ICR胎鼠成纤维细胞培养方法的优化

目的确定胎鼠成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts,MEF）最优制备方法,为MEF的制备节省时间与原材料。方法取胎鼠组织,采用组织块培养法、胰酶消化培养法、胰酶消后组织块培养法进行分离培养MEF,比较观察MEF纯度、生长速度、细胞形态等指标,筛选最节省时间与原料的一种培养方法。结果组织块培养法所得MEF生长速度慢,细胞体积小,杂细胞少,纯化所需传代次数少。胰酶消化培养法的MEF生长速度快,体积较大,杂细胞数量多,纯化所需传代次数较多。胰酶消化后组织块培养法的消化后组织块的成纤维细胞生长速度介于前两种方法之间,细胞体积和形态与组织块法培养结果相似,杂细胞数量较少,纯化所需传代次数少。结论胰酶消化结合组织块培养法能最大限度的利用材料,在短时间内可制备大量MEF,满足核移植试验与作为饲养层细胞的需求。因此,胰酶消化结合组织块培养法是MEF最优培养方法。     

PMSG和FSH同期发情处理对小鼠子宫、卵巢和输卵管中雌激素α受体分布的影响

目的从雌激素α受体（estrogen receptorα,ERα）的角度探讨孕马血清促性腺激素（pregnant mareserum gonadotropin,PMSG）和促卵泡激素（follicle-stimulating hormone,FSH）处理小鼠的卵巢、输卵管和子宫中,ERα分布是否有显著性差异。方法 10只8周龄母鼠,随机分为处理方式不同的两个组：PMSG组和FSH组,两组均在处理第48小时取其卵巢、输卵管和子宫样固定,采用免疫组织化学法分别观察组织中ERα分布情况。结果免疫组化结果显示,两个处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜的细胞中都有ERα表达;PMSG处理组卵巢中的初级卵泡和成熟卵泡上ERα阳性率和平均吸光度均显著高于FSH处理组;FSH处理组的输卵管中ERα阳性率和平均吸光度均高于PMSG处理组;FSH处理组子宫基质和腺上皮细胞中ERα的阳性率显著高于PMSG组,其中PMSG组基质中的平均吸光度显著高于FSH组,而子宫内膜上皮细胞的阳性率和平均吸光度两处理组间差异无显著性。结论 PMSG和FSH同期发情诱导由于其特性可不同程度地影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中ERα的分布,使之在不同组织中产生差异性变化。     

PMSG或FSH同期发情处理对小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体分布的影响

目的探讨孕马血清促性腺激素（pregnant mare serum gonadotropin,PMSG）和促卵泡激素（folliclestimulating hormone,FSH）同期发情处理的小鼠卵巢、输卵管和子宫中孕激素受体（progesterone receptor,PR）分布的差异。方法 10只8周龄KM系雌鼠,随机分为PMSG和FSH两个组,第一次处理后48 h取其卵巢、输卵管、子宫进行固定,免疫组织化学法观察各组织中PR的分布。结果两组小鼠卵巢、输卵管和子宫内膜中均有PR表达;其中PMSG组初级卵泡、次级卵泡和输卵管的阳性率均显著高于FSH处理组（P〈0.05）;PMSG组各级卵泡的平均吸光度值均显著高于FSH处理组（P〈0.05）;PMSG处理组子宫内膜上皮与腺上皮中的阳性率显著高于FSH组（P〈0.05）,而基质和子宫内膜上皮中的平均吸光度值显著低于FSH组（P〈0.05）。结论 PMSG和FSH同期发情处理不同程度影响小鼠卵巢、输卵管和子宫中PR的表达分布;其中PMSG处理组小鼠卵巢、输卵管和子宫上皮中PR表达普遍显著高于FSH处理组。