重组腺伴随病毒载体表达人白细胞介素12的研究

白细胞介素12(IL-12)具有广谱抗肿瘤、抗感染的作用,是由两个亚单位40kD(p40)和35kD(p35)通过二硫键构成的杂合体,有可能通过分别表达亚单位的方式来表达有功能活性的IL-12.该实验尝试利用重组腺伴随病毒(rAAV)载体进行人IL-12(hIL-12)双亚基共表达,将hIL-12的两个亚基分别克隆到AAV载体质粒pSNAV中,构建成pSNAV-IL12-p35和pSNAV-IL12-p40质粒,经转染、G418筛选后建立了rAAV载体细胞株.采用先前建立的rAAV的生产方法,获得了rAAV-IL12-p35和rAAV-IL12-p40,在体外将两种rAAV共同感染BHK-21细胞,48h后收集细胞培养上清进行免疫学和生物学活性检测.经ELISA检测,产生的hIL-12 p70的含量为10.185pg/ml;在体外促进IFN-γ分泌实验中,加入hIL-12的PBMC分泌的IFN-γ含量为37.2mg/ml.实验结果说明:采用两个AAV载体分别表达亚单位的方法可以表达具有功能活性的hIL-12,为IL-12的基因治疗提供了一条新的途径.     

大鼠孤束核中神经肽Y样神经元与咽肌运动神经元的联系——PRV和…

用ＰＲＶ和ＰＹ免疫荧光双标记法研究了大鼠孤束核中ＮＰＹ样神经元对咽肌运动神经元的调控。ＰＲＶ注射大鼠咽肌后,在孤束核的中介记叙 中间亚核中可见许多ＰＲＶ和ＮＰＹ双标记细胞。首次证明了大鼠孤束核中的ＮＰＹ样神经元和咽肌运动神经元的联系。推测ＮＰＹ对咽肌运动的精确调控有关。     

大鼠孤束核中神经肽Y样神经元与咽肌运动神经元的联系——PRV和NPY免疫荧光双标记法研究

用PRV和NPY免疫荧光双标记法研究了大鼠孤束核中NPY样神经元对咽肌运动神经元的调控。PRV注射大鼠咽肌后,在孤束核的中介亚核和中间亚核中可见许多PRV和NPY双标记细胞。首次证明了大鼠孤束核中的NPY样神经元和咽肌运动神经元的联系。推测NPY可能对咽肌运动的精确调控有关。     

化学损伤纹状体和Meynert氏基底核后原癌基因蛋白c－Fos在大鼠脑、丘脑下部及纹状体边缘区内的表达

化学损伤纹状体和Ｍｅｙｎｅｒｔ氏基底核后原癌基因蛋白ｃ－Ｆｏｓ在大鼠脑、丘脑下部及纹状体边缘区内的表达舒斯云,包新民,李胜修,张运周,江凌晓（广州第一军医大学珠江医院神经细胞生物学研究室,广州５１０２８２）ｃ－Ｆｏｓ是一种原癌基因蛋白,合成后存在于神...     

大鼠全脑缺血后纹状体边缘区内降钙素基因相关肽和谷氨酸脱羧酶表达的变化

为研究全脑缺血再灌流后纹状体边缘区内降钙素基因相关肽（CGRP）和谷氨酸脱羧酶（GAD）等神经递质的表达变化。在两侧颈总动脉和椎动脉结扎造成的大鼠全脑缺血模型上,用免疫组织化学方法观察纹状体边缘区内CGRP和GAD等免疫阳性反应的分布,结果显示正常大鼠脑纹状体内有CGRP和GAD阳性神经纤维的分布,全脑缺血再灌流1天后,边缘区中的CGRP免疫阳性反应逐渐增强,在第5天时达到最高峰,全脑缺血再灌流后1天,可见边缘区部位的GAD免疫阳性反应增强,但以后边缘区内的GAD免疫反应阳性物质逐渐减少,缺血再灌流5天后,边缘区中GAD免疫阳性反应的表达基本消失。研究结果表明全脑缺血后边缘区中的CGRP反应逐渐增强,这种变化可能和脑缺血后动物的学习记忆能力下降有关。     

基因重组神经营养蛋白-3在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

建立了能表达基因重组NT 3的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞系 ;通过Southernblot分析表明克隆细胞染色体中有明显的NT 3基因插入 ;用DotELISA和Westernblot实验证实了目的蛋白的表达及其分子量约为 1 4ku .利用EIA方法测定了阳性细胞株表达NT 3的量平均为 2 1 0 0ng/( 1 0 ⁶细胞·48h) ;rNT 3可促进鸡E8背根神经节神经突起生长 ,其长度与rNT 3浓度有明显的量效关系 ;rNT 3的EC5 0 值为 1 6 .7ng/mL ;单克隆抗体 3W3可中和所表达的rNT 3的生物活性 .     

大鼠中缝核群中生长抑素样神经元对咽肌前运动神经元的支配-PRV和SOM免疫荧光双标记法研究

用PRV和SOM免疫荧光双标记法研究了大鼠中缝核群中SOM样神经元对咽肌前运动神经元的调控。PRV注射大鼠咽肌后,在中缝苍白核、中缝隐核、中缝大核和中缝背核中可见少量PRV和SOM双标记细胞。首次证明了大鼠中缝核群中SOM样神经元对咽肌前运动神经元的支配。推测中缝核群中的SOM可能和咽肌运动的精确调控有关。     

前脑生长抑素样神经元对大鼠颈部食管前运动神经元的支配——PRV和SOM荧光双标记法研究

用ＰＲＶ和ＳＯＭ免疫荧光双标记法研究了前脑中ＳＯＭ样神经元对孤束核中食管前运动神经元的支配。当ＰＲＶ注射于大鼠颈部食管后,在大脑皮质前部嗅沟背侧的无颗粒型岛叶皮质后部和嗅沟腹侧的梨状前皮质前部可见较多ＰＲＶ和ＳＯＭ双标记细胞。在终纹床核、内侧视前区、外侧视前区和正中视前区、终板血管器、穹隆下器、以及嗅结节等处也可见少量ＰＲＶ和ＳＯＭ双标记细胞。本文推测脑对颈部食管运动的调节是由广泛的中枢神经系统结构来完成的     

大鼠纹状体边缘区内神经降压肽和生长抑素免疫阳性反应的分布

用免疫组织化学方法研究了大鼠纹状体边缘区中神经降压肽和生长抑素免疫阳性反应的分布。神经降压肽和生长抑素免疫阳性纤维和胞体散在分布于纹状体中,但在边缘区中分布密集,形成一条明显的带,带的宽度和位置和边缘区一致。边缘区中可见神经降压肽和生长抑素免疫阳性胞体。本研究证明纹状体边缘区中存在密度较高的神经降压肽和生长抑素免疫阳性纤维和胞体,并推测和边缘区的学习记忆功能有关     

介绍一种非放射性标记的原位杂交新方法

在病理诊断和科研工作中,原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前,在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交组织细胞化学中多采用同位素标记的探...