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胸苷激酶基因治疗胃癌的体外实验 总被引:3,自引:0,他引:3
将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)导入恶性肿瘤细胞,随后可应用药物丙氧鸟苷(ganciclovir, GCV)选择性杀死肿瘤细胞.构建了含胸苷激酶与潮霉素磷酸转移酶(hph)融和基因(HytK)的真核表达载体LXpsp-HytK.以脂质体(lipofectin)为介导,将这种质粒与仅含潮霉素B基因的质粒LXSH 分别转染胃癌细胞系BGC-823,用60 U/m l潮霉素B进行筛选,得到了可稳定传代的阳性克隆,分别命名为BGC-HytK 和BGC-Hy.三种细胞的生长曲线无明显差别.用不同浓度的GCV 分别作用于BGC-HytK, BGC-Hy 及BGC-823,0.02~200 μg/m l 的GCV 对BGC-HytK 细胞有明显的杀伤作用(IC50= 0.02 μg/m l),而对另外两种细胞几乎无毒性作用(IC50> 200μg/m l).20 μg/m lGCV 作用96 h 后,仅存在20% 的BGC-HytK 就可使周围的大部分HSV-tk- 的肿瘤细胞死亡,说明存在较显著的“旁观者效应” 相似文献
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机械力对鼠脑微血管内皮细胞膜电流的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用膜片钳技术以全细胞方式在鼠脑微血管内皮细胞中记录到一延迟外向电流,对K^+具有高度特异性,胞外施加20mmol/L的TEA-Cl在明显抑制该电流。实验的保持电位定在-100mV,测试电位从-100mV至+90mV,每次增加10mV,刺激波宽为2100ms。该电流具有TEA敏感,并有浓度依赖性,其IC50约为2.0mmol/L,类似延迟整流性钾电流特征(IKv)。机械力作用下可引出一外向电流,膜 相似文献
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氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关. 相似文献
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水稻叶片磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶活性及其部分特性 总被引:4,自引:0,他引:4
从水稻(Oryza sativa)叶片分离出对磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)较专一的PEP磷酸酯酶,其Km (PEP)为0.42 m m ol/L,作用pH范围较窄,最适pH 8.7。它在pH 6.2—9.5 范围内及40℃以下较稳定。Pi对酶活性影响不大,仅在大于5 m m ol/L时表现出轻微的抑制作用。Mg2+ 对酶活性具激活作用,在Mg2+ 存在条件下,CaCl2、CoCl2、CuSO4、FeSO4 和ZnSO4 均表现抑制作用 相似文献
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重组酶法定量分析吡咯喹啉醌 总被引:4,自引:0,他引:4
用DEAE-sephacel和CM-celulose柱层析的方法从Comamonastestosteroni菌体中纯化得到一定纯度的脱辅基的乙醇脱氢酶。在含3mMCaCl2的Tris/HCl缓冲液(20mM,pH7.0)中,该酶能与PQQ重组成有活性的全酶,测出的全酶活性大小与外加PQQ的量成正比,从而定量分析PQQ。该法专一、灵敏、可靠。 相似文献
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稀土化合物氯化亚鈰对人肺癌细胞PG、人胃癌细胞BGC-823的作用 总被引:8,自引:0,他引:8
以人肺癌细胞 P G 和人胃癌细胞 B G C 823 作为研究对象,利用 M T T 测定、3 H Td R 参入、流式细胞术、软琼脂培养、 Northern blot、 W stern blot 等实验方法,观察了稀土化合物氯化亚鈰( Ce Cl3)抑癌作用.结果表明, Ce Cl3 浓度为 005 m m ol/ L,01 m m ol/ L,05 m m ol/ L和 1 m m ol/ L可抑制 P G 细胞的增殖;浓度为 05 m m ol/ L和 1 m m ol/ L可抑制 P G 细胞 D N A 的合成,其 G1 期细胞比例增加而 S期细胞比例减少,在软琼脂中的生长能力降低,原癌基因 c m yc 和 c ras 表达降低,p16 蛋白质表达降低.而同样浓度的 Ce Cl3 对 B G C 823 细胞和正常细胞 2 B S未见影响.提示:稀土化合物抑制肺癌细胞 P G 的增殖以及降低其恶性度的作用机制可能与一些增殖相关的原癌基因的表达和细胞周期的调控有关,其确切的机理还需进一步的研究. 相似文献
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pCMBS对完整红细胞膜阴离子通透性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
根据等渗NH4Cl溶血动力学,探讨了pCMBS(对氯汞苯磺酸)对完整红细胞膜阴离子通透性的影响.0.05mmol/LpCMBS使阴离子通透系数Pcl下降为对照的86.5%;1.0mmol/L以上浓度时Pcl值反而变大。pCMBS浓度高于0.3mmol/L时,细胞悬浮液在10s之前光密度下降过快,偏离理论拟合方程且不受DIDS抑制.半胱氨酸对pCMBS引起的效应有恢复作用。结果表明pCMBS和股骨架蛋白上特殊-SH基相互作用,导致band3构象改变,致使改变膜时阴离子的通透性。 相似文献
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动脉平滑肌细胞(SMC)是动脉粥样硬化(AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要。脂蛋白和氧化修饰型脂蛋白对SMC增殖的影响以及SMC增殖与原癌基因异常表达的关系是当前AS发病机制研究的热点之一。我们在建立人主动脉SMC体外培养方法的基础上,观察了LDL,VLDL及HDL和相应的氧化修饰型脂蛋白对培养人SMCfos,myc,erb-B原癌基因转录表达的影响。结果表明:①HDL对SMCfos,myc基因表达无影响;②LDL和VLDL有使这些基因表达增加的趋势,但与对照比较差异不显著(P>0.05);③OX-VLDL,OX-VLDL和OX-HDL有使SMCfos,myc基因表达显著增强的作用(P<0.01),且其作用较相应的天然脂蛋白大(P<0.01).上述结果说明:LDL,VLDL,OX-LDL,OX-VLDL和0X-HDL的致AS作用可能与刺激SMCfos和myc癌基因表达增加有关。 相似文献
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本文对延安市150例男性高血粘滞综合证患者的卡森粘度(CassonViscosity,CV、ηc)、卡森屈服值(Cassonyieldstress,CY,Tc)与另外十四项血流变指标的相关性进行了研究,36例男健康人作对照,以初步观察CV、CY的内在规律与临床意义,结果表明病例组CV与ηa(230S-1)、HRV、TK、IR呈正相关(P<0.01或<0.005);CY与ηa(230S、46S、5.75n)、MRV、LRV、AI呈正相关(P<0.01)与ESR负相关;CV与ηa(5.75S)、MRV、LRV、AI、Fib,CY呈负相关(P<0.01);对照组例数少,相关性差,待后观察。 相似文献
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不同种子预处理方法对提高三树种幼苗耐盐性的效应 总被引:10,自引:0,他引:10
刺槐(RobiniapseudoacaciaLinn.)、湿地松(PinuseliotiEngelm.)和侧柏〔Platycladusorientalis(L.)Franco〕种子经03%CaCl2,250μg/gH3BO3和250μg/g多效唑(MET)浸种24h,然后测定幼苗的耐盐性。结果表明,在0.3%NaCl胁迫条件下,不同种子预处理方法对种子发芽率、平均苗高、根茎比、简易活力指数(SVIS)以及幼苗中Na+与K+的累积量、Na+/K+比及游离脯氨酸含量有较大影响。树种不同,处理效果也存在明显差异。湿地松以0.3%CaCl2,侧柏以250μg/gH3BO3浸种处理效果最好,显著提高种子发芽率、平均苗高、根茎比和SVIS,降低幼苗Na+吸收量和Na+/K+比,缓解盐胁迫逆境。3种种子预处理方法均降低刺槐种子发芽率、平均苗长和SVIS,但提高刺槐幼苗游离脯氨酸含量和幼苗根茎比,减少幼苗对Na+的吸收,降低Na+/K+比 相似文献
12.
用膜片钳技术对培养的纹状体神经元膜上的乙酰胆碱激活的离子通道进行了研究。结果表明,单通道电流为内向电流,随着超极化程度增大而增加,随着去极化程度增大而减少;翻转电位为15.0±6.1mV,电导为82.71±16.17pS;通道的开放时间分布直方图和关闭时间分布直方图均需双指数拟合,开放时间分布直方图的时间常数分别为1.93ms和5.73ms,关闭时间分布直方图的时间常数则为0.528ms和2.32ms;通道的平均开放时间和开放概率均与超极化程度无明显相关关系。由于电极液中含ACh和K ̄+通道阻断剂Cs ̄+而不含Na ̄+或Ca ̄(2+),且浴槽液中含Na ̄+通道阻断剂河豚毒素,因此可排除内向Na ̄+流、Ca ̄(2+)流和K ̄+流,提示内向电流为ACh激活的通道电流。 相似文献
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血管平滑肌细胞上的自发内向阳离子通道 总被引:1,自引:0,他引:1
采用膜片箝技术的细胞贴附式(cel-atached),在酶法分离的大鼠尾动脉平滑肌细胞上记录到一种自发的内向阳离子通道。结果发现:1、在实验条件下(池子液:Krebs,电极液:高钾),该通道电导为26.5±4.1pS,且具有明显的电压依赖、时间依赖和Ca2+依赖的特性;2、该电流具有极显著的内向整流特性;3、离子替换实验表明,该通道对Na+和K+具有很好的通透性,对Cl-的通透则很差;4、胞外加入4-AP(2mmol/L或5mmol/L),BaCl2(1mmol/L)和CsCl(20mmol/L)均不能抑制该电流;5、内向阳离子电流可与Ca2+-激活K+电流在同一细胞上交替活动,提示这两种电流可能在调控平滑肌细胞的基本活动方面起关键作用。 相似文献
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道路农田防护林系统水分关系研究 总被引:4,自引:0,他引:4
道路农田防护林系统水分关系研究任勇,王佑民(北京林业大学,100083)(西北林学院,陕西杨陵712100)WatcrRelationsinFarmlandShelterbeltSystembytheRoads.RenYong¥(BeijinigForeslryUziuersity,100083),WangYoumin(NorthwesternCollegeofForestry,Yangling,Shaanxi,712100).ChineseJournalofEcology,1993,12(4):l-6.IntheregionfromloessplateautoNorthWeiRiver,20-100cmsoillaveristhemainlaverfromwhichtherootsystemofP.×dakuanensisHsuabsorbswater,and0-0.1HistherangeinwhichP.×dakua-nensisbytheroadsstronglyaffdctsbytheroadsstronglyaffectsmoistureconditionoffarmland.Theannual 相似文献
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近年来,在豚鼠、兔心室肌上发现了一种由β-肾上腺素能激活的Cl~-电流(I_Cl)。此种I_Cl的主要特点为:外向整流性质,时间不依赖性,对细胞外Na~+变化敏感,Cl~-通道的活动受细胞内cAMP依赖性蛋白激酶A的调节。I_(Cl)的发现不仅证明心肌上有Cl~-通道,而且近来研究表明,I_(Cl)在调节心肌动作电位时程和静息电位方面起主要作用。研究结果还提示I_(Cl)可能与病理状态下某些心律失常的发生有关。 相似文献
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本文对17例大肠癌病人癌组织及癌旁粘膜中的胃泌素细胞和SS细胞进行免疫细胞化学观察(PAP)。结果显示:在癌及癌旁粘膜中来见胃泌素细胞;癌细胞中均未见SS细胞;癌旁粘膜中SS细胞的形态、位置近于正常。距癌灶0~2cm粘膜SS细胞数和总阳性强度显著高于2~6cm和4~6cm粘膜(P<0.01)。0~2cm粘膜中SS细胞数和总阳性强度与粘膜上皮细胞异型增生程度呈显著负相关(前者P<0.01;后者P<0.05)。Dukes’CD期者0~2cm和2~4cm粘膜中细胞平均阳性强度均显著低于AB期患者(前者P<0.05,后者P<0.01)。距癌0~2cm粘膜SS细胞增多和总阳性强度增高可能是机体发生在病变部位的胃肠内分泌防御反应的细胞学基础,并受到粘膜上皮异型增生程度的影响。晚期0~4cm粘膜SS细胞分泌SS减少是机体胃肠内分泌功能衰退的表现。 相似文献
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Cl-通道与受体调控Ca2+内流关系近年受到重视。已有资料表明Cl-通道开放参与介导α1-肾上腺素受体触发Ca2+内流,但对血管平滑肌Cl-通道作用未有一致看法。有报道认为Cl-通道开放形成的内向Cl-电流介导经电压依赖性Ca2+通道(VD-CCs)... 相似文献
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系统感染TMV (tobacco m osaic virus)的番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)叶胞外蛋白提取液经冰冻干燥浓缩、- 20℃丙酮沉淀、CM-Sephadex C-25离子交换层析、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析纯化,获得PAGE均一的β-1,3-葡聚糖酶.SDS-PAGE证明,它包含分子量为36 kD 和27 kD的两个同工酶.以昆布多糖为底物,酶的最适pH 在4.8—5.2之间,在pH 4—8稳定;酶的最适温度在30—40℃之间,在40℃保温1h 后酶活性不变;Km 值为9.2 m g/m L.在系统感染TMV 的番茄叶胞外蛋白提取液中,有分子量为22 kD、27 kD和36 kD的3个β-1,3-葡聚糖酶同工酶 相似文献