emphasized as a case-study.     

Serological relationship of nuclear polyhedrosis viruses: I. Hemagglutination by polyhedral inclusion body protein from the nuclear polyhedrosis virus of Porthetria (= Lymantria) dispar

Polyhedral inclusion body protein (PIBP), harvested from the nuclear polyhedrosis virus (NPV) infecting the gypsy moth, Porthetria dispar, illicits the hemagglutination of chicken erythrocytes. Antisera to PIBP, polyhedral inclusion bodies (PIB), and virions (RODS) from the NPV's infecting P. dispar and the European Pine Sawfly, Neodiprion sertifer, inhibits hemagglutination when utilized to neutralize the PIBP from P. dispar. The crossreactivity of antisera to viral components from N. sertifer, a hymenopteran insect, with viral antigens from P. dispar, a lepidopteran insect, demonstrates a serological relationship exists between two viruses which have widely separated host ranges.     

委内瑞拉马脑炎病毒重组抗原的制备纯化及其胶体金免疫层析检测方法的建立

目的:表达委内瑞拉马脑炎病毒E2重组蛋白,并结合胶体金免疫层析技术建立一种简便检测委内瑞拉马脑炎病毒特异性抗体的方法。方法:利用已经构建的表达E2抗原的工程菌, 用IPTG诱导, 表达蛋白主要以包涵体的形式存在。通过一系列条件的变性、复性、透析,所制抗原用以包被硝酸纤维素膜,利用胶体金标记和免疫层析技术,建立委内瑞拉马脑炎病毒快速检测方法。对该方法的敏感性、特异性和稳定性作出评价。结果:重组工程菌可表达分子质量为 40 kDa的目的蛋白, 纯化后的蛋白质经SDS-PAGE显示纯度达95%以上。建立的检测方法可在20 min内完成检测。对症状相似及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存2周,检测结果不变。该方法与R&;D公司商品化的ELISA试剂盒灵敏度检测无明显差异;对92份阴性血清进行检测,两种检测方法的符合率为96.7%。结论:重组委内瑞拉马脑炎病毒蛋白产生的包涵体变性复性后生具有良好的重复性和稳定性, 可作为委内瑞拉马脑炎病毒多种检测方法的抗原原料。胶体金免疫层析法具有快速、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。     

Passage des corps d'inclusion de virus d'une polyédrie nucléaire dans le tube digestif d'un orthoptère détritivore,Acheta domesticus L.

Summary Passage of nuclear polyhedral virus inclusion bodies in the gut of the detritiphagous OrthopteronA. domesticus is described. Histological studies permitted following the rate of passage and the elimination time of the inclusion bodies. Tests of virulency, carried out on newly hatched larvae ofB. mori, showed that inclusion bodies remained virulent and apparently unaffected by the digestive activities to which they had been exposed. These results suggest thatGryllus species can act as disseminators of insect viruses under field conditions.      

利用小RNA深度测序技术检测灰飞虱病毒种类

灰飞虱是一种重要农业害虫,作为病毒介体,可以传播多种植物病毒引起水稻、小麦和玉米等粮食作物病毒病害.目前对于灰飞虱体内昆虫病毒种类尚缺乏系统认识,难以开展利用昆虫病毒防治灰飞虱相关研究工作.为挖掘灰飞虱体内昆虫病毒资源,本文通过小RNA深度测序技术对灰飞虱所携带的病毒种类进行分析鉴定.结果显示,测序数据比对得到13种病...