PMSG和FSH同期发情处理对小鼠子宫、卵巢和输卵管中雌激素α受体分布的影响

目的从雌激素α受体（estrogen receptorα,ERα）的角度探讨孕马血清促性腺激素（pregnant mareserum gonadotropin,PMSG）和促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）处理小鼠的卵巢、输卵管和子宫中,ERα分布是否有显著性差异。方法 10只8周龄母鼠,随机分为处理方式不同的两个组：PMSG组和FSH组,两组均在处理第48小时取其卵巢、输卵管和子宫样固定,采用免疫组织化学法分别观察组织中ERα分布情况。结果免疫组化结果显示,两个处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜的细胞中都有ERα表达;PMSG处理组卵巢中的初级卵泡和成熟卵泡上ERα阳性率和平均吸光度均显著高于FSH处理组;FSH处理组的输卵管中ERα阳性率和平均吸光度均高于PMSG处理组;FSH处理组子宫基质和腺上皮细胞中ERα的阳性率显著高于PMSG组,其中PMSG组基质中的平均吸光度显著高于FSH组,而子宫内膜上皮细胞的阳性率和平均吸光度两处理组间差异无显著性。结论 PMSG和FSH同期发情诱导由于其特性可不同程度地影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中ERα的分布,使之在不同组织中产生差异性变化。     

雌激素和孕激素对不同发情方式小鼠子宫内膜中孕激素受体分布的影响

目的探讨雌（Estrogen,E2）、孕激素（Progesterone,P4）对同期发情与自然发情小鼠子宫内膜中孕激素受体（Progesterone receptor,PR）分布的影响。方法45只同日龄雌鼠,根据处理方式的不同随机分为5组：自然发情组（对照组）、同期发情组、卵巢摘除组、P4处理组和E2处理组,5组小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中PR的分布变化情况。结果免疫组织化学染色结果显示,5个处理组小鼠子宫内膜的三种细胞中都有PR存在;同期发情组小鼠子宫内膜中三种类型细胞PR的表达与自然发情组差异有显著性（P〈0.05）;P4处理组小鼠子宫内膜中三种类型细胞PR的表达在见栓第4、6天显著低于卵巢摘除组（P〈0.05）;E2处理组小鼠子宫内膜腺上皮和间质中PR在第4、6、8天时都显著高于卵巢摘除组（P〈0.05）,而在腔上皮中则显著低于卵巢摘除组（P〈0.05）。结论同期发情处理与自然发情小鼠的子宫内膜上PR的分布,都受E2和P4的特异诱导而变化。     

同期发情处理小鼠与自然发情小鼠子宫内膜中孕激素受体分布的比较

目的从孕激素受体（PR）的角度探讨同期发情处理与自然发情小鼠的子宫内膜上,孕激素受体分布是否受内源孕激素的特异诱导而变化,两者之间是否存在差异。方法27只同日龄母鼠,根据处理方式的不同随机分为三个组：自然发情假孕组（对照组）、同期发情处理假孕组和自然发情假孕第l天摘除卵巢组,3个组的小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中孕激素受体的分布情况。结果免疫组化结果显示,三个处理组小鼠子宫内膜的三种细胞中都有PR存在;见栓第4天时,同期发情处理组小鼠子宫腺上皮细胞和基质细胞的PR胞核阳性率显著高于自然发情组（P〈0．05）;见栓第6天时,同期发情处理组小鼠子宫内膜三种细胞中的PR胞核阳性率显著高于自然发情组（P〈0．05）;同时自然发情假孕第1天摘除卵巢组在见栓第6和8天时的阳性率均显著低于其它两组（P〈0．05）。结论同期发情处理的小鼠子宫内膜中孕激素受体分布显著高于自然发情小鼠,且两者都受其内源性孕激素的特异诱导而变化。     

自然发情与诱导发情小鼠子宫内膜中雌激素受体α表达的比较

目的从雌激素受体α(ERα)的角度探讨自然发情小鼠与诱导发情小鼠的子宫内膜上,雌激素受体α表达是否受内源雌激素的特异诱导而变化,两者之间是否存在差异。方法27只同日龄母鼠,根据处理方式的不同随机分为3个组:自然发情假孕组(对照组)、诱导发情处理假孕组和自然发情假孕第1天摘除卵巢组,3个组的小鼠在见栓后第4、6、8天分别取样后,采用免疫组织化学法观察小鼠子宫内膜中雌激素受体α的表达情况。结果免疫组化结果显示,3个处理组的小鼠子宫内膜上皮细胞核、胞质都有ERα存在,且主要表达在腺上皮;见栓第4、6、8天时,诱导发情处理组小鼠子宫内膜的ERα阳性率均显著高于自然发情组和自然发情第1天摘除卵巢组(P0.05);见栓第8天时,自然发情处理组小鼠子宫内膜中的ERα阳性率与自然发情第1天摘除卵巢组差异不显著(P0.05),但见栓第4、6天时两者阳性率差异显著,自然发情处理组小鼠子宫内膜中的ERα阳性率显著高于自然发情第1天摘除卵巢组(P0.05)。结论诱导发情处理的小鼠子宫内膜,其表面雌激素受体α表达显著高于自然发情小鼠,且两者都受其内源性雌激素的特异诱导而变化。     

钙网质蛋白在多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜的表达及意义

目的：研究钙网质蛋白（CRT）在PCOS大鼠子宫内膜中的表达及生物学意义。方法：60只雌性SD大鼠随机分为PCOS组和对照组,每组各30只。给模型组24日龄大鼠皮下埋植左旋甲基炔诺酮硅胶棒3mm／只,3d后BID皮下注射人绒毛膜促性腺激素1．5IU。给对照组皮下注射等体积生理盐水。注射9d后观察大鼠卵巢形态学（HE染色）,化学发光法测定性激素水平。结果：模型组大鼠卵巢重量和体积均显著高于对照组（P〈0．01）。模型组大鼠卵巢出现类多囊卵巢综合征的改变。模型组卵巢各级发育期卵泡及黄体少见,卵泡多呈囊性扩张。模型组大鼠血清孕激素、睾酮、空腹胰岛素、空腹血糖水平均显著高于对照组（P〈0．05）;卵泡刺激素（FSH）水平显著低于对照组（P〈0．05）。LH／FSH比值显著高于对照组（P〈0．05）。采用免疫组织化学方法及灰度值测定,定量分析CRT在PCOS组和对照组的子宫内膜中表达。CRT在两组中的子宫内膜中均有表达。PCOS组子宫内膜上皮CRT表达显著低于对照组（P〈0．01）。结论：避孕硅胶棒联合hCG诱导SD大鼠多囊卵巢综合征模型是较好的PCOS模型。CRT与PCOS的发病密切相关．     

PMSG、E_2、PGF_(2α)和hCG组合处理对初情前蓝狐卵巢和子宫的影响

为了完善提高狐狸繁殖效率的超排技术,探讨了用PMSG、E2、PGF2α和hCG的不同组合处理对诱发初情前雌性蓝狐发情及其对卵巢和子宫发育的影响.EPP组(E2、PMSG和PGF2α组合)和EPPh组(E2、PMSG、PGF2α和hCG组合)分别有2只和3只发情,而对照组未见发情;EPP和EPPh组卵巢指数和有腔卵泡百分率显著高于对照组(P<0.05),而初级卵泡所占百分率则显著低于对照组.此外,EPPh组次级卵泡所占百分率与对照组相比显著降低(P<0.05);当用EPP和EPPh法处理雌性蓝狐后,子宫指数、子宫壁和子宫内膜厚度显著高于对照组(P<0.05).结果 表明,EPP和EPPh处理不仅具有诱发雌性蓝狐发情的功效,而且能够提高初情前雌性蓝狐卵巢指数和增加有腔卵泡数量.     

孕马血清促性腺激素对幼龄鼠卵巢和子宫发育的影响

目的探明孕马血清促性腺激素（PMSG）调控哺乳动物生殖生理机制。方法用4 IU PMSG分别处理出生第5天、第10天、第15天和第21天幼鼠,观察其对卵巢和子宫发育的影响。结果（1）PMSG处理后,出生第15天幼鼠的卵巢指数（33.08%）与对照组（27.16%）间差异显著（P〈0.05）;（2）PMSG处理后,第5天、10天和第15天幼鼠的初级卵泡和有腔卵泡相对数量与对照相比无差异,而21 d处理组次级卵泡相对数量显著增加;（3）虽然出生后10 d前的幼鼠子宫对PMSG的反应较弱,但是,PMSG对出生后15-21 d幼鼠子宫重量指数、子宫肌层和子宫内膜层厚度发育具有明显的促进作用,而对子宫腺体数量增加无影响。结论PMSG对幼鼠卵巢的发育无明显影响;PMSG对出生后第15天前后的子宫发挥作用,而且其作用随着出生日龄的增加而增强。     

不同剂量孕马血清促性腺激素超排处理对家兔卵巢组织形态和胚胎发育的影响

为了研究不同剂量的孕马血清促性腺激素（PMSG）对家兔（Oryctolagus cuniculus f. domesticus）超排后,卵巢组织形态和PMSG对早期胚胎体外发育的影响。将24只家兔分为对照组、50 IU、70 IU和90 IU组,每组6只,对照组不做处理,后3组分别注射50 IU、70 IU和90 IU PMSG和定量100 IU人绒毛膜促性腺激素（HCG）对家兔进行超排处理。解剖后测定卵巢形态和组织参数。利用注射器抽取5ml冲卵液,分别从左右输卵管冲取胚胎至培养皿中,转至细胞培养室对胚胎进行体外培养观察。结果显示,PMSG处理组与对照组相比,随着PMSG注射剂量的增大,家兔卵巢重及宽度和厚度均极显著增大（P<0.01）,卵巢长度显著增长（P<0.05）,卵巢表面充血,卵泡数增多;另外,随PMSG注射剂量的增大,次级卵泡及其卵母细胞直径、三级卵泡直径均呈减小趋势（P <0.01）,三级卵泡中卵母细胞直径呈增大趋势,与对照组相比差异显著（P <0.05）;三级卵泡的直径和卵泡的优势化率,70 IU组显著高于对照组及50 IU和90 IU组（P &l...     

孕酮膜受体在小鼠生殖系统的分布与表达

目的观察孕酮膜受体(membrane progestin receptors,m PRs)在小鼠子宫、输卵管和卵巢的分布及其周期性变化。方法用实时定量PCR、免疫组织化学分别检测动情期和动情间期小鼠生殖系统m PRs的m RNA及蛋白表达。结果在子宫内,m PRα、β免疫阳性反应分布于内膜上皮、腺体上皮、内膜基质和血管内皮,而m PRγ弱免疫阳性反应见于腺体上皮和血管内皮;在卵巢中,m PRα、β免疫阳性反应见于卵巢间质、卵母细胞和颗粒细胞,m PRγ而未见明显免疫阳性反应;在输卵管中,3种蛋白均未见明显免疫阳性反应。实时定量PCR显示3种m RNA在卵巢、输卵管和子宫均表达,m PRβ的m RNA表达水平最高;动情期和动情间期3种m RNA在卵巢、输卵管和子宫中均有表达,而表达水平无显著性差异。结论 m PRα、β在卵巢和子宫中表达稳定,提示小鼠生殖系统中,孕酮的非基因效应可能更多依赖m PRα、m PRβ的介导,尤其是m PRβ。     

血管紧张素Ⅱ在小鼠卵泡闭锁中的作用

应用幼年小鼠经孕马血清促性腺激素（pregnant mares serum gonadotropin,PMSG)处理的动物模型,研究了卵泡从发育到闭锁动态变化过程中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的作用。结果表明：（1）24日龄小鼠给予PMSG（10IU/只）后6d时,卵巢中出现大量闭锁卵泡,颗粒细胞DNA琼脂糖电泳显示了梯形条带;（2）随卵泡闭锁发生,卵巢AngⅡ含量增加;（3）AngⅡ显著拮抗FSH刺激颗粒细胞雌二醇生成的作用。我们认为,AngⅡ参与了对小鼠卵泡闭锁的调节。     

奶牛卵泡超数同步发育及其卵母细胞的发育潜能

目的建立促奶牛卵泡超数同步发育的方法,并利用体细胞核移植和分子技术评价来自这些卵泡的卵母细胞发育潜能。方法用E2-P4对淘汰的高产奶牛进行联合处理后,分别对其实施不同组合的外源促性腺激素处理[FSH12h组,FSH48h组,FSH48h-LH6h组（简称LH6h组）,FSH48h-LH26h组（简称LH26h组）]以促进其卵泡超数同步发育;然后从卵泡中回收COCs进行体外成熟,排放第一极体的卵供作优质种牛的体细胞核转移（nucleartransfer,NT）受体,以评价卵的发育潜能。结果E2-P4能成功地诱导奶牛卵巢中产生一个新的卵泡起始波,并能保证卵泡在外源促性腺激素作用下实现超数同步发育;上述四组不同组合外源促性腺激素处理的卵母细胞衍生的NT重构胚经体内培养7d后,后3组的囊胚发育率显著高于FSH12h组和对照组（P〈0.01）;将这些克隆囊胚移植同步发情的受体牛子宫后,仅LH26h组的卵所获得的克隆胚能实现全程发育（直至克隆小牛出生）。经RT-PCR分析颗粒细胞中FSHr、LHr和连接蛋白43（Connexin43,Cx43）等mRNA含量变化,以及Western印迹分析其Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化,证实该组卵巢提供的同步发育卵泡为早期闭锁卵泡。结论E2-P4-FSH48h-LH26h组合处理可人为调控牛卵泡的同步发育;处于早期闭锁状态卵泡的卵母细胞具备较高的发育潜能。     

D-半乳糖诱导建立的小鼠多囊卵巢综合征模型

目的研究D-半乳糖诱导ICR中年雌性小鼠多囊卵巢综合征(PCOS)动物模型的卵巢形态学、性激素以及胰岛素水平变化,并探讨D-半乳糖引致小鼠PCOS的意义。方法以D-半乳糖腹腔注射20周龄ICR雌性小鼠8周,观察卵巢形态的变化,检测血糖值及动情周期排卵情况,并采用ELISA法测定血清胰岛素、雌二醇(E2)、促卵泡生长激素(FSH)、睾酮(T)水平。结果 D-半乳糖处理组小鼠的卵巢重量显著高于对照组(P<0.05),有80%(10/12)的单侧或双侧卵巢呈现多囊性扩张,卵巢闭锁增多及颗粒细胞层数减少,并表现为紊乱的动情周期,提示无排卵;与对照组比较,D-半乳糖组小鼠血清T、E2和空腹血糖水平明显升高(P<0.001),FSH水平下降(P<0.0001),空腹血胰岛素水平显著高于对照组(P<0.01),胰岛素敏感指数显著低于对照组(P<0.05)。结论使用D-半乳糖诱导小鼠PCOS模型,无论在影响血清性激素还是卵巢局部形态学改变方面都与临床表现相似,并存在胰岛素抵抗现象,符合PCOS的典型特征,可作为动物模型用于科学研究。     

The effect of a GnRH agonist on follicular dynamics and response to FSH stimulation in prepubertal calves

Endocrine control of follicular growth was determined by observing the left ovary of prepubertal calves previously treated with a potent GnRH agonist for 13 days. The ovarian response to hormonal stimulation was determined using the right ovaries of the same animals. Three-month-old crossbred calves were assigned to one of the two following treatment groups: 1) saline control for 13 days, with purified porcine FSH for the last 3 days (n = 5); and 2) GnRHa for 13 days, with purified porcine FSH for the final 3 days (n = 5). The left ovaries were removed from all calves after 10 days, and the right ovaries were removed at the end of treatment. Plasma concentrations of FSH, LH and oestradiol-17 beta were followed up during the GnRHa and pFSH treatments. The maximum macroscopic diameter of the F1 follicle, as determined by daily ultrasonography, did not differ between GnRHa-treated calves (from 6.6 to 10.4 mm) and the saline control calves (from 6.7 to 10.3 mm). Histological analysis of the ovaries showed that the number of follicles > 0.40 mm in diameter varied greatly for calves of the two groups (from 11 to 220 at 10 days). GnRHa significantly increased the mean number of follicles (total and nonatretic) of size class > 5.4 mm as compared to saline control calves (P < 0.05). The FSH treatment significantly increased the mean number of follicles 3.00-5.4 and > 5.4 mm in diameter (P < 0.05), with no change in the number of follicles smaller than 3.00 mm. The rate of atresia of large follicles (3.01-5.40 mm) was significantly reduced by purified porcine FSH treatment in both groups (P < 0.05). In no case did the GnRHa induce ovulation or luteinization of follicles. The LH and FSH concentrations increased transiently after GnRHa treatment on the first day, but afterwards, both hormones increased to only one sixth of what was observed after the initial GnRHa injection treatment. This increase in LH and FSH was observed 1 h after GnRHa treatment on each consecutive day of the experiment and were significantly different in the control group (0 h versus 1 h versus 2 h x saline control versus GnRH agonists groups; P < 0.01). During the superovulatory treatment, FSH concentrations peaked at around 0.70 ng.mL-1 in both saline- and GnRHa-treated groups on the first day but on the last day of surovulatory treatment, FSH concentrations were higher in GnRHa agonist-treated calves than in the control calves (day 11 versus day 12 versus day 13 x saline control versus GnRH agonist treatment groups; P < 0.01). LH profiles were unchanged by surovulatory treatment. Concentrations of oestradiol-17 beta increased significantly over the three days (P < 0.001) of the superovulatory treatments in both groups (P < 0.01). These results indicate that GnRH agonist treatment allows recruited antral follicles to pursue their growth during the early selection process via sustained FSH and LH secretion allowing more than a single large follicle to maintain their growth without going to atresia.     

不同激素和注射方式对家猫超排效果的比较

比较了PMSG hCG和FSH hCG两种方案以及PMSG的不同剂量和注射方式对家猫的超排效果的影响。用 1 0 0IU的PMSG超排家猫所得到的排卵点数及平均每只猫获得的卵数显著低于 2 0 0IU处理组或 30 0IU处理组 (P <0 0 5 ) ,但 2 0 0IU处理组与 30 0IU处理组之间的超排效果也无显著差异 (P >0 0 5 ) ;用皮下注射 2 0 0IU的PMSG或用肌肉注射 2 0 0IU的PMSG对超排效果无差异 (P >0 0 5 ) ;用 2 0 0IUPMSG 2 0 0IUhCG和 1 5mgFSH 2 0 0IUhCG两种方案对家猫超排 ,发现不论是每只猫的排卵点数、卵子获得数 ,还是卵子的第一极体排放率都没有显著差异 (P >0 0 5 )。实验说明 ,PMSG的注射方式不影响对家猫的超排效果 ,用 2 0 0IU的PMSG超排家猫是较适合的剂量 ,FSH和PMSG都可用于家猫的超排 ,但PMSG使用更为方便。     

LH与hCG对昆明小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的研究促黄体素（LH）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）对昆明小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法小鼠经注射孕马血清促性腺激素（PMSG）48h后,摘取卵巢获得未成熟卵母细胞,分别在含不同浓度的LH和hCG的成熟液中,或将LH和hCG以不同的浓度组合加入到成熟液,进行体外成熟。结果经15.16h的成熟培养,5个浓度LH组中的极体率均高于对照组,其中200IU/mL组显著高于50IU/mL、400IU/mL、300IU/mL组和对照组（P〈0.05）;5个浓度hCG组的极体率与对照组极体率无显著差异（P〉0.05）;协同组中15IU/mL hCG＋200IU/mL LH组的极体率显著高于对照组和其它各处理组。结论LH对小鼠卵母细胞的体外成熟有一定的促进作用。     

妇科再造丸联合甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤的疗效分析

目的：分析妇科再造丸联合甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤的临床疗效和安全性。方法：62例子宫肌瘤患者随机分为治疗组和对照组,治疗组共32人,接受妇科再和联合甲基睾丸素片联合治疗,对照组共30人,单纯接受甲基睾丸素片治疗;免疫组织化学法检测治疗组和对照组患者子宫肌瘤PR表达水平;RT-PCR检测治疗组和对照组患者子宫肌瘤Caspase．3mRNA和PRmRNA表达;BC-5500血球分析仪检测HB、RBC、HCT,分析比较两组患者上述指标的差异。结果：治疗组临床疗效有效率为87．5％,对照组临床疗效有效率为53．3％,两组比较有统计学差异（P〈0．05）。两组在治疗后HB、RBC、HCT均较治疗前改善,且治疗组较对照组改善明显,差异有统计学意义（P〈O．01）。治疗组和对照组治疗后PRmRNA的表达程度与治疗前相比,明显下降,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后PRmRNA表达水平与对照组治疗后PRmRNA表达水平相比,有明显差异,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后Caspase-3mKNA的表达程度与治疗前相比,明显增强,具有统计学意义（P〈0．05）;治疗组治疗后Caspase-3mRNA表达水平与对照组治疗后Caspase-3mRNA表达水平相比,有明显差异（P〈0．05）;治疗组和对照组治疗后PR的阳性细胞数目与治疗前相比,显著下降（P〈0．001）;治疗组治疗后PR阳性细胞数目与对照组治疗后PR阳性细胞数目相比,有明显差异（P〈0．05）。结论：妇科再造丸联合甲基睾丸素片优于单独应用甲基睾丸素片治疗子宫肌瘤。