Ras蛋白的脂化修饰

Ｒａｓ蛋白的脂化修饰姚婷婷,马仲才,胥彬（武汉大学生命科学学院,武汉４３００７２）（中国科学院上海药物研究所,上海２０００３１）关键词Ｒａｓ蛋白,脂化,法呢基转移酶抑制剂传统的观点认为,膜蛋白是插入脂双层内的,它们被合成后,依靠自身携带的分拣信号（ｓ...     

Ras蛋白与信号传导

Ｒａｓ介导的信号传导途径是近几年研究热点之一,这是因为许多细胞受体介导的信号通路和Ｒａｓ途径相关。Ｒａｓ蛋白广泛存在生物界,在信号传导途径中起着极为重要的开关作用。ＰＴＫ、Ｒａｓ、Ｒａｆ、ＭＡＰＫＫ和ＭＡＰＫ通过复杂的蛋白与蛋白之间的相互作用以及蛋白质磷酸化,将外界信号传入细胞中从而对细胞生长产生影响。本文对Ｒａｓ介导的信号传导途径的最新研究近展进行综述。     

蛋白激酶C对鼻咽癌细胞P21~(ras)表达的影响

使用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂与抗Ｐ２１Ｈ－ｒａｓ单抗,通过免疫细胞化学,双参数流式细胞仪等方法,探讨鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ中ＰＫＣ与Ｈ－ｒａｓ表达的关系。结果：１）Ｐ２１ｒａｓ蛋白在ＣＮＥ－２Ｚ细胞主要在胞膜（２７％）与胞浆（９３．７％）表达。作用于ＰＫＣ调节区的抑制剂ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ）（２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）与作用于催化区的ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴ）（２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）在明显抑制细胞生长的浓度使Ｐ２１ｒａｓ表达程度均减弱,胞膜阳性率明显降低,分别为５．６％与１．６％。２）蛋白质－ＤＮＡ双参数流式细胞法测定发现在Ｇ１期细胞群Ｒａｓ蛋白表达差异较大,提示Ｒａｓ蛋白主要在Ｇ１期合成逐渐增多;经ＰＫＣ抑制剂ＳＳ与ＳＴ处理后,Ｇ１期细胞表达的差异减小,说明ＰＫＣ抑制剂抑制了Ｇ１期Ｒａｓ蛋白合成。本研究结果提示：ＰＫＣ对Ｒａｓ蛋白向发挥作用的部位胞膜的转移具有一定的调控作用。Ｒａｓ蛋白的表达可能与ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｇ１／Ｓ期的过渡有关。     

法尼基转移酶抑制剂研究进展

Ｒａｓ蛋白法尼基化修饰是其获得生物转化活性的重要环节。选择性抑制法尼基转移酶,可使ｒａｓ基因起主导作用肿瘤的生长受到抑制。本重点介绍法尼基转移酶的生化特性,与肿瘤的关系,及相应抑制剂的研究状况。     

G蛋白偶联受体激活丝裂原活化蛋白激酶的机理

多种Ｇ蛋白偶联受体的均能激活丝裂原活化蛋白激酶。Ｇｉ蛋白偶联受体主要通过其βγ亚基,依赖Ｒａｓ蛋白途径;在大多数哺乳类细胞中Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径抑制Ｒａｓ依赖的ＭＡＰＫ活化,但在ＣＯＳ－７细胞,Ｇｓ蛋白偶联受体通过ＰＫＡ途径使表达的ＭＡＰＫ活化;Ｇｑ蛋白偶联受体主要通过ＰＫＣ途径依赖或非依赖于Ｒａｓ使ＭＡＰＫ活化。ＭＡＰＫ信号途径中ＥＧＦ受体,酪氨酸激酶及调节蛋白Ｓｈｃ等联级反应蛋白可能     

T细胞活化的跨膜接头蛋白

Ｔ细胞通过抗原受体 (ＴＣＲ)识别抗原后 ,经ＣＤ3分子激活多种蛋白酪氨酸激酶 (ＰＴＫ)和胞质接头蛋白 ,从而活化一系列胞质激酶 ,如磷脂酰肌醇 3激酶 (ＰＩ3Ｋ)、磷脂酶Ｃγ(ＰＬＣγ)、Ｒａｓ激酶等 ,再经一系列信号传递激活转录因子调节基因表达 ,使细胞表现功能。最近发现了一组ＴＣＲ相关的跨膜接头蛋白 ,包括Ｔ细胞活化的连接分子 (ｌｉｎｋｅｒｆｏｒａｃｔｉｖａ ｔｉｏｎｏｆＴｃｅｌｌｓ,ＬＡＴ)、ＳＨＰ2相互作用跨膜接头蛋白 (ＳＨＰ2 ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅａｄａｐｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ ,ＳＩＴ…     

Rac的研究进展

Ｒｈｏ家族小Ｇ蛋白 (Ｒｈｏ ＧＴＰａｓｅ)参与细胞骨架重组、基因转录调控和细胞信号转导等生理过程 ,从而影响细胞的极性、粘附、生长和运动能力。有证据表明Ｒｈｏ家族成员还参与肿瘤细胞的侵袭和转移。Ｒａｃ是Ｒｈｏ家族小Ｇ蛋白的成员之一 ,有Ｒａｃ1、Ｒａｃ2、Ｒａｃ3 3种同工型形式。Ｒａｃ1和Ｒａｃ3在体内分布广泛 ,而Ｒａｃ2是一种造血细胞特异的小Ｇ蛋白 ,它可通过对ＮＡＤＰＨ氧化酶的作用调节超氧化物的产生。Ｒａｃ有二种存在形式 :有活性的ＧＴＰ结合形式与无活性的ＧＤＰ结合形式。Ｒａｃ和其他小Ｇ蛋白一样 ,可被鸟嘌呤…     

G蛋白Rap1活化新机制：GEFs研究进展

小分子Ｇ蛋白Ｒａｓ超家庭成员都是通过与鸟苷酸交换因子（ｇｕａｎｉｎｅ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｆａｃｔｏｒｓ,ＧＥＦｓ）结合而被活化,ＧＥＦｓ能增加这类小分子Ｇ蛋白对ＧＴＰ的摄取,并使之形成有活性的ＧＴＰ结合构象。Ｒａｐ１是Ｒａｓ样的小分子Ｇ蛋白。迄今为止,已发现Ｇ３Ｇ、ＣａｌＤＡＧ－ＧＥＦ１、Ｅｐａｃ、ｃＡＭ－ＧＥＦ１、ｃＡＭＰ－ＧＥＦⅡ、ｎＲａｐＧＥＰ、ＧＦＲ可特异的活化Ｒａｐ     

Smads分子及其介导的TGF—β超家族信号转导

ＴＧＦ－β超家族成员的重要生物学功能正日益引起人们的重视,该家族受体也在不断被克隆鉴定。配体通过受体的胞内信号转导研究近年有较大进展,特别是Ｍａｄ及相关蛋白Ｓｍａｄｓ的发现,为阐明ＴＧＦ－β超家族作用机理提供了一条重要线索：Ｓｍａｄｓ蛋白位于细胞浆,被受体激酶直接磷酸化后形成异源聚合体,转移至核内,激活靶基因转录。     

细胞分裂素结合蛋白的研究进展

迄今为止,已从多种植物中分离到细胞分裂素结合蛋白（ＣＢＰｓ）,它们可能在细胞分裂素的信号转导、体内运输及代谢中起作用。根据现有研究结果认为,大多数ＣＴＫｓ受体可能位于膜上,通过与Ｇ－蛋白耦联的信号转导系统或双组分信号转导系统完成ＣＴＫｓ信号的跨膜转导。少数ＣＴＫｓ受体可能位于细胞质中,与胞内ＣＴＫｓ结合后进入细胞核,直接调节基因的表达。本文综述了近年来对ＣＢＰｓ的研究进展,分析了ＣＴＫｓ受体的可能     

EAC细胞在3＇5＇－cAMP诱导下PKA－RⅡ移位入核与癌基因表达的动力学变化

Ｅｈｒｌｉｃｈ细胞在ｃＡＭＰ加茶碱的诱导下,于接种后５－７天,伴随着胞质内ｃＡＭＰ蛋白结合率上升的同时,依赖于ｃＡＭＰ的蛋白激酶Ⅱ型酶调节亚基（ＰＫＡ－ＲⅡ）从胞质向核移位,其表达强度在胞质和核内持续升高,此时癌基ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ,ｃ－Ｈ－ｒａｓ,ｃ－ｓｉｓ表达抑制。ｃＡＭＰ蛋白结合率与ＰＫＡ－ＲⅡ的移位入核呈显著的正相关,二者与癌基因表达抑制是显著的负相关,它们均从第７天最为显著。在癌龄晚期（按种后９－１１天）,当胞质内ｃＡＭＰ蛋白结合率下降（与对照组比较）时,ＰＫＡ－ＲⅡ则停止移位入核,癌基因又重新表达,如果用ｃＡＭＰ抑制剂人为阻断接种后第７天的癌细胞内ＰＫＡ信号通路时,ＰＫＡ－ＲＨ则停止移位入核,而癌基因仍呈强烈表达。对上述各结果之间的关系进行了分析与讨论。     

神经生长因子的信号转导

神经生长因子的信号转导李智任一萍（华东师范大学生物系,上海２０００６２）关键词神经生长因子神经营养蛋白神经营养因子信号转导图１ＮＧＦ的信号转导机制Ａ．ＮＧＦ的信号转导概况Ｂ．Ｒａｓ的激活？未知转录调节因子．——转导途径．促进．抑制神经生长因子（ｎ...     

细胞因子受体及其介导的信号转导

细胞因子受体及其介导的信号转导朱锦芳,郑仲承,刘新垣（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词细胞因子,受体,信号转导,Ｒａｓ－ＭＡＰＫ途径,ＪＡＫ－ＳＴＡＴ途径免疫或造血细胞之间的相互通讯依靠一种可溶性的细胞因子介导。细胞因子包括白细...     

神经元分化的信号转导

神经细胞的分化是神经系统发育过程中的重要事件之一 ,它涉及神经元的迁移、轴突的定向生长、突触发生和选择性凋亡等一系列过程。这些分化过程是在特定的信号分子精确调控下 ,由胞内信号通路介导完成的。1 .神经生长因子 (ＮＧＦ)诱导的Ｒａｓ Ｒａｆ ＭＡＰＫ原癌基因产物信号通路ＮＧＦ是第一个被发现的神经营养因子 ,它能诱导多种神经细胞的轴突快速生长 ,也能促使ＰＣ1 2细胞向交感样神经元的转变。ＮＧＦ的主要作用受体为ＴｒｋＡ ,为受体酪氨酸激酶家族成员。活化的ＴｒｋＡ通过接头分子Ｓｈｃ激活膜内表面的原癌基因产物Ｒａｓ ,活…     

乙型肝炎病毒包膜M蛋白在巴斯德毕德毕赤酵母中的表达

转化了乙肝病毒ｐｒｅＳ２－２基因的重组巴斯德毕赤酵母菌株经甘油培养基充分增殖,然后转移到甲醇培养基中进行诱导表达,破碎细胞并提胞内蛋白,经ＥＬＩＳＡ和ＷｅｓｔｅｎＢｌｏｔ检测证明有４株ＧＳ１１５／ＨＩ＾＋ＭＵＴ＾＋表达了ＨＢＶ Ｍ蛋白。     

维持细胞内铜离子浓度稳定的分子机制

对生命而言,铜是一种必须的微量元素,它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联,超氧化物歧化酶清除胞内自由基,细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白,酪氨酸酶参与色素形成途径,多巴胺β羟化酶则与神经传导有关。细胞内铜离子浓度过低会影响这些酶的活性及相应的生理代谢途径,影响细胞的生存。但细胞内铜离子浓度超过生理需求也会引起严重的问题。铜离子能氧化蛋白,脂类和ＤＮＡ,同时促进形成自由基,引起细胞死亡［１］。人体很多疾病都是由于铜离子代谢异常引起的,其中最著名的就是Ｗｉｌｓｏｎ［２］ 和Ｍｅｎｋｓ［３］病,它们分别是由过多铜离子在细胞内堆积和细胞内铜离子浓度过低导致的。另外,铜离子缺乏还会引起心脏疾病［４］。所以,将细胞内铜离子浓度维持在一稳定水平对细胞生存至关重要。生理性铜离子浓度的维持主要在于四个环节：铜离子进入胞内（ｕｐｔａｋｅ）、胞内运送（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）、合成金属蛋白（ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）及清除过多铜离子（ｅｌｉｍ ｉｎａｔｉｏｎ）［５］。对于过高或过低的铜离子浓度,细胞主要是通过改变流入量（ｉｎｆｌｕｘ）和流出量（ｅｆｆｌｕｘ）来应答。另外,金属硫蛋白可与过多铜离子结合,避免其破坏作用,这种保护方式叫隔离（ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ）。事实上,每一环节都有不止一种蛋白和调控蛋白在起作用。近年来对这方面的研究取得了不少进展,本文在此对细菌、酵母和人的铜离子代谢途径做一总结和比较。     

整合蛋白介导的信号传导研究进展

整合蛋白是一类分布广泛的细胞粘附分子。细胞表面的整合蛋白与相应的配体结合后,可将胞外信号传入胞内。此种信号传导途径涉及到多种蛋白激酶、ＳＨ２－ＳＨ３衔接蛋白、小分子量ＧＴＰ酶以及磷脂酶等,其中聚焦粘附激酶的结构及其功能研究进展迅速。     

EAC细胞在3＇5＇－cAMP诱导下PKA－RⅡ移位入核与癌基因表达的动力学变化

Ｅｈｒｌｉｃｈ细胞在ｃＡＭＰ加茶碱的诱导下,于接种后５－７天,伴随着胞质内ｃＡＭＰ蛋白结合率上升的同时,依赖于ｃＡＭＰ的蛋白激酶Ⅱ型酶调节亚基（ＰＫＡ－ＲⅡ）从胞质向核移位,其表达强度在胞质和核内持续升高,此时癌基ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ,ｃ－Ｈ－ｒａｓ,ｃ－ｓｉｓ表达抑制。ｃＡＭＰ蛋白结合率与ＰＫＡ－ＲⅡ的移位入核呈显著的正相关,二者与癌基因表达抑制是显著的负相关,它们均从第７天最为显著。在癌龄晚期（按种后９－１１天）,当胞质内ｃＡＭＰ蛋白结合率下降（与对照组比较）时,ＰＫＡ－ＲⅡ则停止移位入核,癌基因又重新表达,如果用ｃＡＭＰ抑制剂人为阻断接种后第７天的癌细胞内ＰＫＡ信号通路时,ＰＫＡ－ＲＨ则停止移位入核,而癌基因仍呈强烈表达。对上述各结果之间的关系进行了分析与讨论。     

蛋白激酶C的激活转位和它介导的信号通路

蛋白激酶Ｃ是一系列丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶家族,已发现了至少十二种同功酶。在静止细胞中,它主要以非活化形式存在于胞浆中,由受体－Ｇ蛋白耦联的ＰＬＣβ激活便裂细胞膜上的磷脂而释放ＤＡＧ;与ＰＫＣ的结合引起了ＰＫＣ的别构激活;而通过其它信号途径激活的ＰＬＤ水解胞膜的磷脂酰胆碱（ＰＣ）产生的磷脂酸经磷脂酸酯酶产生的ＤＡＧ可能是ＰＫＣ持续激活的必要条件。在体外实验中,ＰＫＣ的持续激活是一些细胞分化所必须的。蛋白激酶Ｃ的激活首先引起了它转位到膜,有时转位到核,并在转位后继续保持磷酸化活性,同时对它的下游底物进行磷酸化导致它们的活化。ＰＫＣ可活化ＲａｆＳｅｒ／Ｔｈｒ蛋白激酶及ＮＦ－ｋＢ,介导细胞对外界的反应,包括对核基因表达的调节,引起细胞生长或分化等。由于Ｒａｆ可与活化的Ｒａｓ—ＧＴＰ结合从而定位到胞膜,说明蛋白激酶Ｃ与Ｒａｓ介导的Ｒａｆ－１／ＭＥＫ／ＭＡＰＫ信号通路间存在着“对话”。     

内蛋白子及其功能

内蛋白子及其功能白玉明,袁静明（山西大学生命科学系,太原０３０００６）关键词内蛋白子,蛋白质剪接,内蛋白子归巢１．内蛋白子内蛋白子（ｉｎｔｅｉｎ）是由Ｐｅｒｌｅｒ等［１］于１９９４年正式提出的与蛋白质剪接（ｐｒｏｔｅｉｎｓｐｌｉｃｉｎｇ）有关的一个专...