香蕉MaBTB基因的表达分析及亚细胞定位

利用荧光定量PCR分析在不同处理下的香蕉采后果实中MaBTB基因的表达,在正常成熟的果实中,MaBTB基因的表达与乙烯的释放量呈正相关;相反,在1-MCP处理的香蕉果实中,该基因的表达相对变化不明显;用乙烯处理的香蕉果实,其表达量在第3天达到高峰,比正常成熟的早11 d。这些结果表明MaBTB基因在香蕉采后果实中是受乙烯诱导表达的。最后,亚细胞定位分析表明MaBTB基因定位在细胞核上。     

香蕉MaASR1基因的抗干旱作用

ASR(ABA, stress, ripening induced protein)是一类响应植物干旱胁迫的关键转录因子, 在许多植物中已有报道, 然而尚未见香蕉(Musa acuminata)中ASR与抗旱作用的相关研究。该实验从香蕉果实cDNA文库中筛选出1个ASR基因, 即MaASR1(登录号为AY628102)。干旱胁迫下, 该基因在叶片中的表达量高于根部。将MaASR1转入拟南芥(Arabidopsis thaliana), Southern检测确定了两株独立表达的转基因株系(命名为L14和L38)。表型观察发现, 此两转基因株系的叶片变小且变厚; Northern和Western检测结果表明, MaASR1在L14和L38中表达。控水处理后, L14和L38的存活率及脯氨酸含量均高于野生型。经干旱胁迫和外源ABA处理后, 对MaASR1转基因株系中ABA/胁迫响应基因的表达分析, 发现MaASR1可增强转基因株系对ABA信号的敏感度, 但不能增强植株依赖于ABA途径的抗旱性。     

香蕉一个Ⅲ类酸性几丁质酶基因与果实成熟关系的研究

为了解Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)与香蕉果实采后成熟过程的相互关系,对经乙烯和1-甲基环丙烯(1-MCP)处理的巴西香蕉果实采后乙烯释放量、Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)表达以及几丁质酶活性进行了测定.结果显示:(1)乙烯催熟处理的香蕉果实,乙烯释放量比对照处理的果实提前15 d达到高峰;1-MCP处理的香蕉果实,乙烯生物合成和果实成熟明显受到了抑制.(2)外源乙烯加速了MaCHⅢ基因的下调表达和Ⅲ类酸性几丁质酶活性的下降,MaCHⅢ表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后第3天和第4天下降到最小值.(3)1-MCP处理使MaCHⅢ基因呈现上调表达,Ⅲ类酸性几丁质酶活性上升,MaCHⅢ基因表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后18 d和25 d达到高峰.研究表明,MaCHⅢ基因可能与香蕉果实采后成熟呈负相关.     

香蕉MaASRl基因的抗干旱作用

ASR（ABA,stress,ripening induced protein）是一类响应植物干旱胁迫的关键转录因子。在许多植物中已有报道,然而尚未见香蕉（Musa acuminata）VPASR与抗旱作用的相关研究。该实验从香蕉果实cDNA文库中筛选出1个AS尺基因,即MaASRl（登录号为AY628102）。干旱胁迫下,该基因在叶片中的表达量高于根部。将MaASRl转入拟南芥∽rabidopsisthaliana）,Southern检测确定了两株独立表达的转基因株系（命名为L14和L38）。表型观察发现,此两转基因株系的叶片变小且变厚Northern和Western检测结果表明,MaASR1在L14和L38中表达。控水处理后,L14和L38的存活率及脯氨酸含量均高于野生型。经干旱胁迫和外源ABA处理后,对MaASR1转基因株系中ABA／胁迫响应基因的表达分析,发现MaASR7可增强转基因株系对ABA信号的敏感度,但不能增强植株依赖于ABA途径的抗旱性。     

套袋对红肉脐橙果肉中色素、糖及内源激素的影响

以红肉脐橙为试材,研究幼果期套袋至果实着色前拆袋对果肉中色素、糖及内源激素的影响.结果表明, 套袋显著或极显著地提高了成熟果实的番茄红素、β-胡萝卜素含量;套袋处理与对照果实的GA和ABA含量变化趋势一致,表现为GA含量在果实膨大期迅速下降,着色期至果实成熟期保持在较低水平,ABA含量在拆袋时达到最高峰,然后迅速下降,于果实成熟前又出现一小高峰;套袋极显著降低了脐橙果肉的葡萄糖含量,显著降低了果糖含量,提高了蔗糖含量,但总糖含量与对照无显著差异.     

香蕉谷氨酸脱羧酶基因克隆与表达

根据抑制缩减杂交文库获得的香蕉谷氨酸脱羧酶基因片段,利用RACE技术,首次从香蕉果实中克隆了谷氨酸脱羧酶基因的cDNA全长.结果表明,该cDNA的ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸.Blast分析表明,该基因所推导的氨基酸序列与水稻、柑橘、白杨、番茄等具有较高的一致性,分别为82%、81% 、79% 、78%,推测其编码的蛋白质分子量为56.25 kD,等电点5.21,具有与钙调蛋白结合的C端延伸区域和磷酸吡哆醛结合位点.组织特异性和果实采后正常成熟不同阶段表达结果显示,该基因在香蕉根、茎、叶、花、果实中均有表达,果实中的表达量较高,正常成熟表达量的增加可能受内源乙烯诱导并促进乙烯生物合成,推测其可能在不同的生理过程中起作用,并且与果实成熟及乙烯生物合成密切相关.     

气调和乙烯对梅果叶绿素和内源激素含量的影响

本文研究了在 ( 2 5± 1 )℃下 ,气调包装和乙烯吸收剂处理对采后青梅果实叶绿素含量、内源激素IAA ,GA3,ABA含量和乙烯释放量的影响及它们之间的关系。结果表明 :气调包装果实叶绿素含量最高 ,其次是乙烯吸收剂处理的 ;各处理中气调包装果实的乙烯释放量始终很低 ,GA3含量较高 ,IAA和ABA含量则较低 ;对照果实的则相反 ,乙烯释放量很高 ,IAA和ABA含量较高 ,而GA3含量较低。乙烯吸收剂处理的处于二者之间。气调包装可以维持果实较高的GA3水平 ,降低ABA含量 ,保持较高的GA3/ABA值 ,抑制IAA和乙烯的生成 ,延缓梅果叶绿素的降解。     

气调和乙烯对梅果叶绿素和内源激素含量的影响

本文研究了在（25±1）℃下,气调包装和乙烯吸收剂处理对采后青梅果实叶绿素含量、内源激素IAA,GA3,ABA含量和乙烯释放量的影响及它们之间的关系。结果表明：气调包装果实叶绿素含量最高,其次是乙烯吸收剂处理的;各处理中气调包装果实的乙烯释放量始终很低,GA3含量较高,IAA和ABA含量则较低;对照果实的则相反,乙烯释放量很高,IAA和ABA含量较高,而GA3含量较低。乙烯吸收剂处理的处于二者之间。气调包装可以维持果实较高的GA3水平,降低ABA含量,保持较高的GA3／ABA值,抑制IAA和乙烯的生成,延缓梅果叶绿素的降解。     

香梨果实成熟衰老过程中4种内源激素的变化

以库尔勒香梨[白梨(PyrusbretschneideriRehd.)的变种]为材料,在果实生长发育、成熟衰老期间检测内源IAA、GA3、ABA、乙烯含量变化规律及其相互关系。结果表明果实发育初期IAA、GA3、ABA含量最高,有利于幼果坐果;CA3与ABA的比值变化对果实迅速膨大起关键作用;高浓度GA3对阻抑叶绿素分解起明显作用;果实成熟衰老期间,IAA含量与乙烯释放速率呈方向相同的变化;在此期间GA3含量变化与乙烯释放变化相反。     

绿豆插条生根过程中内源激素含量变化

绿豆插条离体后其IAA含量出现一个峰值,乙烯利处理的IAA峰值出现在第6小时,未经乙烯利处理的出现在第12小时,与插条生根峰出现时间相符.乙烯利处理与否的插条生根过程中,内源GA3含量在0～30h内呈下降趋势,随后略微上升;内源ABA含量先升后降;细胞分裂素ZT和ZR含量在总体上是下降的.     

成熟香蕉果实活性氧与乙烯形成酶活性的关系

香蕉果实成熟过程,随着活性氧产生速率从低水平→迅速跃升→高峰→下降的变化,其乙烯形成酶活性及乙烯产生也经厅了基本同步的过程。显示了三者之间具有某种内在联系。外源超氧阴离子自由基能使乙烯形成酶活性及乙烯产生出现跃升和高峰的时间明显提前;超氧歧化酶则使ＥＦＥ活性及乙烯产率明显下降。进一步说明了在香蕉果实成熟过程中,Ｏ２可能是引起ＥＦＥ活性及乙烯产生迅速上升的原因之一,而过氧化氢则被证明与ＥＦＥ活性及乙     

苹果果实香气产生过程中氨基酸和脂肪酸含量及一些相关酶活性的变化

研究了苹果果实成熟期间香气和乙烯的产生动态,以及游离氨基酸、游离脂肪酸含量和脂氧合酶(LOX)、醇-酰基转移酶(AAT)活性的变化.结果表明,果实香气物质是随着乙烯释放的增加而产生和增加的.在此过程中,异亮氨酸大量积累.游离脂肪酸在果实香气很少时呈增加趋势;随着香气产生的增多而迅速下降;乙烯高峰过后又有增加.脂氧合酶活性随着果实成熟而提高,其活性在乙烯释放达到高峰时达到最大值,之后迅速下降.醇-酰基转移酶活性在果实开始产生香气时迅速增加,之后保持较高活性.     

PRO—LONG涂膜处理对后熟香蕉果实乙烯形成以及其它有关生…

香蕉果实采后以商业上推荐使用的１．５％Ｐｒｏ－ｌｏｎｇ溶液处理,贮藏于２０℃和７５％相对湿度下,分别测定果实的ＡＣＣ含量、ＭＡＣＣ含量、ＥＦＥ酶活性、乙烯释放、叶绿素含量的变化和果实的硬度变化。结果表明,ＰＲＯ－ＬＯＮＧ处理延缓了香蕉果实果皮的叶绿素降解、硬度的下降以及乙烯释放的增加。在后熟过程中,处理果实的ＡＣＣ含量发生积累。ＡＣＣ含量的高峰在乙烯释放高峰和ＥＦＥ酶活性高峰之前出现。与对照比较,     

成熟香蕉果实活性氧与乙烯形成酶活性的关系

香蕉果实成熟过程,随着活性氧产生速率从低水平→迅速跃升→高峰→下降的变化,其乙烯形成酶活性及乙烯产生也经历了基本同步的过程,显示了三者之间具有某种内在联系。外源超氧阴离子自由基（O2）能使乙烯形成酶（EFE）活性及乙烯产生出现跃升和高峰的时间明显提前;超氧歧化酶（SOD）则使EFE活性及乙烯产率明显下降。进一步说明了在香蕉果实成熟过程中,O2可能是引起EFE活性及乙烯产生迅速上升的原因之一,而过氧化氢（H2O2）则被证明与EFE活性及乙烯产生没有直接的关系。     

苹果果实HD-ZipⅠ转录因子亚家族基因鉴定及表达分析

转录因子在调控苹果果实成熟衰老过程中起到至关重要的作用。利用生物信息学方法从苹果基因组数据库筛选出22个HD-ZipⅠ转录因子家族成员并进行分类。通过对不同组织基因表达特异性分析,筛选出6个在成熟果实中表达的基因,进一步分析其在果实成熟贮藏过程中的表达差异。实时荧光定量PCR分析结果表明,在‘富士’果实采后贮藏过程中,有3个家族成员的表达与乙烯存在不同程度的联系,其中 MdHZ 6在果实常温贮藏中的表达与内源乙烯含量变化有较高的相关性,且均在35 d达到峰值; MdHZ 15和 MdHZ 17在内源乙烯高峰之前有显著上调,预测三者与苹果的成熟衰老相关。     

苹果后熟过程中内源脱落酸与乙烯的变化

红蕉苹果后熟过程中其果肉内ABA含量开始迅速上升,比乙烯释放量的上升时间略早。在采后第12～14天,ABA水平达到高峰,尔后快速下降。当乙烯释放量在采后第15天出现高峰时,近果心的果肉ABA含量已降到其高峰值的1/4。青蕉苹果ABA和乙烯的变化趋势与前者相似,只是达到高峰所需要的时间稍长于前者。而较耐贮藏的国光苹果,所需时间更长,ABA水平也比前两个品种为低。     

香蕉果实XET cDNA的克隆及其在成熟软化的果实果皮和果肉中的表达分析

木葡聚糖内糖基转移酶(Xyloglucan endotransglycosylase,XET)通过分解细胞壁半纤维素多糖的主要成分--木葡聚糖而参与果实软化.为了阐明香蕉(Musa acuminata.Colla cv.GrandNain)果实成熟过程中的软化与细胞壁代谢酶XET基因表达模式的关系,采用RT-PCR和RACE-PCR方法,首次从成熟香蕉果实果肉中分离了编码XT基因的全长cDNA(MA-XET1,全长1 095 bp).序列分析表明,MA-XET1的5'端和3'端的非翻译区分别为66 bp和1 89bp,该片段含有一个完整的开放读码框,编码280个氨基酸,推导的MA-XET1蛋白质中存在XET蛋白的催化活性部位DEIDFEFL.Southern杂交表明,MA-XET1在香蕉基因组中由多拷贝基因编码.Northern分析显示,跃变前期的果肉中,不能检测MA-XET1基因的表达,跃变期的果实果肉中MA-XET1表达增加,跃变后期该基因表达略有减弱;在跃变前期的果实果皮中,MA-XET1的积累较低,跃变期的果实果皮中积累大幅增加,而后迅速下降.Propylene(丙烯,乙烯的类似物)处理降低香蕉果实果皮和果肉的硬度,而且propylene促进MA-XET1在果皮和果肉中的积累.这些结果表明,MA-XET1参与香蕉果实成熟过程中的果皮和果肉软化,并且,MA-XET1的表达在转录水平上受乙烯调控.     

光强对砀山酥梨石细胞形成的影响及其与内源IAA、ZR和ABA含量的关系

研究光强对砀山酥梨果实发育过程中石细胞形成的影响,探讨了内源激素和梨石细胞形成的关系。结果表明:梨花后第1周~11周是石细胞形成期,石细胞含量为高光强<中光强<弱光强<极弱光强;内源IAA、ZR含量于花后第1周与第7周分别出现2次高峰;花后第1周内源ABA含量最高后迅速下降,IAA、ZR和ABA含量为高光强>中光强>弱光强>极弱光强。高光强促进砀山酥梨果实发育前期IAA、ZR和ABA合成,减少石细胞的积累。     

植物生长调节剂影响沙田柚内源激素水平的研究

研究了植物生长调节剂优康唑和CPPU对沙田柚生理落果期间幼果和新梢叶片内源IAA、GA1 3和ABA水平的影响.研究结果表明:优康唑处理降低新梢叶片内源IAA和GA1 3水平,提高细胞分裂素含量.优康唑对叶片ABA含量和(IAA GA1 3 CTKs)/ABA比值影响不明显;优康唑处理下幼果IAA、GA1 3和ABA含量均有不同程度的下降,以GA1 3下降幅度最大.果实中CTKs含量和CTKs/ABA比例上升,结合优康唑和CPPU促进沙田柚座果的效应,提示细胞分裂素对座果有重要作用,而CTKs/ABA比例升高有助于缓解生理落果;CPPU处理降低果实ABA含量,提高果实CTKs水平和CTKs/ABA比值.这可能是CPPU促进座果和果实膨大的生理基础.     

甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1 cDNA的克隆及表达特性分析

乙烯感知和信号转导的初始成分是乙烯受体,为探明甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1在甜瓜果实成熟过程中的作用,以甜瓜品种河套蜜瓜为材料,根据GenBank中登录的甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR1的cDNA序列(登录号为AF054806),设计合成特异性引物,采用RT-PCR技术克隆得到Cm-ETR1基因全长cDNA序列,提交到GenBank中(登录号为EF495185)。序列分析表明,序列长度为2 256 bp,编码区为2 223 bp,编码740个氨基酸,与已报道的cantalupenis甜瓜ETR1基因的cDNA序列完全一致。Cm-ETR1蛋白的系统进化树分析结果表明,该乙烯受体蛋白在各物种间高度保守,与黄瓜乙烯受体蛋白相似性最高,一致性为99%,与龙眼乙烯受体蛋白相似性最低,一致性为86%。定量PCR分析结果显示,随着甜瓜果实内源乙烯合成量和成熟程度的增加,Cm-ETR1基因的表达量同步增加,在果实乙烯跃变期,Cm-ETR1的表达量也达到最高值,内源乙烯合成量与Cm-ETR1基因表达量间呈显著正相关,表明Cm-ETR1基因在甜瓜果实成熟过程中可能具有重要的作用。