非遗传性老年痴呆的动物模型及行为学,病理学改变

通过毁损Ｗｉｓｔａｒ大鼠迈内特基底核（ｎｂＭ）建立非遗传性老年痴呆（ＡＤ）动物模型。用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫、六胺银染色、ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ（ＡＣｈＥ）细胞化学、β淀粉蛋白（βＡＰ）和τ蛋白免疫细胞化学及超微结构观察等方法进行行为学及病理学变化研究。结果证明：毁损ｎｂＭ鼠学习、记忆能力下降,乙酰胆碱酯酶ＡＣｈＥ锐减,βＡＰ和τ蛋白样免疫神经元增加,细胞水胞、溶解,溶酶体、微管增加     

大鼠内侧隔核、斜角带中NOS与ChAT、NGF-R、AChE的共存神经元

用酶组织化学和免疫组织化学双标技术,观察了正常ＳＤ大鼠基底前脑内侧隔核（ＭＳ）、斜角带垂直支（ＶＤＢ）和水平支（ＨＤＢ）中ＮＯＳ阳性神经元的形态和分布及ＮＯＳ与胆碱能神经元标志物ＣｈＡＴ、ＮＧＦ受体（ＮＧＦ－Ｒ）和ＡＣｈＥ之间的共存关系。结果发现,ＭＳ、ＶＤＢ和ＨＤＢ的头端ＮＯＳ阳性神经元较多、胞体较大、突起多,尾端ＮＯＳ阳性神经元数目较少、胞体较小、突起少而短。ＮＯＳ＋ＣｈＡＴ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９０％,占ＣｈＡＴ阳性神经元总数的３９％;ＮＯＳ＋ＮＧＦ－Ｒ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的８３％,占ＮＧＦ－Ｒ阳性神经元总数的４０％;ＮＯＳ＋ＡＣｈＥ双标神经元占ＮＯＳ阳性神经元总数的９６％,占ＡＣｈＥ阳性神经元总数的３９％。这些结果为研究Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓｄｉｓｅａｓｅ病理过程中基底前脑隔区胆碱能神经元退变与ＮＯ的关系提供了形态学依据。     

蜜蜂脑中5—HT，GABA，Ach免疫反应阳性神经元分布的比较研究

通过免疫细胞化学方法－ＰＡＰ法,研究了中华峰（Ａｐｉｓｓｉｎｅｎｓｉｓ）和意大利峰（ＡｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａＬ）脑和视叶中乙酰胆碱（Ａｃｈ）、５－羟色胺（５－ＨＴ）、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫反应阳性神经元胞体和纤维的形态、染色强度、分布和各种神经丛之间的联系．一方面将这些阳性分布系统和蜜蜂脑中相应的神经元类型进行比较,另一方面也分析了在一些特殊解剖学通路中存在的可能的神经递质及其作用．     

大鼠纹状体边缘区与Meynert氏基底核的突触联系及其与学习记忆功能的关系——WGA-HRP束路追踪法、电镜法和行为实验法研究

纹状体边缘区（ＭｒＤ）是我们先后在大鼠、猫和猴脑内新发现的一个区域。它是位于纹状体尾内侧、环绕着苍白球头外侧的一层梭形细胞。ＭｒＤ的细胞构筑、免疫组化特性和纤维联系形式不同于纹状体其它区。ＭｒＤ的离心投射终止在苍白球尾侧,接近Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核（ＮＢＭ）附近。损毁双侧ＭｒＤ后,动物的学习记忆功能减弱。ＮＢＭ已知与动物智能有关。本研究用纤维溃变和束路追踪电镜法结合行为实验方法,旨在了解ＭｒＤ与ＮＢＭ之间有无突触联系,以及此种联系与动物学习记忆的关系。用纤维溃变和束路追踪电镜法研究表明,由ＭｒＤ发出的纤维终末与ＮＢＭ的胆碱能神经元胞体间存在着突触联系。损伤ＭｒＤ造成ＭｒＤ和ＮＢＭ形成突触联系的终末溃变后,动物的学习记忆能力降低。研究结果表明边缘区与Ｍｅｙｎｅｒｔ基底核间存在着突触联系,而这种联系很可能是ＭｒＤ的学习记忆功能的结构基础之一。     

胆碱转运体与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病主要病理学特征是在脑中形成大量的老年斑和神经元纤维缠结以及出现弥漫性脑萎缩.胆碱能系统的失调与阿尔茨海默病的发生机制关系密切.具体表现为基底前脑的胆碱能系统紊乱,胆碱乙酰化酶、乙酰胆碱含量显著减少,以及大量胆碱能神经元退化.胆碱转运体是胆碱能系统中用于转运胆碱进入细胞的关键蛋白体,有三种类型:高亲和力胆碱转运体、胆碱转运体类蛋白及非特异性有机阳离子转运体.近年,很多研究表明胆碱转运体的异常与一系列神经退行性紊乱有关.本文简要综述胆碱能系统中胆碱转运体的生理作用及其在阿尔茨海默病中异常代谢和可能机制的研究进展,以期为防治阿尔茨海默病提供进一步的理论和实验依据.     

一氧化氮供体增强大鼠记忆及其与脑内ADP-核糖基转移酶的关系

为探讨与学习记忆有关的一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ,ＮＯ）信号转导通路,本文用ＮＯ供体硝普钠（ｓｏｄｉｕｍ ｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ,ＳＮＰ）或同时给予ＡＤＰ－核糖基转移酶（ＡＤＰ－ｒｉｂｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ,ＡＤＰＲＴ）抑制剂尼克酰胺（ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ,ＮＩＣ）侧脑室内流射,观察其对大鼠学习记忆行为的影响,并用高效液相色谱法测定脑内ＡＤＰＲＴ活性。结果表明,ＳＮＰ（０．     

老年性痴呆与信号转导

近年来发现 ,老年性痴呆 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ)脑的信号转导系统功能失调 ,特别是肌醇磷脂 (ＰＩ)信号转导系统的严重损伤和Ｔａｕ蛋白的超磷酸化对ＡＤ脑的病理改变有重大影响。因此 ,深入探讨信号转导与ＡＤ的关系对阐明ＡＤ发病机制有重要意义。1 .ＡＤ脑肌醇磷脂信号转导系统功能损伤最近几年 ,由于一些新方法和技术的建立 ,使人们能成功地测定人死后短时间内脑细胞膜受体与Ｇ蛋白的偶联活性及ＰＩ第二信使系统中各组分的变化。结果表明 ,ＡＤ脑中胆碱能激动剂诱导的ＰＩ信号系统严重损伤 ,包括受体功能、Ｇ蛋白…     

神经系统的三种胆碱酯酶染色方法的对比

胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AChE）,是乙酰胆碱的降解酶,存在于胆碱能神经的轴突之中。脑内的胆碱能神经主要部分发自基底前脑。目前,显示胆碱酯酶的方法有多种多样。我们在观察下丘脑和海马脑区胆碱能神经元在针刺累积效应中的作用时,使用了显示AChE的不同方法,发现各种显色方法各有其优缺点。     

老龄大鼠海马CA_3区神经元的酶细胞化学改变及人参茎叶皂甙的抗衰老作用

本实验应用酶细胞化学方法观察了老龄大鼠海马ＣＡ３区神经元的琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）,酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）的衰老变化,同时对比观察了人参茎叶皂甙的抗衰老作用。实验数据由彩色显微图像分析系统进行定量分析。实验结果提示老龄时海马ＣＡ３区神经元ＳＤＨ酶活性减弱,ＡＣＰａｓｅ活性增强。而人参茎叶皂甙具有促进神经元ＳＤＨ酶活性,降低ＡＣＰａｓｅ活性的作用。本结果为老龄时学习记忆能力下降及人参茎叶皂甙延缓衰老提供了一定的酶细胞化学变化的依据。     

茶碱改善东莨菪碱诱发的大鼠记忆障碍

用高效液相色谱测定了不同年龄ＳＤ大鼠与记忆有关脑区的腺苷和乙酰胆碱水平。结果表明,１８～２０月龄鼠的脑内腺苷含量明显高于３～６月龄鼠,而乙酰胆碱（ＡＣｈ）含量却显著低于３～６月龄鼠。经腹腔给大鼠注射东莨宕碱建立近期记忆障碍模型,同时经脑室给予茶碱后,其跳台成绩明显对照组,且脑内ＡＣｈ含量亦显著升高。提示腺苷含量的随龄增加可能是老年记忆障碍的一个重要因素,茶碱作为腺苷受体阻断剂可能通过提高脑内ＡＣｈ     

肾神经传入纤维在DOCA─salt大鼠高血压形成中的作用

于大鼠皮下埋入含醋酸去氧皮质酮（ＤＯＣＡ）的硅胶管以形成ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压,其中一组动物在埋管前切除（Ｔ＿９－Ｌ＿２）脊髓右侧背根神经,每周以尾套法测定大鼠收缩压,埋管后６周测定大鼠脑和血浆中儿茶酚胺（ＣＡ）和血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度,用电脑血管显微图像分析系统测量血管的结构变化。与对照鼠相比,ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压大鼠下丘脑和延脑的肾上腺素含量和ＡｎｇⅡ放免活性及血浆去甲肾上腺素（ＮＥ）浓度均明显增加,血浆ＡｎｇⅡ浓度降低,心系数（心重／体重）和肠系膜动脉的中层厚度、壁厚与腔径（壁腔）比值增大;切除脊髓背根可明显延缓ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压的形成、预防以上组织ＣＡ浓度和ＡｎｇⅡ放免活性增加以及缓解心肌和血管平滑肌的肥厚。提示,肾神经传入纤维在ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ高血压形成中起作用,其机制可能通过影响脑内肾上腺素能神经元和激活脑肾素－血管紧张素系统增加交感传出而起作用。     

胎儿胃肌间神经节胆碱能神经元的研究

本文采用胆碱乙酰转移酶（ＣｈＡＴ）和乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）酶组织化学方法和显微图像分析技术对３２周～４０周胎儿胃底部、胃体部、胃窦部及胃幽门管部的肌间神经节内胆碱能神经元进行光镜定位定量观察。结果表明：胆碱能神经元的分布,细胞大小及酶活性在胃各部有所不同,胆碱能神经元数量由胃底至幽门管部逐渐递增;胃痛和胃体部以中小型神经元为主,胃窦和胃幽门管部以大中型神经元为主;胃各区酶活性强度不一,胃底部和胃体部酶活性显著高于胃幽门部,胃体部酶活性最强。提示胃各部的运动功能和代谢功能有所不同。     

内侧隔核注射淀粉样β蛋白损害大鼠的长时程增强和认知行为（英文）

胆碱能神经元的逐渐丢失和进行性认知功能障碍是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的主要特征。脑内胆碱能神经元集中分布的区域之一是基底前脑的内侧隔核(medial septum,MS),其发出投射纤维至海马。尽管AD患者和动物模型脑内淀粉样β蛋白(amyloidβprotein,Aβ)的神经毒性包括特异性损伤胆碱能神经系统的作用已被广泛报道,但仍不清楚聚集在MS的Aβ是否会影响海马突触可塑性,进而影响学习记忆行为。本研究采用Morris水迷宫、Y型迷宫和在体海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)记录,观察了MS注射Aβ对大鼠海马LTP及认知行为的影响,同时还以能特异性损伤γ氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能神经元的海人藻酸(kainic acid,KA)作为对照,进行了效应比较。结果显示:(1)MS注射Aβ_(25–35),而非KA,明显损伤了大鼠在经典Morris水迷宫和对位水迷宫中的空间学习记忆能力;(2)MS注射Aβ_(25–35)和KA均损害了大鼠在Y迷宫中的新异环境探索能力;(3)MS注射Aβ_(25–35),而非KA,明显抑制了大鼠海马CA1区在体LTP;(4)Aβ_(25–35)和KA均未影响大鼠在行为学测试中的运动能力和电生理记录中的海马CA1区双脉冲易化(paired-pulse facilitation,PPF)。以上结果表明,MS注射Aβ能够损伤大鼠空间学习记忆能力、学习记忆灵活性和探索行为,并压抑海马LTP。结合以往研究,本研究提示:MS的胆碱能神经元及其海马投射可能是AD病程中受Aβ神经毒性作用损害的主要细胞和组织,选择性损伤MS中的胆碱能神经元会导致AD病程中的海马突触可塑性损伤和认知功能伤害。     

在胚胎发育中第三脑室室管膜细胞表达乙酰胆碱转移酶

目的在研究胚胎14天（E14）大鼠端脑放射状胶质细胞与胆碱能前体细胞的关系时发现,第三脑室室管膜细胞和侧脑室脉络丛上皮细胞均表达胆碱能神经元标志性蛋白,即乙酰胆碱转移酶（Choline acetyltransferase,ChAT）。方法E14大鼠端脑冠状连续切片,采用免疫组织化学染色法,分别对放射状胶质细胞标志性蛋白,即波形蛋白（Vi men-tin）和乙酰胆碱转移酶进行免疫组织化学染色。结果E14大鼠端脑室管膜细胞呈单层衬于第三脑室,在背中侧的室管膜细胞由单层增殖为复层。上皮基底部与邻近组织分界不清,这些细胞的游离面胞质呈乙酰胆碱转移酶免疫反应阳性,在邻近的第三脑室周围局部形成乙酰胆碱转移酶阳性细胞群。在相邻切片的同一区域内复层室管膜细胞波形蛋白免疫反应阴性。结论第三脑室背中侧室管膜细胞作为神经干细胞分裂、增殖,产生胆碱能前体细胞,并向第三脑室周围组织迁移,形成基底前脑神经核团的Ch5,Ch6胆碱能神经细胞群。     

杭白菊总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响

目的：探讨杭白菊总黄酮（TFCM）对衰老小鼠学习记忆能力及胆碱能系统的影响。方法：采用皮下注射D-半乳糖的方法制备衰老小鼠模型。ICR小鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组,模型组,低、中、高剂量TFCM处理组。TFCM处理组于造模后第2周开始每天给予TFCM（50、100或150mg／kg）灌胃。用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力,用比色法测定血清和大脑组织中丙二醛（MDA）含量,以及超氧化物歧化酶（SOD）和乙酰胆碱酯酶（Ach E）活性。结果：与正常对照组相比,模型组学习记忆能力减退,MDA含量和Ach E活性增加,SOD活性降低。与模型组相比,中高浓度TFCM处理组（100、150mg／kg）小鼠学习记忆能力明显改善,MDA含量和Ach E活性明显降低,SOD活性增高。结论：TFEM能显著改善D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力,其机制可能与TFCM的抗氧化特性以及提高中枢胆碱能系统功能有关。     

Alzheimer病与神经元钙稳态失调

Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病与神经元钙稳态失调陈明李爱媛（中国科学院上海生理研究所,上海２０００３１）关键词Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病Ｃａ２＋稳态老年性痴呆症（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ）是人在老化过程中发生和发展的一种记忆衰退、认知障碍、智能下降、语...     

新生大鼠脑低氧缺血早期对纹状体胆碱能系统的影响

采用7日龄大鼠右侧颈总动脉结扎合并高温、低氧环境制作新生动物脑低氧缺血模型,观察了脑低氧缺血对新生动物纹状体胆碱能系统的影响。乙酰胆碱(ACh)放射免疫测定结果表明,低氧缺血损伤后24h,两侧纹状体ACh含量均比正常对照组明显下降。乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学图象定量提示,脑低氧缺血后24h,纹状体内拟胆碱能神经元数量未见减少,而胞体内AChE染色强度略有下降。胆碱能递质和该标志酶在新生鼠脑低氧缺血早期的一致改变,证明发育中纹状体胆碱能系统对低氧缺血敏感。鉴于动物不结扎动脉仅作低氧处理者双侧纹状体ACh含量出现与低氧缺血组相同的改变,故提示缺氧可能是造成胆碱能系统早期损伤的直接原因。     

隔区亚细胞群乙酸胆碱酯酶阳性神经元的分布

采用组织化学方法研究了１８只大鼠隔区６个亚细胞群乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）阳性神经元的分布。结果表明,隔核存在着大量的ＡｃｈＥ阳性神经元,并发现主要集中在斜角带核垂直部（ＶＤＢ）和斜角带核水平部（ＨＤＢ）、还观察到在ＶＤＢ腹侧部和ＨＤＢ前部的ＡＣｈＥ阳性神经元呈环形排列。     

三唑酮对绿豆幼苗叶片衰老的延缓作用

三唑酮处理可提高离体绿豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｒａｄｉａｔｕｓＬ．）幼苗叶片叶绿素和蛋白质含量。叶片衰老过程中超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡＰＯＤ）活性及抗坏血酸（ＡｓＡ）和还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量降低。２０ｍｇ／Ｌ三唑酮可提高ＰＯＤ、ＡｓＡＰＯＤ活性和ＡｓＡ、ＧＳＨ含量,对ＳＯＤ、ＣＡＴ活性无影响。丙二醛（ＭＤＡ）含量在叶片衰老过程中提高,并与ＰＯＤ、ＡｓＡＰＯＤ活性和ＡｓＡ、ＧＳＨ含量呈显著负相关,三唑酮可降低ＭＤＡ含量。表明三唑酮有提高植物对膜脂过氧化作用的保护能力,延缓叶片的衰老作用。     

兴奋性氨基酸加强高原低氧大鼠下丘脑前生长抑素原mRNA的表达

目的和方法：应用大鼠高原低氧模型及原位杂交技术和氨基酸测定法,研究下丘脑前生长抑素原（ＰＰＳ）ｍＲＮＡ表达和谷氨酸（Ｇｌｕ）、天门冬氨酸（Ａｓｐ）含量的变化。结果：高原低氧组大鼠下丘脑Ｇｌｕ和Ａｓｐ的含量明显增多,室周核、室旁核、弓状核ＰＰＳ－ｍＲＮＡ阳性神经元数目显著增加;而ＮＭＤＡ受体拮抗抗剂氯铵酮,虽然对Ｇｌｕ和Ａｓｐ含量无明显影响,但可使高原低氧大鼠下丘脑ＰＰＳ－ｍＲＮＡ阳性神经元数目减少