胸腺素β10的研究进展

胸腺素β10(Tβ10)是胸腺素β家族成员。与Tβ4一样,Tβ10也是与细胞运动有关的肌动蛋白隐蔽蛋白。研究发现Tβ10可能与某些肿瘤行为,如细胞增殖、细胞凋亡、血管生成、肿瘤转移等相关。目前细胞中Tβ10作用的分子机制尚不明确。有研究表明,Tβ10有差别地表达于胚胎发生和神经发育过程中,在炎症及肿瘤发生时其表达量也有所上调,甚至过表达。我们简要综述了Tβ10的研究进展,包括差异表达、功能、机制,以及在肿瘤治疗、创伤愈合等疾病中的潜在应用。     

表达红色荧光及转胸腺素β4基因绵羊胎儿成纤维细胞系的制备

旨在构建胸腺素β4(thymosin beta4,Tβ4)基因真核表达载体并转染绵羊胎儿成纤维细胞,获得稳定表达胸腺素β4及红色荧光蛋白的转基因细胞克隆。将克隆载体pMD19TT中的胸腺素β4基因亚克隆到表达载体pIRES2-DsRed2的多克隆位点,构建表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4,脂质体介导转染绵羊胎儿成纤维细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞克隆。RT-PCR检测Tβ4基因在宿主细胞中的转录。测序结果显示,构建的表达载体pIRES2-DsRed2-Tβ4序列中,Tβ4基因正确连接在CMV启动子下游,顺序连接IRES2序列和红色荧光蛋白基因,载体构建正确。脂质体介导的稳定转染效率约为15%,经G418筛选得到转基因细胞克隆并高效表达红色荧光蛋白。RT-PCR检测显示外源Tβ4基因在绵羊胎儿成纤维细胞中得到转录。成功构建具有红色荧光蛋白和新霉素抗性双选择标记的胸腺素β4基因真核表达载体并稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞,筛选得到的超表达胸腺素β4绵羊胎儿成纤维细胞系为下一步通过核移植和克隆技术获得转基因绵羊提供了条件。     

无脊椎动物β－胸腺素的功能研究进展

β-胸腺素(β-thymosin)是肌动蛋白单体(G-actin)的锚定因子,它可以阻止后者多聚化形成微丝。当前关于β-胸腺素的研究主要集中在脊椎动物中,发现其在淋巴系统的发育、维持免疫系统的平衡、中枢神经系统的发育等生命过程中起着重要作用。人体中胸腺素β4(Thymosinβ4,Tβ4)参与了机体抗菌过程,并且能促进伤口愈合,组织、器官的修复重塑。在无脊椎动物中,也发现了β-胸腺素的存在,研究发现这类蛋白与Tβ4具有一定的相似性,但是在结构及功能上却比Tβ4更为复杂,详细讨论了β-胸腺素在无脊椎动物中的研究进展。     

非小细胞肺癌中DPC4、VEGF基因的表达及相关性研究

目的:研究DPC4和VEGF基因在非小细胞肺癌中的表达及相关性.方法:利用免疫组织化学SP法检测60例NSCLC组织、10例相应的癌旁正常肺组织中DPC4、VEGF的表达.结果:DPC4在60例NSCLC标本中的阳性表达率为63.3%(38/60),癌旁正常肺组织中的阳性表达率90.0%(9/10),差别有显著性意义(P＜0.05);DPCA与患者的年龄、性别、组织学类型、TNM分期、肿瘤细胞分化程度无关(P＞0.05),而与淋巴结转移显著相关(P＜0.05).肺癌组织中VEGF阳性率(81.7%,49/60)明显高于正常肺组织(20.0%,2/10),有显著性差别(P＜0.05);VEGF的阳性表达与患者的年龄、性别、组织学类型无关(P＞0.05),而与TNM分期、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移明显相关.60例NSCLC中,DPCA的表达与VEGF呈明显的负相关(r=0.303,P＜0.05).结论:DPC4在肺癌组织中低表达,可促进肺癌的淋巴结转移.VEGF在肺癌组织中高表达,可促进肺癌的发生、发展、转移.DPC4、VEGF在肺癌中的表达呈负相关,提示DPC4可能通过下调VEGF的表达而抑制血管的生成.     

重组人胸腺素β4二串体蛋白的原核表达、纯化及生物活性

目的:获得具有生物学活性的重组人胸腺素β4二串体蛋白(Tβ4②)。方法:人工合成人Tβ4全长基因,构建Tβ4②基因,并将该基因克隆入载体pET-22b(+)中,转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经疏水作用层析纯化重组Tβ4②蛋白,采用Western印迹鉴定表达产物,并对其进行生物活性检测。结果:表达和纯化了Tβ4②蛋白,重组人Tβ4②在体外可促进人脐静脉内皮细胞的增殖和迁移。结论:重组人Tβ4②具有与化学合成Tβ4相同的功能,并有更高的生物学活性。     

胸腺素β4与药物开发

胸腺素β4是广泛分布于脊椎动物体内的一种蛋白质,能够调节肌动蛋白聚合、解聚,具有多项生物学功能。胸腺素β4尤其具有促进组织再生、修复的重要功能,在创伤修复、角膜修复和心肌修复方面极具药物开发潜力。近年来,研究者们对胸腺素β4进行了大量生理机制研究,本文对其目前的研究状况和药物开发情况进行了综述。     

Kiss-1 及MVD 在非小细胞肺癌中检测的临床意义及其相关性研究

目的:测定NSCLC组织中kiss-1基因表达、MVD分布,探讨其临床意义及其相关性.方法:应用免疫组化SP法检测56例NSCLC组织中Kiss-1表达及MVD分布情况,分析其与NSCLC的临床病理参数的关系及其相关性.结果:Kiss-1在NSCLC表达低于对照组(P＜0.05),MVD在NSCLC分布明显高于对照组(P＜0.05).Kiss-1与NSCLC的临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小有关(P＜0.05).MVD与NSCLC分化程度、临床分期及淋巴结转移、肿瘤大小有关(P＜0.05).Kiss-1阳性组MVD分布明显低于Kiss-1阴性表达组,二者呈负相关(P＜0.05,r=-0.363).结论:Kiss-1及MVD在非小细胞肺癌发生、发展中发挥重要作用,二者存在相关性,联合检测可帮助预测NSCLC的侵袭、转移,判断预后.     

miR-191在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-191在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光相对定量聚合酶链式反应(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织中miR-191的表达水平,并分析其与患者临床病理特征及生存期的相关性。结果:与癌旁组织比较,癌组织中miR-191的表达显著上调。组织分化程度低或有淋巴结转移的NSCLC患者癌组织中miR-191表达明显高于组织分化程度高或无淋巴结转移的NSCLC患者(P0.05),癌组织高表达miR-191的NSCLC患者生存期明显短于癌组织低表达miR-191的NSCLC患者(P0.05)。结论:miR-191在非小细胞肺癌中表达上调,与组织分化程度、淋巴结转移和患者生存期有关。     

Kiss-1及MVD在非小细胞肺癌中检测的临床意义及其相关性研究

目的：测定NSCLC组织中kiss-1基因表达、MVD分布,探讨其临床意义及其相关性。方法：应用免疫组化SP法检测56例NSCLC组织中Kiss-1表达及MVD分布情况,分析其与NSCLC的临床病理参数的关系及其相关性。结果：kiss-1在NSCLC表达低于对照组（P〈0.05）,MVD在NSCLC分布明显高于对照组（P〈0.05）。Kiss-1与NSCLC的临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小有关（P〈0.05）。MVD与NSCLC分化程度、临床分期及淋巴结转移、肿瘤大小有关（P〈0.05）.Kiss-1阳性组MVD分布明显低于Kiss-1阴性表达组,二者呈负相关（P〈0.05,r=-0.363）。结论：Kiss-1及MVD在非小细胞肺癌发生、发展中发挥重要作用,二者存在相关性,联合检测可帮助预测NSCLC的侵袭、转移,判断预后。     

p27~(Kip1)和CyclinD1在非小细胞肺癌中表达及意义

为了探讨p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义,收集临床手术切除的非小细胞肺癌组织蜡块64例及正常肺组织10例,应用免疫组化(S-P法)检测组织中p27Kip1蛋白和CyclinD1蛋白的表达,结合临床病理资料和随访资料进行回顾性研究。实验发现NSCLC组织中p27Kip1蛋白表达和CyclinD1蛋白表达均明显不同于正常肺组织(P<0.01)。p27Kip1蛋白表达降低与NSCLC肿瘤大小、病理分级、分期增加、淋巴结转移之间有相关性(P<0.05),但与肿瘤组织学分型无相关性(P>0.05)。CyclinD1蛋白过表达与组织学分型、肿瘤大小、病理分级、临床分期、淋巴结转移无相关性(P>0.05)。p27Kip1蛋白表达与CyclinD1蛋白表达之间呈显著负相关(P<0.01)。cox单因素及多因素分析,p27Kip1蛋白低表达及CyclinD1过表达是影响NSCLC患者预后的主要因素。实验结果显示,NSCLC组织中,p27Kip1蛋白表达降低,而CyclinD1过表达,二者与NSCLC的发生发展机制有关,可作为预后指标,有利于NSCLC患者预后判断及个体化治疗。     

TGF-β1和Smad4在膀胱癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的：观察转化生长因子β1（TGF-β1）和Smad4在膀胱癌组织内的表达情况,并分析其与膀胱癌淋巴管生成及淋巴结转移之间的关系。方法：选择在本院确诊的膀胱癌患者50例,根据淋巴结转移与否分为淋巴结转移组（30例）和无淋巴结转移组（20例1。应用免疫组化法检测膀胱癌组织内TGF-β1和Smad4的表达。以D2—40作为淋巴管内皮特异性标记物,检测膀胱癌组织内淋巴管生成情况并分析其与TGF-β1和Smad4的表达的关系。结果：TGF．B1主要表达于膀胱癌细胞胞浆内,在淋巴结转移组的表达率明显高于无淋巴结转移组（P=0．017）。Smad4表达于膀胱癌细胞胞浆和胞核内,在无淋巴结转移组的表达率明显高于有淋巴结转移组（P=0．005）。Smad4表达阳性组的淋巴管数密度（LVD）明显低于Smad4表达阴性组（P=0．037）。TGF-p1的表达与Smad4的表达呈显著的负相关性（P=0．001）。结论：TGF-β1的表达与膀胱癌淋巴管生成及淋巴结转移呈显著正相关,Smad4的表达与膀胱癌淋巴管生成及淋巴结转移呈显著负相关,TGF-β1／Smad4信号通路可能在膀胱癌淋巴管生成和淋巴结转移过程中起重要作用。     

食管癌组织中β-catenin、E-cadherin及MMP-9的表达及其临床意义

摘要 目的：探讨食管癌组织中β-链蛋白（β-catenin）、E钙黏素（E-cadherin）及金属基质蛋白酶-9（MMP-9）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法对60例食管癌患者癌组织和癌旁组织中β-catenin、E-cadherin及MMP-9蛋白表达进行检测,分析其表达与临床病理特征的关系。所有患者随访24个月,观察不同β-catenin、E-cadherin及MMP-9蛋白表达患者的生存情况,并分析食管癌患者癌组织中β-catenin、E-cadherin及MMP-9蛋白表达的相关性。结果：食管患者癌组织中β-catenin及MMP-9蛋白阳性率高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性率低于癌旁组织（P<0.05）。中低分化、TNM分期为III+IV期、有淋巴结转移者β-catenin及MMP-9蛋白阳性率高于高分化、TNM分期为I+II期、无淋巴结转移者,E-cadherin蛋白阳性率低于高分化、TNM分期为I+II期、无淋巴结转移者（P<0.05）。经Log_rank检验发现,癌组织中β-catenin（-）、E-cadherin（+）、MMP-9（-）患者生存率高于β-catenin（+）、E-cadherin（-）、MMP-9（+）患者（P<0.05）。Spearman相关分析显示,食管癌患者癌组织中β-catenin蛋白表达与E-cadherin蛋白表达呈负相关,与MMP-9蛋白表达呈正相关（P<0.05）,MMP-9蛋白表达与E-cadherin蛋白表达呈负相关（P<0.05）。结论：食管癌患者存在β-catenin、MMP-9异常高表达,E-cadherin异常低表达,其表达与食管癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,检测β-catenin、MMP-9、E-cadherin的表达情况有助于预测食管癌患者生存预后。     

凋亡抑制蛋白Livin和抑癌基因p53在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义

目的检测livin和P53蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达并分析其临床病理学意义。方法采用免疫组织化学(SABC)的方法检测livin和P53蛋白在40例NSCLC患者肺癌组织切片中的表达,分析其与临床病理学参数之间的关系。结果40例NSCLC中livin和P53蛋白阳性表达率分别为47.5%和52.5%,在淋巴结转移的NSCLC组织中livin的阳性率明显高于无淋巴结转移的肺癌组织(P<0.05),且与肺癌不同分期有关(P<0.05)。P53蛋白表达亦与肿瘤分期有关,P53在鳞癌中的表达率显著高于腺癌(P<0.05)。P53和livin均与年龄、性别、肿瘤分化程度等临床病理学参数无关(P>0.05)。Livin与P53蛋白的表达无明显相关性(P>0.05)。结论livin与P53异常表达与NSCLC的恶性生物学行为有关,其表达对临床上判断NSCLC的预后有重要意义。     

TNC在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:肺癌是威胁人类健康最常见的恶性肿瘤之一,并且已有超过1/3的NSCLC患者诊断时发生了转移。早期判断肺癌的转移对于肺癌患者的治疗和预后有非常重要的意义。Tenasein-C(TNC)具有调节细胞发生、增殖、迁移、分化的作用。本文主要研究Tenascin-C(TNC)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨Tenascin-C与NSCLC临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学EnVinsion法检测70例NSCLC及其正常组织内TNC蛋白的表达情况,并分析肺癌组织中TNC的表达和临床病理特征之间的关系。结果:TNC在NSCLC组织内高表达而在正常组织中不表达。TNC在腺癌和鳞癌中表达差异无统计学意义(P0.05)。TNC表达与NSCLC的TNM分期、有无侵及胸膜及淋巴结转移有关(P0.05),但其表达与肿瘤直径、病理分级无关(P0.05)。结论:结果显示TNC的表达与肺癌的分类无关。进一步的分析表明,TNC表达与NSCLC的肿瘤的TNM分期、有无胸膜浸润及淋巴结转移有关,但其表达与肿瘤直径、病理分级无关。故TNC在NSCLC组织中的表达与NSCLC的侵袭和转移有关,其表达可能有助于肿瘤细胞的转移和癌细胞浸润,检测其表达有助于判断肺癌患者的预后。     

microRNA-21、MMP-9在非小细胞肺癌发病机制中的作用

为了探讨微小核糖核酸-21 (microRNA-21)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义,本研究选取2015年2月至2017年3月我院病理科保存的NSCLC组织72例,同时选取同标本癌旁组织(距肿瘤边缘5 cm)作为对照,采用实时荧光定量PCR检测microRNA-21表达,免疫组化染色法检测MMP-9表达。结果显示:NSCLC组织microRNA-21表达水平为0.157±0.054,明显低于癌旁组织(p0.05),而MMP-9阳性表达率为73.61%,明显高于癌旁组织(p0.05);中低分化患者microRNA-21表达为0.136±0.044,明显低于高分化患者(p0.05),而MMP-9阳性表达率为86.36%,明显高于高分化患者(p0.05);有淋巴结转移患者microRNA-21表达为0.140±0.050,明显低于无淋巴结转移患者(p0.05),而MMP-9阳性表达率为86.67%,明显高于无淋巴结转移患者(p0.05);microRNA-21和MMP-9呈负相关(r_s=-0.327, p0.05)。本研究表明,microRNA-21在NSCLC中低表达,而MMP-9表达升高,二者呈负相关且与NSCLC临床病理特征有一定关系。     

MMP14在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

肺癌5年生存率低,侵润和转移是导致其死亡的主要原因.探讨MMP14(matrix mettallo proteinase 14)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,及其与浸润转移和预后的关系.通过采用免疫组化检测92例NSCLC组织及25例癌旁正常组织中MMP14蛋白的表达,并分析其与临床病理学特征及预后的关系.免疫组化结果显示,MMP14蛋白在NSCLC组织中表达的阳性率为64.1%(59/92),显著高于癌旁正常组8%(2/25)(P<0.001).MMP14阳性率与NSCLC的分化程度、T分期、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),而与性别、年龄、吸烟及组织学类型无关(P>0.05).Kaplan-meier生存曲线显示,MMP14阳性表达组的患者5年生存期显著低于阴性表达组(P=0.004).Cox多因素回归分析显示,MMP14不是NSCLC的独立预后因素(P>0.05).MMP14在肺癌的分化、浸润和转移中扮演着重要的作用,并对生存期有一定的影响.     

SRPX2在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨含Sushi重复蛋白X连锁2(Sushi repeat containing protein,X-linked 2,SRPX2)在非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方检测93例NSCLC组织和23例癌旁正常组织中SRPX2的表达,并分析与NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。结果 SRPX2在NSCLC中的表达率为52.7%(49/93),显著高于癌旁正常组织中的表达率0%(0/26),在Ⅲ期中的阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期,有淋巴结转移组织中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组织,而与患者性别、年龄、有无吸烟、组织学类型及分化程度无关。Kaplan-meier生存曲线显示,SRPX2阳性表达的患者生存率明显低于表达阴性者。结论 SRPX2在NSCLC组织中阳性表达,对肿瘤细胞的浸润和转移起促进作用,阳性表达患者生存率低。     

子宫内膜癌中TGF-β_1及受体TβRI的表达及其临床意义

目的:研究转化生长因子(TGF-β_1)及其Ⅰ型受体(TβRI)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR方法检测36例子宫内膜癌及31例正常子宫内膜组织中TGF-β_1及TβRI基因的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果:子宫内膜癌组织中TGF-β_1mRNA的表达明显高于正常组织(P<0.05),而TβRI mRNA的表达水平明显低于正常内膜组织(P<0.05)。TGF-β_1mRNA及TβRImRNA在子宫内膜癌中的表达均与肿瘤的临床分期、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移呈显著性相关(P<0.05),差别有统计学意义。结论:TGF-β_1及其Ⅰ型受体TβRI在子宫内膜癌的发生、发展中可能起重要作用,检测TGF-β_1及TβRI对评价子宫内膜癌的转移及预后有重要价值。     

食管癌组织中β-catenin、PTTG及c-myc的表达及其临床意义*

目的:探讨食管癌组织中β-链接素(β-catenin)、垂体肿瘤转化基因(PTTG)、原癌基因(c-myc)的表达及其临床意义。方法:将2015年6月至2017年6月期间新疆医科大学附属肿瘤医院手术切除的食管鳞癌标本98例作为观察组,同时切取癌旁正常黏膜组织标本98例作为对照组,观察两组β-catenin、PTTG、c-myc蛋白表达情况,对比观察组不同病理特征患者β-catenin、PTTG、c-myc蛋白阳性表达情况,并分析食管癌组织中PTTG与β-catenin、c-myc蛋白表达的相关性。结果:观察组β-catenin、PTTG、c-myc蛋白表达阳性率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组β-catenin、PTTG、c-myc蛋白阳性表达均与患者的TNM分期和淋巴结转移有关(P0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤直径以及分化程度无关(P0.05)。食管癌组织中PTTG与β-catenin、c-myc蛋白表达均呈正相关(P0.05)。结论:食管癌患者β-catenin、PTTG、c-myc蛋白表达阳性率较高,与患者的TNM分期和淋巴结转移有关,且PTTG与β-catenin、c-myc蛋白表达呈正相关,三者可作为早期诊断和评估食管癌预后的重要参考指标。     

Tenascin,β-catenin,TGF-β1在胃癌中的表达及意义

目的:探讨胃癌组织中Tenascin、β-catenin、TGF-β1的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测70例胃癌组织和20例癌旁正常组织中Tenascin、β-catenin、TGF-β1的表达。结果:①Tenascin主要表达于胃癌组织中癌相关纤维母细胞的胞质,且与胃癌的Lauren分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移关系显著(P<0.05);②β-catenin在胃癌的异常表达与胃癌的Lauren分型及分化程度关系显著(P<0.05);③TGF-β1在胃癌组织中主要表达于肿瘤细胞的胞质,其表达强度与胃癌的临床分期、浸润深度及淋巴结转移显著相关(P<0.05);④Tenascin与β-catenin在胃癌中的表达呈负相关(r=-0.505,P<0.05)。结论:胃癌组织中Tenascin、β-catenin、TGF-β1蛋白的表达与肿瘤的侵袭、转移关系密切,β-catenin对间质中Tenascin的聚集具有抑制效应。