显示SARS病毒包涵体的技术探讨

SARS病毒包涵体是一种非常微小的微生物 ,在一般的情况下用光学显微镜是不易被发现的 ,但当它侵及细胞并形成小体时 ,则可用光学显微镜来检测 ,但较难寻找。为了寻找较有效的病毒包涵体染色方法来显示SARS病毒包涵体 ,我们对现有的病毒染色法如Macchiavello氏法的改良法、Mann氏法、Lendram氏法进行对照应用 ,经实验认为 ,Macchiavello氏的改良法效果最好 ,该法应用省时、易操作 ,可将病毒包涵体显示为鲜红色。至今为止 ,认为引起SARS的病毒是变性的冠状病毒 ,但由于该病毒非常微小 ,必须依靠电镜才能对其进行鉴定和鉴别。由于进入细…     

应用超声波技术显示组织中粘多糖的研究

应用超声波技术来显示组织所含的粘多糖,经反复实验证明,它比传统应用的方法效果好,颜色鲜艳,定位准确,还可节省４～６倍的时间。奥申兰（Ａｌｃｉａｎｂｌｕｅ）原法染色需１ｈ,ＰＡＳ需２０ｍｉｎ左右,用超声波技术前者仅需１０ｍｉｎ,后者只需５ｍｉｎ左右。奥申兰是一类铜欧花青染料,含有带正电荷的盐键,它可与组织中含有的阴离子基因如合羧基和硫酸根的酸性粘液物的反应,生成不溶性复合物,ＰＡＳ是靠过碘酸氧化组织中粘多糖的乙二醇基和氨羟基,致使其产生暴露出游离醛,与Ｓｃｈｉｆｆ氏试剂起反应,产生新的复合物,这两类染色法,都能在超声彼技术的作用下来加速染色过程。超声波的主要工作原理是：利用仪器上所发出的超声波,以每秒钟８０万次的高频振谐下作缩张运动。由此而带动了染色液中正负电荷,游离醛基等物质的缩张运动,从而加速了它们的结合,加速了染色的完成。     

应用真空负压LSAB法快速显示各种组织相关抗原的研究

应用真空负压ＬＳＡＢ法快速显示各种组织中的相关抗原,无论从时间上,还是从二抗三抗的稀释度,阳性物的显示强度和效果等,都比免疫组化中的其它方法好。冰冻切片和培养细胞片,整个过程需时５０ｍｉｎ左右,石蜡切片全过程需时６０ｍｉｎ左右,如果从抗体的孵育时间讲,则孵育时间仅为产品说明书注明的时间的１／５。稀释度产品说明书注明二抗三抗为１：４００,该法二抗三抗的稀释度为１：８００,如此可增加标记切片的张数,降低成本。根据实验对比,在组织切片含有大量的抗原或抗体时,它与真空负压ＡＢＣ法没有明显差别,在抗原抗体含量少的情况下,真空负压ＬＳＡＢ法就显示出优势,阳性反应物明显比其它方法都强。真空负压ＬＳＡＢ法之所以具有上述的优点,这主要是它不需要提前形成复合物,因此,它的分子量小行动敏捷灵活,对组织的渗透性强。它与生物素的结合点多,加上真空负压的特殊条件,这就使真空负压ＬＳＡＢ法成为需时少,效果好,敏感性高的一种新方法。     

有关免疫组织化学技术方法若干问题的探讨

免疫组织化学技术操作过程中经常可碰到的问题有：切片由于各种原因所引起的松动卷起甚至掉片,造成操作的失败;最后的结果背景较深,难与阳性物进行鉴别和判断;如何判断每一批免疫组织化学最后的反应结果的准确性和可靠性等等。本文根据上述问题,深入地探讨了其发生的原因以及提出了如何处理的方法,尤其是对如何判断免疫组织化学显色结果,并详细地介绍了各种方法     

如何制作好临床快速冰冻切片问题的探讨

当前,国内各级医院,都不同程度地配置了各种类型的冰冻切片机,以利解决临床的快速诊断问题。但是,由于技术人员的技术经验参差不齐,又没有正式的冰冻切片技术训练课程,致使机器虽然配置了,技术力量仍跟不上去的问题。如何掌握好这一门技术,使之更好地服务于临床呢...     

脱落细胞涂片免疫组织化学技术有关问题的探讨

脱落细胞涂片免疫组织化学技术最需要注意的问题是背景染色和涂片粘附的牢固程度。因为背景的存在会影响对阳性结果的判断,尤其是抗原表达少的弱阳性的病例,而涂片涂的不好,厚薄不均,粘贴不牢都将会在操作时把涂上的细胞冲掉,造成染色的失败。因此我们采用了敏感性高,效果好的免疫组织化学真空负压ＬＳＡＢ法进行标记,ＡｒｔｃｒａｙｏｔａＡｒｔ和Ｃｒａｆｔｇｌｕｅ等涂于载玻片上,干后再涂片。经多次反复的实验证明,获得的结果好,背景清晰,阳性物明显突出,易于判断,涂片上的细胞黏附牢固,未出现细胞被冲洗脱落的现象。保证…     

真空负压、微波辐射和电炉三种不同处理方法对抗原修复的比较研究

利用免疫组织化学方法显示抗原抗体,达到抗原抗体的定性和定位。但是,由于按照常规免疫染色程序,却难以将癌基因和抗癌基因产物等显示出来。应用高温进行抗原修复（Ａｎｔｉｇｅｎｒｅｔｒｉｅｖａｌ,ＡＲ）后,可有效地充分暴露抗原决定簇,从而使抗原抗体反应能顺利...     

真空负压和常规ABC法显示HPV—1抗原的应用比较

应用真空负压 ABC 法显示 HPV-1抗原比常规 ABC 法效果好,敏感性高,时间短,整个过程只需一个多小时,阳性物明显突出,颗粒均匀,色泽鲜艳,呈黄棕色,背景清晰等优点。还可提高抗体的稀释度,降低成本。与微波技术相比,具有设备简单,易于操作,安全可靠,不受条件限制,经对26例尖锐湿疣的病例进行多层次稀释度的研究,取得了满意的结果,认为该法值得推广应用。     

SARS病毒巨细胞病毒合并感染真菌及其染色方法的应用比较

目的几种染色方法显示星形隐球菌和曲菌的比较。方法Grocott-Gomori六胺银改良法,Gomori氏嗜银法和PAS结果Grocott-Gomori氏六胺银改良法显示上述两种真菌效果最好,该法对真菌的显示颜色鲜艳,图像清晰,真菌的孢子和菌丝被染成深黑色,易与其它成份相区别;Gomori氏嗜银法对大量含有菌丝的组织有一定的染色效果,PAS法也能将上述两种真菌显示出来,但所着染成份较多,较难区别。结论Grocott-Gomori氏六胺银改良法是染真菌的最好方法。     

红花草莓的组织培养与快繁技术研究

以红花草莓叶片为外植体,通过筛选诱导愈伤组织、不定芽及壮苗、生根的培养基,建立一套实用且易推广的红花草莓组培快繁技术体系。结果表明:在愈伤组织的诱导过程中TDZ的诱导效果优于6-BA,TDZ与NAA配合使用效果优于与IBA的组合。6-BA浓度为0.5 mg·L~(-1)时不定芽诱导率高达86.6%。低浓度的6-BA和8 g·L~(-1)的琼脂更有利于壮苗培养,NAA比IBA更有利诱导生根。综上述,最适红花草莓愈伤组织的诱导培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)TDZ+0.5 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)琼脂;最适不定芽分化的培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)琼脂;最适壮苗培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+8g·L~(-1)琼脂;最适生根培养基为MS+0.5mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+8 g·L~(-1)琼脂。试管苗移栽生长20 d后,成活率高达93%,且后期草莓苗生长壮健。此体系的建立为优质红花草莓种苗大规模生产提供了科学依据和技术支持。