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1.
南方鲇碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质的研究   总被引:13,自引:0,他引:13  
用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和Sephacryl S-200柱层析,从南方鲇(Silurus meridionalis Chen)肠粘膜中提取出碱性磷酸酶(AKP)。提纯倍数为39.50倍,比活为68.35μ/mg蛋白,提取酶液经PAGE和SDS-PAGE只呈现一条区带。该酶的分子量为132 140,N末端氨基酸为门冬氨酸,最适pH为10.10,7.5>pH>11.5时不稳定,最  相似文献   

2.
胃癌癌旁肠化上皮酶组织化学研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文应用酶组化方法对60例胃癌癌旁粘膜中47例肠化上皮(78.3%)的破性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、胞嘧啶单核苷酸酶(CMP)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-pase)、焦磷酸硫胺素酶(TPPase)、5-核苷酸酶(SNase)、三磷酸腺苷酶(Mg2+-ATPase,Ca2+-ATPase)和细胞色素氧化酶(CCO)等九种细胞器标志酶进行了定位观察。结果发现肠化上皮吸收细胞上述酶活性均较强,且分布具有极性,杯状细胞酶反应较弱,主要位于细胞基底部。癌旁粘膜肠化阳性率为78.3%,其中ALP阳性的酶完全型肠化和ALP阴性的酶不完全型肠化分别占53.2%,46.8%,两者出现率相近。酶完全型肠化ALP阳性率在胃分化型癌及未分化型癌瘤旁分别占69.2%和33.3%。ALP阳性率在胃分化型及未分化型癌组织内分别为35.5%和0%。提示肠化上皮具有与肠上皮相似的代谢特征,酶完全型肠化和酶不完全型肠化可能是肠化的二种不同的形式,在致癌环境下,二者都有可能转变成癌,其中酶完全型肠化与分化型癌的关系较为密切。  相似文献   

3.
大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用免疫组化技术(ABC法)系统研究了大鼠鼻粘膜9种肽能神经末梢分布的特征,这9种神经肽分别是P物质(substanceP,SP),神经激肽A(neurokininA,NKA),神经激肽B(neurokininB,NKB),降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP),血管活性肠多肽(vasoactiveintestinalpolypeptide,VIP),神经肽Y(neuropeptideY,NPY),甘丙肽(galanin,GAL),生长抑素(somatostatin,SOM)及神经降压素(neurotensin,NT),同时选择与鼻粘膜神经肽(NP)作用密切相关的三叉神经节(TG)细胞进行上述NP的定位。用重组PSP65质粒(400SOMcDNA)制备SOMmRNA单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及TG细胞进行SOMmRNA的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;TG细胞含有多种NP并且可以合成SOM。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。  相似文献   

4.
P物质对大鼠DRG神经元胞体膜的作用   总被引:18,自引:1,他引:17  
本文在大鼠DRG神经元标本上应用细胞内记录,以确定SP对DRG细胞的膜反应及其可能的离子机制。实验所测DRG细胞静息膜电位为-58.9±8.2mV(X±SE,n=81)。传导速度:A_(α/β)细胞为20.4±4.8m/s(X±SE),范围14.1-28.7m/s(47/60);Aδ及C类细胞为9.8±5.2m/s,范围1.2-13.7m/s(13/60)。浴槽滴加SP(10 ̄(-7)-3×10 ̄(-4)mol/L)在大多数细胞可引起明显的膜去极化反应(56/60)。少数细胞对SP无反应(4/60)。在SP去极化期间膜电导值有所增加,从平均值2.72×10 ̄(-8)mho增加24.6%(n=3)。所测逆转电位值在+40-+50mV之间(n=3)。浊流平衡液(BSS)中NaCl以氯化胆碱置代,或用含TTX(10 ̄(-5)mol/L)的BSS灌流,可使SP-去极化幅值大大减小但不能完全消除。而高(20mmol/L)和低(0mmol/L)Ca ̄(2+)的BSS灌流时,使SP-去极化幅值相应的增加和降低。用含10 ̄(-4)mol/LCd ̄(2+)及10 ̄(-2)mol/LTEA的BSS灌流,均使SP-去极化明显减小。  相似文献   

5.
P物质对GABAA和GABAB受体介导的DRG神经元膜反应的调制作用   总被引:10,自引:2,他引:8  
关兵才  李之望 《生理学报》1994,46(5):441-450
实验在幼年大鼠DRG标本上进行。应用细胞内记录观察了SP对GABA反应的调制作用。结果证明:(1)单独滴加SP(5×10(-6)-4×10(-5)mol/L)或浴槽灌流SP(10(-6)-5×10(-6)mol/L)不引起膜电位的改变或仅有轻微的去极化,但却能使GABA引起的去极化反应减小50.8±20.2%(±SD)(20/30);(2)单独滴加SP可使多数受检细胞APD50延长28.7±9.1%(±SD)(10/18);(3)在预加SP后,能使baclofen所引起的APD50缩短效应(20.6±2.9%,±SD)完全消除(4/12)或翻转成APD(50)延长19.3±8.9%(±SD)(8/12);(4)预加GABAB受体激动剂baclofen(10(-4)-10(-3)mol/L)30—90s后明显地抑制muscimol(10-4-10-3mol/L)引起的去极化反应,其抑制效应达54.4±18.8%(±SD)(17/20)。由于DRG神经元的胞体通常可用来作为研究初级传入终末的模型,因而本文实验结果提示:介导伤害性刺激信息的P物质在背角的释放,可能作用于初级传入终末,从而产生对抗GABA介导的突触  相似文献   

6.
本文研究了免疫组织化学方法中碱性磷酸酶(AP)的显色系统。本文以人扁桃体的石蜡切片为材料,以CD20为标记,二抗为生物素标记的兔抗鼠抗体,选择了5种萘酚磷酸(naphtholAS-OLphosphate,naphtholAS-GRphosphate,naphtholAS-TRphosphate,naphtholAS-MXphosphate和naphtholAS-BIphosphate)与9种重氮化合物(fastredTRsalt,fastblackKsalt,fastblueBBsalt,fastbrownRRsalt,fastscarletRsalt,fastbluesaltBN,fastblueB,fastdarkblueRsalt,fastredvioletLBsalt)以及新品红为AP显色底物,相互配伍,根据形成的一系列显色反应,比较研究了不同的底物对。研究结果表明:在5种萘酚磷酸中,naphtholAS-OLphosphate具有良好的显色敏感性,当一抗为1∶1000时,与常用naphtholAS-BIphosphate一样,具有较强的显色反应;该底物还具较好的配伍性,能与新品红和FastBlue  相似文献   

7.
人PSP基因在昆虫细胞中的高效表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用昆虫杆状病毒表达系统(BES)在昆早细胞Tn-5B1-4中高效表达了人persephin(PSP),SDS-PAGE分析表达量占细胞可深性蛋白质的20%左右,表达产物经Ni^2+-NTA树脂亲和层析纯化后纯度达85%以上。活性研究表明,昆早细胞表达的PSP蛋白能显著促进脊髓神经元的存活。  相似文献   

8.
本工作采用分离培养家兔肺内小动脉平滑肌细胞(PASMCs),观察了外源性血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)、BN52021(PAF受体拮抗剂)、吲哚美辛、维拉帕米对PASMCs产生血栓素A_2(TxA_2)、前列环素(PGI_2)及对细胞膜Ca~(2+)-ATPase活力的影响。结果表明:(1)基础状态下PASMCs存在花生四烯酸(AA)代谢。(2)外源性PAF通过受体后途径激活环加氧酶促进AA代谢致TXA_2及PGI-2增加,TXA_2/PGI_2比值无明显变化。(3)外源性PAF能直接抑制Ca~(2+)-ATPase活力。(4)维拉帕米可逆转PAF抑制PASMCs膜Ca~(2+)-ATPase活力的效应。  相似文献   

9.
特异性的肺表面活性物质相关蛋白(SP)包括亲水性的SP-A、SP-D和疏水性的SP-B、SP-C.它们的表达与合成受众多生理、病理因素影响。本文综述了该领域的研究进展。1.SP表达的组织细胞特异性调控:只有肺内某些细胞(肺泡Ⅱ型细胞、Clara细胞等)能合成分泌SP,这可能是由SP基因中特定序列决定的,如SP-B基因的细胞特异性表达的调控成分。2.SP表达的发育期调控:SP基因属发育控制基因家族。在人类妊娠前3mon胎肺中,SP基本不表达:妊娠15-18wk时,气管、支气管上皮细胞即可见SP-B、SP-CmRNAs和表达蛋白,它们可能比SP-A出现早:妊娠19-20wk时可见SP-AmRNA和表达蛋白,胎肺组织在体外无激素条件下培养可很快诱导SP表达,在妊娠后3mon内,各SPmRNAs及其表达蛋白水平与磷脂水平平行升高,也与SP降低表面张力的特性逐渐增强相关,羊水中可检出这些蛋白,板层体的出现与SP-B的表达密切相关,而比SP-A的表达早,胎肺发育过程中SPmRNAs增加至少部分是由于其基因转录率升高,可能同时也与翻译增加有关。3.糖皮质激素对SP表达的调控:糖皮质激素对SP-A表达的调控极复杂,且与剂量  相似文献   

10.
本文分别对草鱼性成熟前、后垂体STH细胞进行了组织化学和超微结构研究。垂体STH细胞多位于中腺垂体中部和背部,为嗜酸性细胞,用PMB(PAS-MB)和APG(AB-PAS-OG)两种组织化学方法染色,对橙黄G阳性,对PAS、AB阴性;电镜下电子密度较高,内质网绕核呈环形,分泌颗粒多而小。  相似文献   

11.
通过对长吻(Leiocasislongirostris)、南方大口鲶(Silurusmeridionalis)胃、肠道所作大体解剖观察对比、粘膜扫描电镜观察、蛋白酶和淀粉酶活力测定等的研究结果表明,南方大口鲶的胃壁和胃粘膜皱褶非常发达,其伸缩能力远强于长吻。但长吻的胃、肠粘膜的分泌功能较南方大口鲶强,其蛋白酶和淀粉酶活力强于相近体重的南方大口鲶。南方大口鲶的发达的胃壁作用可能在于有较强的伸张能力以便一次性地食贮较多或较大个体食物,并在胃内进行初步消化。总体评价,长吻一次性的摄食能力不如南方大口鲶,但对同种食物的消化能力强于相近或相同体重的南方大口鲶。南方大口鲶胃、肠道消化生理特点适于一次捕食较大个体食物,具间歇性摄食的消化生理特点。而长吻则适于以较高摄食频率和对食物较强的消化利用率以适应营养的需要。  相似文献   

12.
兰州鲇与鲇消化系统的形态学及组织学比较研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为探究黄河濒危鱼类兰州鲇(Silurus lanzhouensis)消化系统的形态学和组织学结构特点,以鲇(Silurus asotus)为对照,对兰州鲇消化系统形态学和组织学进行了深入研究。结果表明:(1)兰州鲇与鲇的消化道和消化腺形态相似,具有肉食性鱼类的特征。兰州鲇消化道较短,有发达的“U”型胃,胃内皱褶明显,无幽门盲囊,肠道短且粗,可分为前肠、中肠和后肠三部分,前肠粗大,后肠较细。两种鲇属鱼类都有独立致密的肝脏和胰脏。(2)兰州鲇的比肠长显著大于鲇(P < 0.05),比胃重、比肝胰脏重显著低于鲇(P < 0.05),但二者的比肠重无显著性差异(P>0.05)。(3)兰州鲇胃的皱襞幅度小于鲇,且环肌层比兰州鲇薄。兰州鲇与鲇前肠的肠黏膜均形成了大量皱襞,肠黏膜、褶皱粗大,但鲇的褶皱分支较细密。兰州鲇与鲇的后肠与前肠相比,肠腔变小,褶皱数量明显减少,高度降低。黏膜层分布有杯状细胞和柱状细胞。兰州鲇与鲇的肝脏肝小叶间缺少结缔组织,分界不明显,而兰州鲇肝细胞的密度大于鲇。综上所述,兰州鲇与鲇的消化系统相似,均符合肉食性鱼类消化系统特征,结合消化生理等研究结果,表明兰州鲇的消化能力弱于鲇,这可能是在自然情况下兰州鲇的分布区域及适应性不及鲇的原因之一。  相似文献   

13.
大口鲶外周血细胞的结构和组化反应的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
用光镜和电镜观察大口鲶外周血细胞的形态结构、过氧化物酶和糖原在血细胞内的分布。结果表明在大口鲶外周血细胞中可区分出红细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性白细胞和血栓细胞。在血涂片和超薄切片上都没发现嗜酸细胞和嗜硷细胞。描述了各种血细胞在光、电镜观察下的形态结构和组化反应。  相似文献   

14.
采用PEG沉淀结合Sepharose-4B柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为77 kD和27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了4个南方鲇免疫球蛋白特异性的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体亚级份测定,其中IgG1有2株,IgG2a有1株,IgG2b有1株;抗体滴度为104—106,有三株单抗具有Western-blot反应特性,识别南方鲇免疫球蛋白的重链。4株单抗都能特异地识别南方鲇、鲇的免疫球蛋白,而与鲫、草鱼、罗非鱼、斑点叉尾、光泽黄颡鱼血清以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体F4-A12对纯化的南方鲇免疫球蛋白的检测灵敏度为31 ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于南方鲇免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景。  相似文献   

15.
The size and functional capacity of the gastrointestinal (GI) tract and associated organs vary in response to environmental cues. The GI tract and associated organs are also very metabolically active in animals. Hence, animals may reduce the size and function of their GI tract to conserve energy when deprived of food. The main aims of this study were to investigate how Silurus meridionalis regulates the function and structure of its GI tract and associated organs during starvation. Starvation induced a decrease in both maintenance metabolism (MO(2rest), decreased by approximately 50%) and respiratory frequency (indicated by double side gill activity and notated as f(R), decreased by 29%). Lipase, trypsin and aminopeptidase-A showed a similar reduction in mass-specific activities during starvation, but pepsin and α-amylase did not. The starvation of experimental fish resulted in a significant reduction in body weight, the wet mass of the liver and the digestive-somatic system, the hepato-somatic index and the condition factor whereas the wet masses of the GI tract, pancreas, gall bladder and the relative intestinal length did not vary significantly during starvation. The reduction in liver wet mass was the main reason for the decrease in the wet mass of digestive-somatic system in this species. Only the mucosal area of the PI was affected significantly by starvation, decreasing by 34% at the end of the experiment. S. meridionalis displayed a decreasing intestinal mucosal area towards the distal intestine, and this gradient was not affected by starvation. The morphology and structure of both the GI tract and the liver were greatly down-regulated, as indicated by decreases in liver cell size, the mucosal thickness of the stomach and intestine, the density of goblet cells and microvilli surface area (MVSA), implying that food deprivation greatly impaired the digestive and absorptive functions of the GI tract in S. meridionalis. When deprived of food, S. meridionalis can endure harsh periods of starvation and adaptively down-regulate the function and structure of the digestive tract with physiological and biochemical strategies.  相似文献   

16.
南方鲇头肾的组织学和超微结构   总被引:7,自引:0,他引:7  
采用解剖学、组织学、组织化学方法,通过电镜观察,研究了南方鲇(Silurus meridionulis Chen)头肾的形态和超微结构。南方鲇左右头肾不相连,与肾明显分离。头肾组织包括血管系统、淋巴细胞聚集区、粒细胞聚集区、内分泌组织区。血管系统由头肾动脉、头肾静脉、后主静脉及其分枝所组成。淋巴区细胞染色深,紧密聚集成网状结构,主要包括大、小淋巴细胞等细胞类型。粒细胞区域狭窄,染色浅,主要为粒细胞聚集。内分泌组织区域细胞大型,常规染色极浅,包括肾间组织细胞、肾上组织细胞。肾间组织细胞有丰富的线粒体、内质网及分泌颗粒。肾上组织细胞主要分布于后主静脉及其分枝的周围、静脉壁中,细胞中有密集的分泌颗粒。肾上组织细胞和肾间组织细胞集中于头肾,内分泌功能增强,是与其运动能力强、快速捕食相适应的特征。  相似文献   

17.
利用解剖、HE和AB-PAS染色技术研究了菲牛蛭消化系统的形态结构及组织化学特征。结果表明, 菲牛蛭消化系统由消化管和单细胞唾液腺组成。消化管包括口、咽、食道、嗉囊、肠、直肠和肛门。口开孔于前吸盘腹中部, 口腔内有3片呈三角形排列的颚片, 颚片由辐射肌和横纹肌构成, 其脊上具单列细齿, 可切开寄主皮肤。单细胞唾液腺开口于颚片两侧的乳突上, 可分泌蛭素; 咽呈短球形, 由黏膜层、肌层和外膜构成,肌层发达; 食道短而窄, 黏膜层见少量杯状细胞和大量嗜酸性颗粒; 嗉囊两侧有10对侧盲囊, 最后一对侧盲囊最长且延伸至肛门两侧; 肠部尚无明显分化, 可细分为肠和直肠。肠前段腔内有多个盲囊状的细管, 形成 肠内盲囊, 黏膜层具较多腺细胞, 黏膜下层发达, 具丰富的血管和淋巴细胞; 直肠肠腔明显大于肠的肠腔, 褶皱高度明显比肠的低, 上皮细胞间可见少量杯状细胞。AB-PAS染色结果显示菲牛蛭消化管黏液细胞有4种类型: Ⅰ型被染成红色, Ⅱ型被染成蓝色, Ⅲ型染成紫红色, Ⅳ型染成蓝紫色。口腔部黏液细胞分布以Ⅳ型和Ⅲ型为主, 少量Ⅱ型与Ⅰ型黏液细胞, 咽部以Ⅲ型为主, 食道、嗉囊、肠前部以及直肠壁均无酸性和中性黏液细胞存在, 肠中后部以Ⅰ型为主, 肛门壁存在大量的Ⅱ型黏液细胞。讨论了菲牛蛭消化管结构特点与食性的关系等问题, 发现肠是菲牛蛭整个消化管最主要的消化和吸收场所, 且消化管特殊的结构特征决定了菲牛蛭主要以血液作为食物来源。  相似文献   

18.
南方鲶卵巢滤泡细胞和卵膜生成的组织学研究   总被引:18,自引:0,他引:18  
南方鲶的卵巢滤泡细胞源于卵巢基质细胞,从发生到退化分为零散卵泡膜细胞期、单层扁平泡膜细胞期、多层扁平卵泡膜细胞期、立方形颗粒细胞期柱状颗粒细胞期、颗粒细胞分泌期和颗粒细胞退化期。精孔细胞中发育中滤泡细胞分化形成。初级卵精源于卵母细胞,次级卵膜由晚期滤泡细胞分泌形成。本文还对滤泡细胞和卵膜的作用进行了阐述。  相似文献   

19.
Mitochondrial genome of Silurus asotus (Teleostei: Siluriformes)   总被引:1,自引:0,他引:1  
Zeng Q  Wang Z  Peng Z 《Mitochondrial DNA》2011,22(5-6):162-164
The complete mitogenome sequence of the Amur catfish Silurus asotus was determined using long PCRs. The genome was 16,528 bp in length and contained 13 protein-coding genes, 2 rRNA genes, 22 tRNA genes, and 1 control region; the gene composition and order of which was similar to most other vertebrates. The overall base composition of the heavy strand is 30.5% A, 25.8% T, 28.0% C, and 15.8% G, with an AT content of 56.3%. The mtDNA sequence of S. asotus shared 93.6% and 90.6% sequence identity with that of Silurus meridionalis and Silurus glanis. This mitogenome sequence data would play an important role in silurid catfish phylogenetics and siluriform catfish systematics in general.  相似文献   

20.
不同蛋白含量饲料对南方鲇胃蛋白酶和淀粉酶活性的影响   总被引:12,自引:0,他引:12  
为探讨营养、饲料与鱼类消化酶之间的相互作用,采用蛋白含量分别为44.8%、29.1%和13.3%的饲料饲养南方鲇(Silurus meridionalis),并在第0d、15d、25d和50d对胰脏、胃黏膜、前肠黏膜和后肠黏膜的胃蛋白酶(酸性蛋白酶)和淀粉酶活性进行了动态分析。结果显示:1)饲料中蛋白含量为29.1%—44.8%时南方鲇的生长速度显快于低蛋白含量饲料(13.3%);2)在实验后期(25d后),中等蛋白含量饲料组南方鲇的生长速度比其他两组快,此阶段该组鱼胃黏膜的胃蛋白酶活性呈上升趋势,而另两组该酶活性则呈下降趋势;低蛋白饲料组前肠黏膜和后肠黏膜的淀粉酶活性在实验后期急剧下降,与该组鱼的生长最慢相关联;3)在实验的50d内,不同蛋白含量饲料对胃蛋白酶和淀粉酶活性在各组织器官中的分布特征影响不大。实验期间,南方鲇消化器官中这两种消化酶活性的变化情况表明,在实验的不同阶段,饲料中的蛋白含量对南方鲇胃蛋白酶和淀粉酶的合成、分泌和活性大小的影响是不同的。  相似文献   

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