细胞分裂素结合蛋白的研究进展

迄今为止,已从多种植物中分离到细胞分裂素结合蛋白(CBPs),它们可能在细胞分裂素的信号转导、体内运输及代谢中起作用。根据现有研究结果认为,大多数CTKs受体可能位于膜上,通过与G_蛋白耦联的信号转导系统或双组分信号转导系统完成CTKs信号的跨膜转导。少数CTKs受体可能位于细胞质中,与胞内CTKs结合后进入细胞核,直接调节基因的表达。本文综述了近年来对CBPs的研究进展,分析了CTKs受体的可能类型及CBPs作用的可能机制。     

小麦叶片中叶绿体细胞分裂素结合蛋白的定位

小麦叶片中叶绿体细胞分裂素结合蛋白的定位张华敏,刘愚,王美琪,沈允钢（中国科学院上海植物生理研究所,上海２０００３２）关键词：小麦叶片细胞,ＣＴＫ结合蛋白,放射自显影,胶体金自从Ｂｅｒｒｉｄｇｅ等（１９７０）首次在高等植物的核糖体上发现了细胞分裂素（...     

LBP／CD14系统及其与内毒素作用的关系

近年来,人们发现一组机体识别和调控内毒素（ＥＴ）作用的蛋白质分子：即ＬＢＰ／ＣＤ１４系统：包括血清脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）、细胞表面膜结合ＣＤ１４和可溶性ＣＤ１４。ＬＢＰ是ＥＴ的重要载体蛋白,ｍＣＤ１４是单核／巨噬细胞等ＣＤ１４＾＋细胞表面的内毒素受体,ｓＣＤ１４则是调节内皮细胞等ＣＤ１４细胞的重要介质。ＬＢＰ／ＣＤ１４系统能明显提高各种细胞对ＥＴ的敏感性,与脓毒症的发病机制有着密切的内在联系。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α链（GM-CSFRα）的克隆与表达

ＧＭ-ＣＳＦ高亲和力受体至少由两条链组成,低亲和力的α链及无结合力活性的β链。本文采用ＲＴ-ＰＣＲ的方法,从ＧＭ-ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ-１中克隆了全长的ＧＭ-ＣＳＦＲα链Ｃｄｎａ（包括信号肽部分）,经酶切及全基因测序鉴定,并分别在原核及真核细胞表达系统中表达。在大肠杆菌中ＧＭ-ＣＳＦＲα以ＧＳＴ融合蛋白形式表达,谷胱甘肽Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析纯化融合蛋白。ＧＳＴＣＳＦＲαＣ无受体活性,推测主要与缺乏翻译后修饰有关。将全基因克隆入真核表达载体Ｐｓｖｌ中,转染ＣＯＳ-７细胞瞬时表达以重建ＧＭ-ＣＳＦ的低亲和力受体,１２５ＩＧＭ-ＣＳＦ平衡结合实验证明转染后的ＣＯＳ-７细胞膜上有受体的表达,Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ显示表达的受体α链分子量略低于ＴＦ-１细胞。胞外区基因（ＣＳＦＲαＢ）克隆入Ｐｓｖｌ构建的Ｐｓｖｌ／ＣＳＦＲαＢ表达载体,转染ＣＯＳ-７细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达细胞上清,有单一的反应带,表达上清有ＧＭ-ＣＳＦ的受体活性。     

膜去极化与cAMP在胰岛细胞株HIT中诱导CBP片段的转录活性

为了研究 Ｃ Ｂ Ｐ在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中调节基因转录的机制,将不同的 Ｃ Ｂ Ｐ片段瞬时转染到细胞中,观察其转录活性．实验表明,在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ 均可诱导 Ｃ Ｂ Ｐ３０（ Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）转录活性增强,并有协同效应． Ｐ Ｋ Ｃ对 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的转录活性无影响;与 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ有更强结合力的 Ｃ Ｂ Ｐ Ｋ Ｉ Ｘ Ｓ／ Ｂ（氨基酸序列短于 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 的 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ结合功能区）其基本转录活性及膜去极化、ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导下的转录活性均比 Ｃ Ｂ Ｐ３０ 更强．反义 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ 的过度表达可降低 ｃ Ａ Ｍ Ｐ诱导的 Ｃ Ｂ Ｐ的转录活性．提示在胰岛 Ｈ Ｉ Ｔ 细胞中,膜去极化及 ｃ Ａ Ｍ Ｐ对共转录因子 Ｃ Ｂ Ｐ转录活性的调节作用通过 Ｃ Ｒ Ｅ Ｂ介导．     

促肾上腺皮质激素的中枢抗阿片镇痛效应及其作用机制分析

本研究采用多种方法在行为学、细胞受体、受体后第二信使以及脑内Ｆｏｓ蛋白的诱导表达等多个水平,对ＡＣＴＨ的中枢抗阿片镇痛效应、作用机制以及作用部位进行了深入的观察。结果表明,ＡＣＴＨ在脊髓水平可以对抗阿片μ和δ受体介导的镇痛,不对抗Ｋ受体所介导的镇痛。进一步研究表明,ＡＣＴＨ的这一效应可能不是直接发生在阿片受体上的对抗,而是在受体的ｃＡＭＰ和Ｃａ＾２＋信使通路上与阿片相互作用发生在阿片受体上的对抗,     

进行性系统性硬化病患者外周血单个核细胞中癌蛋白的表达和NK亚群状况的研究

本文报告了进行性系统性硬化病（ＰＳＳ）患者外周血单个核细胞中Ｃ－ｍｙｃ、Ｋｉ－ｒａｓ和Ｈａ－ｒａｓ三种癌蛋白的表达和ＮＫ细胞亚群的检测结果。与对照相比,ＰＳＳ患者淋巴细胞的Ｃ－ｍｙｃ癌蛋白阳性率显著升高（Ｐ＜０．０１）,单核细胞的阳性率也倾向于明显升高（Ｐ＝０．０５２）;ＰＳＳ组单核细胞的Ｋｉ－ｒａｓ癌蛋白表达显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）。另外,ＰＳＳ患者ＮＫ细胞中Ｌｅｕ－１１ｃ~＋亚群细胞数显著低于对照值,而Ｌｅｕ－７＋亚群细胞数则显著高于对照值（Ｐ＜０．０５）。作者结合文献讨论了ＰＳＳ患者体内癌基因表达的可能机制以及癌基因表达和ＮＫ亚群改变的临床意义。     

细胞分裂素信号转导研究进展

对应用突变体研究细胞分裂素信号转导、细胞分裂素受体以及参与细胞分裂素信号转导相关的蛋白质作了简要介绍;并且对细胞分裂素信号途径进行了推测：细胞分裂素被受体（CKI1、IBC6或者GCR1）接受后,经传导系统转化形成特定的信息,一方面可能调节基因的表达,从而可能调节受体水平,导致细胞对细胞分裂素浓度应答范围发生改变,另外,基因表达使细胞产生相关的生理反应;另一方面形成的特定信息可能激活MAPK级联途径（mitogen-activated protein kinase cascade）,导致细胞产生相关的生理反应。     

细胞分裂素信号转导研究进展

对应用突变体研究细胞分裂素信号转导、细胞分裂素受体以及参与细胞分裂素信号转导相关的蛋白质作了简要介绍 ;并且对细胞分裂素信号途径进行了推测 :细胞分裂素被受体 (CKI1、IBC6或者GCR1 )接受后 ,经传导系统转化形成特定的信息 ,一方面可能调节基因的表达 ,从而可能调节受体水平 ,导致细胞对细胞分裂素浓度应答范围发生改变 ,另外 ,基因表达使细胞产生相关的生理反应 ;另一方面形成的特定信息可能激活MAPK级联途径 (mitogen_activatedproteinkinasecascade) ,导致细胞产生相关的生理反应。     

菜豆下胚轴中的细胞分裂素结合蛋白

用植物体内天然存在并具有很高活性的玉米素（ｔ－Ｚ）和异戊烯基腺苷（ｉＰＡ）作为配基,分别与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ偶联,制成亲和吸附介质,分离、纯化菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）黄化幼苗下胚轴中的细胞分裂素结合蛋白。一种分子量为１５．５ ｋＤ（简称ＺＢＰ）,只含一个多肽链;另一种分子量为１６５ ｋＤ（简称ＩＢＰ）,含有两种亚基,分子量分别为４３ ｋＤ和４０ ｋＤ。对ＺＢＰ的结合活性进行了研究,发现ＺＢＰ与ｔ－Ｚ结合时的解离常数（Ｋｄ）为３．２×１０－ ７ ｍ ｏｌ／Ｌ。经计算,每个ＺＢＰ分子只有一个ｔ－Ｚ结合位点