花烟草原生质体的再生植株1)

花烟草（Nicotiana alata Link Otto）由于其 有明显的形态特点以及含有2n - 18个染色体 的细胞学特征易区别于普通烟草（2n=48)。这 种野生的烟草是组织培养及细胞杂交中的一个 有用材料。Bourgin, P.^[2]曾由此种烟草的单倍 体叶肉原生质体培养出再生植株,但其倍性变 化较多。我们选用N. alata的二倍体叶肉原生 质体进行分化培养,获得大量稳定的二倍体再 生植株。     

花烟草原生质体的再生植株

花烟草(Nicotiana alata Link Otto)由于其有明显的形态特点以及含有2n=18个染色体的细胞学特征易区别于普通烟草(2n=48)。这种野生的烟草是组织培养及细胞杂交中的一个有用材料。Bourgin,P.曾由此种烟草的单倍体叶肉原生质体培养出再生植株,但其倍性变     

豆科植物原生质体培养再生植株名录

自1980年Kao和Michayluk首次获得豆科苜蓿的第一棵原生质体培养再生植株后,到1989年为止,据报道已在11属25个物种中取得了成功。此后又有小豆、豌豆、多年生野生大豆、刀豆等相继成功地获得原生质体再生植株。现将豆科植物原生质体再生植株成功的物种、取材组织及再生途径归纳如表,供参考。     

澳洲指橘与柑橘属间原生质体电融合再生二倍体体细胞杂种

电场诱导粗柠檬（CitrusjambhiriLush,2n＝2x＝18）叶肉原生质体与澳洲指橘（MicrocitruspapuanaSwingle,2n＝2x＝18）悬浮系原生质体融合,融合产物培养后再生出丛芽,经试管嫁接得到完整植株。再生植株的细胞学检查表明它们具有18条染色体,为二倍体;植株的叶片形态与叶肉亲本（粗柠檬）一样;用6个10-mer随机引物分析再生植株的杂种特性：在4个引物（OPA－07、OPAN－07、OPE－05和OPA－08）的扩增带型图中,再生植株的带型与粗柠檬完全一样,澳洲指橘的特征带未在植株中出现;在引物OPS-13和引物OPA－04的扩增带型图中,再生植株都具有澳洲指橘的特征带。细胞学和RAPD分析的结果表明,通过对称融合得到了澳洲指橘与粗柠檬的属间二倍体体细胞杂种植株。这是柑橘属间对称融合再生二倍体叶肉亲本类型植株的首例报道。     

甘薯同一不亲和群内品种间体细胞杂种

利用PEG融合方法,融合甘薯(Ipomoea batatas ) B不亲和群内品种‘koganesengan’和‘bitambi’的原生质体。将融合处理的原生质体进行培养,共获得45株再生植株。4株再生植株形态上表现出融合双亲的中间特性,其中2株染色体数为融合两亲之和（2n = 12x (2n + 2n) = 180）,另外2株分别为41～103和35～100,因细胞不同而不同。经RAPD分析,这4株再生植株分别具有双亲特异的DNA扩增带或双亲都不具有的新扩增带。鉴定这4株再生植株为杂交不亲和的B群内品种间体细胞杂种。     

PEG法介导转化诸葛菜下胚轴原生质体获得转基因植株

采用诸葛菜无菌苗的下胚轴组织为材料,分离原生质体,在原生质体培养基中作液体浅层暗培养,植板率为５％,植株再生频率为１００％。作者进而开展了遗传转化研究。为研究ＰＥＧ介导转化诸葛菜原生质体的影响因素,通过瞬间表达,实验了ＰＥＧ法转化子叶原生质体的过程,在此基础上将分离纯化后的原生质体与带ＨＰＴ基因的质粒ＤＮＡ（ｐＢＩ２２２）混合,ＨＰＴ基因作选择标记,ＰＥＧ介导转化;重新收集转化后的原生质体,以５×１０４／ｍｌ的密度在原生质体培养基中作浅层培养;培养１０—１５天后用２５ｍｇ／Ｌ的潮霉素（ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ）进行筛选,一月后出现少量细胞团,转入含潮霉素５０ｍｇ／Ｌ的扩增培养基扩增愈伤组织,进而转入含５０—１００ｍｇ／Ｌ潮霉素的分化培养基诱导分化成苗,分化率为１００％,转入生根培养基中生根成完整植株。抗性植株再生率为４×１０（－５）。在获得再生转基因植株后,以再生植株叶片为材料,进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交,证实外源基因已稳定整合到植物基因组中并表达,再生转基因植株频率为１０（－５）。国内外首次转化诸葛菜属植物原生质体获得成功。     

从水稻原生质体再生小植株

水稻原生质体培养方面的工作很多。大多数实验是用已分化的细胞可以诱导第一次分裂,甚至小细胞团和形成愈伤组织。但是,迄今为止未见水稻原生质表1 a.愈伤组织年龄对于原生质体得率的影响。b.原生质体的发育。c.三次实验的再生率。体培养,再生成植株的成功报告。用水稻栽培品种“Moroberekan”灭菌后接种在经修改的 MS 固体培养基上,2,4-D(2 mg/l),     

被子植物配子-体细胞杂交研究的进展与展望

Pental和Power于1985年提出用植物的单倍体原生质体,与二倍体体细胞原生质体融合产生三倍体植株,以用于限量基因转移研究的设想"'。次年粘毛烟草（Nicotianaglutinosa川、抱子四分体原生质体与烟草（N．tatacum）的体细胞原生质体融合,就成功地得到了三倍体杂种植株,并被称     

基因组对芸苔属作物原生质体培养及植株再生的影响

本文以包心菜、芜菁油菜、浙油６０１的无菌苗叶肉原生质体为材料,经不同液体培养基浅层培养,细胞分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经增殖后,转到分化培养基上诱导分化,均获得了再生植株。本文着重研究了植物基因组对原生质体分裂频率及植株再生的影响。研究结果表明：（１）植物基因组对原生质体分裂频率的影响随原生质体培养基的不同而异;（２）植物基因组对原生质体再生植株影响显著,芜菁油菜的Ａ基因组不利于原生质体再生植株     

水稻与大黍不对称休细胞杂交再生植株

采用ＰＥＧ（聚乙二醇）融合法,诱诱导水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）原生质体与无融合生殖大黍（Ｐａｎｉｃｕｍ ｍａｘｉｍｕｍ Ｊａｃｑ．）原生质体融合,经过融合体筛选、培养,成功地获得了再生植株并移栽成活。在融合前水稻原生质体经过２．５ｍｍｏｌ／Ｌ碘乙酰胺（ＩＯＡ）在室温（２２－２５℃）条件下处理１５ｍｉｎ,大黍原生质体经过６０Ｋｒ软Ｘ射线照射处理。对获得的２８株融合再生植株进行初步检测发现     

利用原生质体融合获得普通烟草与黄花烟草种间体细胞杂种植株

我们在高国楠方法的基础上,进一步改良。 使用培养皿沉降法,使人工有性杂交很少成功 的普通烟草（Nicotiana. tabacum）和黄花烟草 (N. rustica）的原生质体融合成功。融合处理后 共得到四十三株再生植株。目前（b月23日） 已开花的有7株。其中两株与“亲本”之一普通 烟草品种CYNo.4 (Copus Yeusuheku No.4）的株 型、叶型、花型、花色无差别。推测可能是没有 产生融合的普通烟草CY No. 4的原生质体再生 植株。另外一株从株型、叶型、花型均相似于普 通烟草CY No. 4,但是花色为粉红。估计可能是 普通烟草和黄花烟草两个种的原生质体发生了 部分融合的结果。其余四株,从株型、叶型、花型、花色都介于两“亲本”之间。黄花烟草的叶 型为卵圆型,有叶柄。普通烟草为长卵圆型,有 叶托无叶柄,而这四株的叶型虽近似黄花烟草, 但无叶柄也无叶托,而且叶缘也不整齐（图1)o 从花型来看也是两“亲本”的中间型：花冠小 于普通烟草而大于黄花烟草（图2)。普通烟草 CYNo.4的花色为深红色,黄花烟草为黄绿色。 而这四株花色为淡紫色。明显地与“两亲”本不 同。推测这四株是普通烟草（N. tabacum）和黄 花烟草（N. rustica)的种间体细胞杂种。 过氧化物酶同功酶的初步鉴定,支持了上 述看法。进一步的观察和研究正在进行中。     

小叶旱烟(Nicotiana rustica)茎愈伤组织的原生质体再生成完整植株的研究

用纤维素酶成功地从小叶旱烟茎愈伤组织中分离出了大量具有活力的原生质体。在所确定的培养条件下,由原生质体培养出了愈伤组织,并发育成完整植株。同时,对IAA、α-NAA和激动素在原生质体再生成完整植株中的作用进行了研究。     

运用生物技术开展水稻育种

近年来,许多学者报道水稻原生质体培养成功并获得其再生植株。这一成就必然打破水稻育种与发展中的生物技术之间的隔墙。本文将介绍这些技术是如何发展的,以及这些技术将如何有助于推动水稻育种。水稻原生质体培养和植株再生许多学者用培养的水稻细胞,能容易地分离得到原生质体,并成功地使分离的原生质体经培养、壁再生、细胞分裂而再生成植株。在此研究中,用于分离原生质体的愈伤组织或悬浮细胞的质量极为重要,因为水稻原生质体的分离和培养     

烟草原生质体再生的愈伤组织与冠瘿组织分化的比较

普通烟草(Nicotiana tabacum L.)原生质体培养成植株的研究国内外已有不少报道。我们研究了红花大金元品种的烟草叶肉原生质体培养成植株的条件,并考虑到由根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)诱导的烟草冠瘿及其畸胎瘤与正常细胞有显著差别,它们在不加任何激素的培养基上细胞能继续分裂,增殖。如果冠瘿及畸胎瘤组织与原生质体再生的愈伤组织在分化芽和根方面也有差别,那末,利用它与正常细胞融合后,有可能提供更多的筛选杂种的条件,我们对这两种细胞在同样条件下分化芽和根的情况作了比较研究。     

烟草叶肉原生质体快速再生植株的简易方法

本文介绍了培养烟草叶肉原生质体快速再生完整植株的简易方法。用及时调整培养基中的植物激素使愈伤组织阶段缩短,游离的原生质体能在6—8周内发育成形态正常的完整植株。     

烟草试管

几德明等闭曾用嫁接方法获得茄子品种间 无忆绮扮种,Car'.son[61首次用原生质体融合方法 获得粉蓝烟草与郎氏烟草种间体细胞杂种。我 们试rw一种简易获得体细胞杂种（即无性杂种） 方法,即将不同品种烟草茎段进行无菌操作嫁 接,然后取嫁接愈合具有两种组织的茎段离体 培养再生植株,从中获得了具有两亲本特性的 无忆杂种再生植株。我们暂称此方法为“植物 试管无性杂交”。     

马铃薯细胞融合研究的现状

<正> 自1968年大量分离和培养烟草原生质体成功以来,对马铃薯(Solanum tuberosum L.)也试验了原生质体培养,但据说再分化是非常困难的。可是,随着培养技术有了新进展和认识到马铃薯是欧美的重要作物而加强研究,再分化已成为可能。1977年以来,从马铃薯原生质体再生植物体的成功例子已不断有所报道。1978年Melchers等报道了不可能有性杂交的马     

近年来水稻、大豆、玉米原生质体成株与水稻基因工程研究的重要突破

水稻、大豆、玉米、甘蔗原生质体成株的进展单个细胞成株在某些双子叶植物如烟草、矮牵牛、番茄等植物中早已实现,而禾谷类单子叶植物如水稻、玉米、甘蔗等和豆类双子植物如大豆等单个细胞成株都有相当的困难,但近几年来已取得重要进展。大豆,单个细胞成株1985年已有报道,植株能开花结荚。我国吉林农业科学院诱导大豆原生质体获得愈伤组织和根的分化,大豆与豌豆融合体也获得愈伤组织,但未获得再生苗。最近,中国科学院上海植物生理研究所已将大豆原生质体培育成再生植株,为大豆品种改良     

小麦体细胞杂交研究进展

小麦细胞融合的研究开展较晚,但近年来,由于小麦原生质体培养及植株再生技术的突破,已成功获得小麦与４种近缘间禾草不对称体细胞杂种再生植株及多个物种的杂种细胞系。     

天蓝苜蓿原生质体培养再生植株

苜蓿属（Ｍｅｄｉｃａｇｏ）植物多为优质牧草,是进行原生质体培养研究较多的一个属。至今已有１０余种苜蓿属植物进行过原生质体培养的研究,多数获得了再生植株［１～６］。天蓝苜蓿是一种优质牧草、绿肥和药用植物。关于它的体外培养已有一些报道［５,７,８］,但原生质体培养尚未能再生植株。本文以悬浮系为材料进行了原生质体的分离与培养,并经胚状体发生和器官发生两种途径获得了再生植株。１　材料和方法天蓝苜蓿（ＭｅｄｉｃａｇｏｌｕｐｕｌｉｎａＬ．）种子采集于吉林省西部草原。干种子用浓硫酸浸泡３ｍｉｎ,升汞灭菌５ｍｉ…