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螯合剂对原生质体融合的影响 总被引:10,自引:0,他引:10
螯合剂对原生质体融合的影响王建华(中国农业科学院饲料研究所北京100081)赵学慧(华中农业大学食品微生物学研究室武汉430070)自从Kao[1]发现聚乙二醇(PEG)能高效介导植物原生质体融合以来,至今它仍不失其作为植物、微生物原生质体促融合剂的... 相似文献
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基因组对芸苔属作物原生质体培养及植株再生的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
本文以包心菜、芜菁油菜、浙油601的无菌苗叶肉原生质体为材料,经不同液体培养基浅层培养,细胞分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经增殖后,转到分化培养基上诱导分化,均获得了再生植株。本文着重研究了植物基因组对原生质体分裂频率及植株再生的影响。研究结果表明:(1)植物基因组对原生质体分裂频率的影响随原生质体培养基的不同而异;(2)植物基因组对原生质体再生植株影响显著,芜菁油菜的A基因组不利于原生质体再生植株 相似文献
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日本Yamagata大学的科学家T.Wngatsuma及其同事描述了一种从铝-耐受和铝-敏感植物细胞混合物中收集耐铝植物细胞的新技术。基于以前发现耐铝品种的原生质体比铝-敏感品种的原生质体质膜表面的负电荷少,Wagatsutma小组用新准备的带正电的二氧化硅小珠与来源于水稻(Al-耐受),玉米(中等Al-耐受)或豌豆(Al-敏感)根细胞的纯化原生质体混合,然后以一个Ficoll不连续梯度高心混合物。他们从离心管底部级分得到来自铝-耐受植物(水稻)的原生质体,从上部级分得到来自铝-敏感植物(豌豆)… 相似文献
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被子植物配子-体细胞杂交研究的进展与展望 总被引:3,自引:0,他引:3
Pental和Power于1985年提出用植物的单倍体原生质体,与二倍体体细胞原生质体融合产生三倍体植株,以用于限量基因转移研究的设想"'。次年粘毛烟草(Nicotianaglutinosa川、抱子四分体原生质体与烟草(N.tatacum)的体细胞原生质体融合,就成功地得到了三倍体杂种植株,并被称 相似文献
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甘蔗和烟草叶原生质体分离期间的膜损伤及有关酶活性变化何若天,覃伟,李任强(广西农业大学实验中心,南宁530005)关键词:原生质体,超氧阴离子自由基(O_2~-),膜损伤,甘蔗,烟草植物原生质体分离期间,所用细胞壁降解酶和高渗介质等对细胞生理有深刻影响... 相似文献
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三种植物花粉原生质体的大量分离与初步培养 总被引:2,自引:0,他引:2
周嫦 《植物学报(英文版)》1988,30(4):362-367
利用花粉水合导致外壁破裂,使内壁得以酶解,分离出鸢尾(Iris tectorum Maxim),风雨花(Zephyranthes grandiflora Lindl)和萱草(Hemerocallis fulva L.)三种植物成熟花粉的原生质体。初步分离出萱草四分体至成熟花粉(单核早期除外)各时期的原生质体,经过纯化处理,获得较纯净的有生活力的原生质体群体,萱草花粉原生质体的培养实现了细胞壁再生,管状及其它多种结构的形成以及生殖核的一、二次分裂。 相似文献
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三种植物花粉原生质体的大量分离与初步培养 总被引:12,自引:0,他引:12
周嫦 《Acta Botanica Sinica》1988,30(4):362-367
利用花粉水合导致外壁破裂,使内壁得以酶解,分离出鸢尾(Iris tectorum Maxim),风雨花(Zephyranthes grandiflora Lindl)和萱草(Hemerocallis fulva L.)三种植物成熟花粉的原生质体。初步分离出萱草四分体至成熟花粉(单核早期除外)各时期的原生质体,经过纯化处理,获得较纯净的有生活力的原生质体群体,萱草花粉原生质体的培养实现了细胞壁再生,管状及其它多种结构的形成以及生殖核的一、二次分裂。 相似文献
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包括许多重要粮食和饲料作物在内的豆科植物的体细胞杂交研究已有20多年历史。早在70年代,Kao等[15]即利用豌豆、大豆原生质体与其它植物原生质体进行融合,观察到可以分裂的大豆(+)豌豆、玉米(+)大豆、小麦(+)大豆异核体,大麦和大豆融合细胞最后形成细胞团,同时指出核融合发生在融合后的第一次分裂过程中。1974年,Kartha等[16]将大豆(Glycinemax)悬浮培养细胞原生质体与油菜原生质体融合,也得到细胞团。1976年,Constabel等[10]得到了大豆悬浮培养细胞与豌豆、Viciahajastana(一种野豌豆)、烟草、番红花叶肉细胞原生质… 相似文献
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天蓝苜蓿原生质体培养再生植株 总被引:9,自引:1,他引:8
苜蓿属(Medicago)植物多为优质牧草,是进行原生质体培养研究较多的一个属。至今已有10余种苜蓿属植物进行过原生质体培养的研究,多数获得了再生植株[1~6]。天蓝苜蓿是一种优质牧草、绿肥和药用植物。关于它的体外培养已有一些报道[5,7,8],但原生质体培养尚未能再生植株。本文以悬浮系为材料进行了原生质体的分离与培养,并经胚状体发生和器官发生两种途径获得了再生植株。1 材料和方法天蓝苜蓿(MedicagolupulinaL.)种子采集于吉林省西部草原。干种子用浓硫酸浸泡3min,升汞灭菌5mi… 相似文献
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用聚乙二醇诱导选定的成对原生质体间的融合 总被引:6,自引:0,他引:6
用微吸管选取单对原生质体,在含聚乙二醇(PEG)的微滴中诱导融合。此法克服了常规的PEG群体融合方法中的盲目性,能排除一方亲本原生质体自相融合和多个原生质体的融合,以及未融合的原生质体的混杂,保证融合产物来自选定的成对原生质体,从而使PEG融合技术精确化。此法在植物细胞工程和细胞生物学研究中有广泛的应用前景 相似文献
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PEG法介导转化诸葛菜下胚轴原生质体获得转基因植株 总被引:3,自引:0,他引:3
采用诸葛菜无菌苗的下胚轴组织为材料,分离原生质体,在原生质体培养基中作液体浅层暗培养,植板率为5%,植株再生频率为100%。作者进而开展了遗传转化研究。为研究PEG介导转化诸葛菜原生质体的影响因素,通过瞬间表达,实验了PEG法转化子叶原生质体的过程,在此基础上将分离纯化后的原生质体与带HPT基因的质粒DNA(pBI222)混合,HPT基因作选择标记,PEG介导转化;重新收集转化后的原生质体,以5×104/ml的密度在原生质体培养基中作浅层培养;培养10—15天后用25mg/L的潮霉素(hygromycin)进行筛选,一月后出现少量细胞团,转入含潮霉素50mg/L的扩增培养基扩增愈伤组织,进而转入含50—100mg/L潮霉素的分化培养基诱导分化成苗,分化率为100%,转入生根培养基中生根成完整植株。抗性植株再生率为4×10(-5)。在获得再生转基因植株后,以再生植株叶片为材料,进行Southernblot分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中并表达,再生转基因植株频率为10(-5)。国内外首次转化诸葛菜属植物原生质体获得成功。 相似文献
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红光和Ca~(2 )对与绿豆下胚轴伸长有关的细胞壁酶的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
作为去黄化过程中的一个反应——植物茎伸长受光抑制的现象,已有不少研究。人们发现,胚轴长度受光的调节,对红光尤其敏感(lion1982)。红光抑制绿豆下胚轴切段伸长(王小菩和潘瑞炽1990),却促进绿豆下胚轴原生质体膨大,钙在此过程中起第二信使的作用(龙程等1994a,b),但红光促进原生质体膨大却抑制切段伸长的机理尚不清楚。我们认为问题的症结可能在细胞壁,因为植物细胞的生长(伸长和扩大)在很大程度上取决于细胞壁的松弛和伸展。植物细胞只有当细胞壁酶作用于细胞壁使之松弛时,才能在膨压的作用下吸水长大(Taiz1984)。因… 相似文献
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从发根农杆菌A4转化的荒漠植物—璐驼刺毛状根愈伤组织中分离的原生质体培养的结果表明,酶解新转代7~10d的淡黄色松软愈伤组织,可获得大量有活力的原生质体。原生质体在附加有1.5mg.L-1 2,4.D、0.2mg.L-1 6.BA、0.3m01.L-1甘露醇、2%(W/V)蔗糖和500mg·L-1水解酪蛋白的DPD培养基中进行液体浅层培养可持续分裂。培养基的最适渗透压为(450±3)mOsm·kg-1,原生质体的最适植板密度为4×10^5个.mL-1。制备原生质体的愈伤组织以低温(4℃)预处理后,原生质体的产率和分裂频率均提高,分裂频率最高可达50%。原生质体分裂形成的愈伤组织转移在附加1-2mg.L-1 6-BA(或KT)和0.2mg·L-1NAA的MS培养基上培养后,可以分化并获得再生植株。纸电泳检测表明,原生质体再生的愈伤组织和分化植株仍然含有毛状根转化系的特异产物——冠瘿碱。 相似文献
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彗星电泳法在植物原生质体凋亡检测中的应用 总被引:10,自引:0,他引:10
应用中性法彗星电泳检测烟草(NicotianatabacumL.)原生质体的凋亡。结果表明,彗星发生的百分率(彗星率)和发生核质固缩及“核着边”(凋亡形态学标志)的细胞的百分率之间存在明确的相关性。利用标准的细胞凋亡检测手段,包括DNAladdering及核糖核酸末端转移酶介导的biotindUTP缺口末端标记(TUNEL),都证明这种彗星电泳法可以用来比较精确地检测植物原生质体的凋亡。 相似文献
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菊科植物原生质体研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
介绍了目前菊科植物原生质体研究进展,重点对菊科植物原生质体分离、培养、影响原生质体再生的因素、原生质体再生植株的变异、原生质体的应用等方面的研究工作进行了总结,提出了存在的问题和今后的工作重点。 相似文献