慢性束缚应激大鼠海马脑啡肽mRNA和前强啡肽mRNA 表达及中药复方的影响

目的:研究慢性束缚应激时大鼠海马脑啡肽和前强啡肽mRNA基因表达的变化以及逍遥散、四君子汤、金匮肾气丸三种中药复方对其的影响.方法:用特制束缚架连续束缚7 d与21 d,每天3 h的方法制作大鼠束缚应激模型;以RT-PCR反应,扩增脑啡肽和前强啡肽基因,同时以β-actin作为内对照,用凝胶图像分析系统进行扫描并分析,把目的基因的光密度与内参照条带的光密度进行比较后进行半定量分析.结果:7 d模型组大鼠海马前强啡肽mRNA的表达明显增强(P＜0.01),21 d模型组海马脑啡呔mRNA和前强啡肽mRNA的表达明显增强(P＜0.01);三个复方均能降低海马内前强啡肽mRNA的表达(P＜0.01),逍遥散和四君子汤能降低脑啡呔mRNA的表达(P＜0.01).结论:逍遥散对脑啡呔mRNA前强啡肽mRNA的基因表达的改善作用明显优于金匮肾气丸组.     

反复摄取烟碱对脑肌醇含量的影响

急性实验中,间隔５ｍｉｎ反复注射烟碱０．５,１．０,１．０,２．０,２．０ｍｇ／ｋｇｉｐ,３０ｍｉｎ后大鼠大脑皮层及海马中肌醇含量升高,但纹状体中肌醇含量无显著变化;相同条件下,氯化锂１０ｍｍｏｌ／ｋｇｉｐ３０ｍｉｎ后大脑皮层和海马中肌醇含量显著降低;慢性实验中,烟碱２．０－１０．０ｍｇ／ｋｇｓｃｂｉｄ１４ｄ后,大鼠大脑皮层中肌醇含量显著增高;烟碱２．６９－１１．５３ｍｇ／ｋｇ／ｄｐｏ６４ｄ后,大鼠大脑皮层中肌醇含量也显著增高。表明烟碱的作用不同于氯化锂,反复给予烟碱可使大鼠大脑皮层中肌醇含量增加。     

抗体应答期间大鼠脑和胸腺中儿茶酚胺含量的变化

目的：探讨在抗体应答期间,脑和淋巴器官中儿茶酚胺（ＣＡｓ）含量的动态变化,籍以了解免疫状态对中枢和外周ＣＡｓ神经活动的影响。方法：用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）免疫大鼠,在免疫后第２￣７ｄ应用高效液相色谱－电化学检测法（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）测定大鼠下丘脑、海马、脑干和胸腺中云甲肾上腺素（ＮＡ）、肾上腺素（Ａ）、多巴胺（ＤＡ）和高香草酸（ＨＶＡ）的含量。结果：①下且脑和海马内ＮＡ在抗体应答期间升高,而胸腺中     

SAMP8小鼠中枢皮质酮水平升高兴奋性氨基酸含量的影响

用放射免疫法和高效液相色谱法电化学检测器分别测定了ＳＡＭＰ８小鼠血浆，大脑皮层，海马，下丘脑皮质酮水平和大脑皮层，海马兴奋性氨基酸含量。结果显示，ＳＡＭＰ８小鼠血浆ＣＯＲＴ水平均显著高于其同龄正常ＳＡＭＲ１ＳＡＭＰ８小鼠８月和１２月龄大脑皮层和海马ＣＯＲ５水平也明显主于同龄正常对照ＳＡＭＲ１小鼠。同时ＳＡＭＰ８小鼠大脑皮层和海马谷氨酸含量有上升趋势，谷氨酰胺含量则明显主于ＳＡＭＲ１小鼠。     

腹腔和脑室注射促肾上腺皮质激素对大鼠不同脑区5-羟色胺含量的影响

本文应用荧光分光光度法测定脑内5-羟色胺(5-HT)含量,观察腹腔内注射(ip)或侧脑室内注射(icv)促肾上腺皮质激素(ACTH)对大鼠海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT 含量的影响,结果如下:(1)ACTH(20.0U/kg)ip 可使海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT 含量增多,1h达高峰,与对照组比较差异非常显著(P<0.01-0.001);ACTH ip 后3h,三脑区5-HT 含量基本恢复至对照水平。电解损毁中脑中缝核后,ACTH ip 使海马和下丘脑5-HT 含量升高的作用明显降低,摘除两侧肾上腺后,对 ACTH 增加三脑区5-HT 含量的效应没有影响。(2)ACTH(0.5U/10μl)icy 40min 后,也使三脑区5-HT 含量升高,与人工脑脊液 icv的比较,差异显著或非常显著(P<0.05-0.01);电解损毁中脑中缝核后,ACTH icv 使海马和下丘脑5-HT 含量升高的作用也显著下降。(3)ACTH ip 升高三脑区5-HT 含量的作用较 ACTH icv 的强,损毁中脑中缝核后,5-HT 含量的下降,前者却不如后者显著。上述结果提示:ACTH(ip 或 icv)之所以引起海马、下丘脑和中-桥脑5-HT 含量增多,很可能都与激活中脑中缝核有关,ACTH ip 尚可能有其它作用途径,但与肾上腺关系不大。     

N—硝基精氨酸抑制海马神经元兴奋机制

研究N－硝基精氨酸（L－NNA）在青霉素诱发的培养海马CA1区神经元细胞兴奋过程中的抑制机制。用激光扫描共聚焦显微镜观察发现4000IU／ ml的青霉素可诱发一氧化氮（NO）的快速合成模式。L-NNA(0-10μmol/L）呈剂量依赖性抑制NO的合成和青霉素刺激15min后谷氨酸水平的二次升高。同时发现1μmol/L和10μmol/L剂量的L－NNA可显著抑制甲硫氨酸脑啡肽的水平,而10μmol/L剂量的L－NNA还显著升高强啡肽－B的水平。对L－NNA抑制谷氨酸水平二次升高效应,100μmol/L的甲硫氨酸脑啡肽受体抑制剂β－funaltrexamine(β-FNA）可显著协同,而100μmol/L的强啡肽－B受体抑制剂norbinaltorphimine(nor-BIN)则显著逆转。以上结果提示：L－NNA抑制4000IU／ml的青霉素诱导的NO合成,并进而通过抑制氨酸脑啡肽水平,升高强啡肽－B水平来抑制谷氨酸水平,调节神经元的兴奋性。     

高原适应过程中大鼠脑内β－内啡肽含量变化的研究

选用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,由平原（海拔５ｍ,上海）直接运送到高原（２２６１ｍ,西宁和３４６０ｍ,天峻）。以放射免疫分折法研究了大鼠在高原２４ｈ．急性缺氧期和３０ｄ慢性缺氧期中枢脑内β－内啡肽样免疫活性物质（β－ＥＰ）的含量变化。结果表明：１．大鼠在两个不同海拔（２２６１ｍ,３４６０ｍ）环境２４ｈ急性缺氧期与平原对照组相比,脑垂体内β－ＥＰ含量降低非常显著（Ｐ＜０．０１）,纹状体、丘脑、下丘脑、桥－延脑、海马内β－ＥＰ含量均增加非常显著（Ｐ＜０．０１）。２．大鼠在３４６０ｍ高原３０ｄ慢性习服期,垂体及各脑区内β－ＥＰ的含量变化呈时相性：即１—３ｄ均呈进行性增加（Ｐ＜０．０１）：３－１５ｄ呈持续性减少,除中脑、纹状体、丘脑外,均为Ｐ＜０．０１。１５－３０ｄ垂体、丘脑、皮层、纹状体内β－ＥＰ含量仍持续减少（毒体、皮层Ｐ＜０．０１）,桥－延脑、下丘脑、海马趋于回升（Ｐ＜０．０１）,中脑亦趋于回升（Ｐ＞０．０５）。脑内β－ＥＰ的这种变化可能具有十分重要的生物学意义。     

免疫应答期间脑和淋巴器官中去甲肾上腺素含量的变化

应用高效液相色谱－电化学检测法（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）测定大鼠在用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）免疫后第２－７天期间,下丘脑、海马、脑干、胸腺和脾脏中去甲肾上腺素（ＮＡ）含量的变化。实验结果表明,下丘脑内ＮＡ含量在免疫后第４－７天明显增加,其中第７天有回降趋势。海马内ＮＡ含量在第４－５天显著增多。而胸腺和脾脏中ＮＡ水平在第４－５天均明显降低。脑干在免疫应答期间无明显改变。以上结果说明,体液免疫应答可影响脑和淋     

高脂膳食对肥胖易感和肥胖抵抗大鼠学习记忆能力的影响及机制

经过长期的高脂膳食后并非所有个体都会发生肥胖,还有些个体会产生肥胖抵抗现象。高脂膳食影响海马依赖的学习记忆等认知功能已被广泛证实,但目前关于高脂膳食对肥胖抵抗个体学习记忆能力影响的研究仍较少见。本文旨在对比研究高脂膳食对肥胖易感（obesity-prone, OP）和肥胖抵抗（obesity-resistant, OR）大鼠空间学习记忆能力的影响,并探讨其潜在的可能机制。Morris水迷宫结果显示,肥胖易感大鼠的学习能力显著低于对照大鼠和肥胖抵抗大鼠,但3组大鼠的记忆功能无显著性差异。Western印迹结果显示,与对照组相比,肥胖易感和肥胖抵抗大鼠海马内脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和突触素(SYN)的含量均显著降低,丙二醛(MDA)和白介素1β(IL-1β)的含量均显著升高;且肥胖易感大鼠海马内上述蛋白质含量的变化更明显。免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描结果均显示,肥胖易感大鼠的海马神经发生水平显著低于肥胖抵抗大鼠和对照大鼠,但肥胖抵抗大鼠的海马神经发生水平与对照大鼠相比未见显著性变化。这些结果提示,高脂膳食可能是通过降低海马内突触可塑相关蛋白质的表达和神经发生,以及加剧炎症反应来损害肥胖易感大鼠的空间学习能力,而对肥胖抵抗大鼠的学习记忆能力影响不显著。     

高脂膳食对肥胖易感和肥胖抵抗大鼠学习记忆能力的影响及机制北大核心CSCD

经过长期的高脂膳食后并非所有个体都会发生肥胖,还有些个体会产生肥胖抵抗现象。高脂膳食影响海马依赖的学习记忆等认知功能已被广泛证实,但目前关于高脂膳食对肥胖抵抗个体学习记忆能力影响的研究仍较少见。本文旨在对比研究高脂膳食对肥胖易感(obesity-prone,OP)和肥胖抵抗(obesity-resistant,OR)大鼠空间学习记忆能力的影响,并探讨其潜在的可能机制。Morris水迷宫结果显示,肥胖易感大鼠的学习能力显著低于对照大鼠和肥胖抵抗大鼠,但3组大鼠的记忆功能无显著性差异。Western印迹结果显示,与对照组相比,肥胖易感和肥胖抵抗大鼠海马内脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和突触素(SYN)的含量均显著降低,丙二醛(MDA)和白介素1β(IL-1β)的含量均显著升高;且肥胖易感大鼠海马内上述蛋白质含量的变化更明显。免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描结果均显示,肥胖易感大鼠的海马神经发生水平显著低于肥胖抵抗大鼠和对照大鼠,但肥胖抵抗大鼠的海马神经发生水平与对照大鼠相比未见显著性变化。这些结果提示,高脂膳食可能是通过降低海马内突触可塑相关蛋白质的表达和神经发生,以及加剧炎症反应来损害肥胖易感大鼠的空间学习能力,而对肥胖抵抗大鼠的学习记忆能力影响不显著。     

电磁脉冲对大鼠学习和脑内神经递质的影响

探讨电磁脉冲（ＥＭＰ）对大鼠神经系统的效应。实验采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠,ＥＭＰ辐照后不同时间用Ｙ－型迷宫测其学习能力,高效液相色谱法检测脑不同部位的神经递质含量。与假照射组（对照组）相比,照后三天内各测定组大鼠学习能力降低（Ｐ＜０．０５）,其中照射后第１天组的海马内５－羟色胺（５－ＨＴ）和多巴酸（ＤＯＰＡＣ）含量升高（Ｐ＜０．０５）,下丘脑多巴胺（Ｄｏｐａｍｉｎｅ）含量升高（Ｐ＜０．０５）,肾上腺素（Ａｄｒ）含量降低;照后２天组海马Ａｄｒ含量降低（Ｐ＜０．０５）,海马５－ＨＴ含量升高（Ｐ＜０．０５）;照后３天组海马内Ａｄｒ含量降低（Ｐ＜０．０５）。ＥＭＰ能够改变大鼠不同脑区神经递质的含量,降低大鼠学习能力     

大鼠大脑皮层中钙调神经磷酸酶活力的时空变化

以ＰＮＰＰ为底物测定了超离心制备的大鼠出生后早期和成年大脑皮层亚细胞各组分中钙调神经磷酸酶的活力。实验结果表明：（ｌ）钙调神经磷酸酶活力广泛地存在于胞液和突触部分,并且各亚细胞组分有明显差异。成年大鼠大脑皮层中ＣａＮ活力相对最高水平是在突触体,突触质,胞液,重的和轻的突触膜部分。（２）大鼠大脑皮层突触体中ＣａＮ活力在出生后第２周和第３周出现高峰的平台期,这与突触发生的高峰期是一致的。在胞液和重的突触膜中ＣａＮ活力最高水平是在出生后的第７ｄ,而在突触质和轻的突触膜中是在第２０ｄ。总之,这些发现证实,在脑发育期间,ＣａＮ活力是依照区域和时间性控制的,提示ＣａＮ可能参与了突触功能作用。     

胎脑黑质脑内移植矫正PD鼠纹状体内脑啡肽mRNA过度表达

用６－ＯＨＤＡ损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起ＰＤ模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏．同时,亦可导致脑啡肽ｍＲＮＡ过度表达。我们用地高辛标记的ｃＲＮＡ探针对纹状体内脑啡肽ｍＲＮＡ含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽ｍＲＮＡ含量较健侧增高８０％,胎中脑移植到失神经支配的纹状体内,脑啡肽ｍＲＮＡ过度表达得以矫正至正常水平,说明胎多巴胺能神经元脑内移植能够调节脑啡肽基因表达,提供了移植物能与宿主发生神经整合、建立突触联系的间接证据。     

刺激大鼠尾壳核对脑内脑啡肽含量的影响

为确定刺激某一脑区时,远隔脑区脑啡肽含量是否改变;如有改变,甲-脑啡肽和亮-脑啡肽的变化是否一致。本工作在乌拉坦麻醉大鼠上,用放射免疫测定方法测定了电刺激尾壳核对六个脑区(下丘脑、纹状体、丘脑、海马、皮层及脑干)两种脑啡肽含量的影响。放射免疫测定的结果表明:(1)动物经乌拉坦麻校舍醉及手术操作后,除纹状体外,其它五个脑区亮-脑啡肽含量均明显降低,甲-脑啡肽含量只有下丘脑和丘脑明显降低,其它脑区无显著变化。(2)在乌拉坦麻醉及手术的基础上,再刺激尾壳核,除丘脑无显著变化外,其它五个脑区甲-脑啡肽含量均明显降低,亮-脑啡肽含量均明显升高,甲-脑啡肽/亮-脑啡肽比值减少(其中纹状体的比值改变无统计学显著性)。以上结果表明,刺激大鼠尾壳核可明显影响远隔脑区脑啡肽含量。关于甲-脑啡肽和亮-脑啡肽反向变化的意义有待进一步研究。     

叠氮钠对大鼠学习记忆及海马和额叶皮层内Aβ的影响

目的:观察大鼠长期皮下注射叠氮钠后的学习记忆、中枢神经系统β-淀粉样蛋白含量的改变.方法:采用Morris水迷宫、放射免疫和透射电镜的方法.结果:大鼠出现明显的空间记忆功能障碍,海马和额叶大脑皮层内Aβ含量升高.结论:长期皮下注射叠氮钠可以制备AD模型,并导致中枢Aβ的升高.     

叠氮钠对大鼠学生记忆及海马和额叶皮层内Aβ的影响

目的：观察大鼠长期皮下注射叠氮钠后的学习记忆、中枢神经系统β－淀粉样蛋白含量的改变。方法：采用Morris水迷宫、放射免疫和透射电镜的方法。结果：大鼠出现明显的空间记忆功能障碍,海马和额叶大脑皮层内Aβ含量升高。结论：长期皮下注射叠氮钠可以制备AD模型,并导致中枢Aβ的升高。     

实验性脑出血大鼠脑内β-内啡肽变化的免疫组织化学研究

采用胶原酶注入大鼠右侧尾壳核内的方法,造成实验性脑出血大鼠模型。动物存活期分别为１ｄ、３ｄ、７ｄ和２１ｄ。然后用免疫组织化学ＡＢＣ方法显示大鼠脑内β－内啡肽阳性纤维的含量和分布。结果发现：在各个存活期中,脑出血大鼠脑内β－内啡肽样阳性纤维和终末的分布基本正常,图像分析及统计学处理表明：脑出血后１ｄ下丘脑内β－内啡肽阳性纤维和终末的光密度和颗粒面积与正常组之间差别不大（Ｐ＞０．０５）,脑出血后３ｄ、７ｄ和２１ｄ,明显高于正常组。Ｐ值分别小于０．０１、０．０１和０．０５。结果提示：β－ＥＰ可能参与了脑出血后对脑组织的损伤过程,但其机理还需进一步探讨。     

长期大强度运动对大鼠脑组织神经肽Y、亮氨酸脑啡肽、强啡肽A_(1-13)动态变化的影响

目的和方法：采用ＡＢＣ免疫组织化学法结合图象分析,观察大鼠脑组织神经肽Ｙ、亮氨酸脑啡肽、强啡肽Ａ１１３ 在长期（ 共７ 周）大强度（速度由１５ ｍ／ｍｉｎ 递增至３５ ｍ／ｍｉｎ、运动时间为２０ ～２５ ｍｉｎ／ｄ） 的运动下的变化。结果：安静状态下在丘脑室旁核（ＰＶ） 、下丘脑背内侧核（ＤＭ） 、下丘脑腹内侧核（ＶＭＨ）等核团ＮＰＹ 无显著性变化;在此基础上的末次急性运动结束后３ ｈ ＮＰＹ 变化尤为明显。安静状态下大鼠尾壳核ＬＥＮＫ 下降;而末次急性运动后大鼠下丘脑ＬＥＮＫ 被迅速激活而升高。该强度运动能激活下丘脑ＤＹＮＡ１１３ ,尤以运动结束后３０ ｍｉｎ 最为明显。结论： ＮＰＹ、ＬＥＮＫ、ＤＹＮＡ１１３ 在该强度运动下大鼠不同脑区呈现不同变化趋势     

电针刺激加速大鼠中枢脑啡肽的合成

应用放射免疫分析法测定大鼠纹状体、下丘脑、丘脑、桥延脑内甲啡肽和亮啡肽样免疫活性物质(Ir-MEK,Ir-LEK)的含量。脑室注射氨基肽酶抑制剂 bestatin(B)或“脑啡肽酶”抑制剂 thiorphan(T)各50μg 并不影响脑内 Ir 脑啡肽含量,合并应用 B T 各50μg 仅引起下丘脑 Ir-MEK 含量轻度上升。这说明安静状态下中枢脑啡肽的更新率不高。给大鼠电针30min 使纹状体和下丘脑 Ir-MEK 和 Ir-LEK 含量升高约40%(33—52%)(P<0.01)。在脑室注射 B T 各100μg 以及腹腔注射非特异性肽酶抑制剂 D-苯丙氨酸250mg/Kg的基础上电针,则使 Ir-MEK 和 Ir-LEK 含量升高约120%(94—147%)(P<0.01)。以上结果说明30min 电针刺激既促进脑啡肽的合成,也促进其释放。由于前者超过后者,因此静态含量升高。在中枢脑啡肽含量升高的同时,电针镇痛效果加强。说明由于肽酶抑制剂的保护作用而积聚于脑内的脑啡肽是具有功能意义的。     

大鼠中枢甲硫脑啡肽和亮脑啡肽含量与电针镇痛的关系

应用放射免疫法测定电针镇痛大鼠各脑区和脊髓中甲硫脑啡肽(MEK)与亮脑啡肽(LEK)样免疫活性物质含量。结果表明,电针组大鼠尾核和下丘脑内的 MEK 与 LEK 含量显著升高,丘脑、低位脑干和脊髓的含量基本不变。将每只鼠电针镇痛效果与脑内脑啡肽含量作直线相关处理,可见尾核与下丘脑的 MEK 含量与大鼠针效呈正相关(P 均<0.05),而这两个脑区的 LEK 含量与针效优劣无相关关系。本工作提示,尾核和下丘脑的 MEK 可能在电针镇痛中具有重要作用。