三种腹蛇抗栓酶对闭塞性血管疾病血流变学及血小板作用的比较

对蛇岛、浙江、长白山三种不同产地的蝮蛇抗栓酶（ＡＥ）对闭塞性血管疾病患者血流变学变化影响及血小板作用的差异进行了比较。结果表明：三种ＡＥ均有较明显降低全血粘度、血浆粘度及血球压积的作用，而三种ＡＥ间的作用无显著性差异；降低血沉的作用以长白山ＡＥ较佳；祛纤作用以长白山ＡＥ及蛇岛ＡＥ为佳；三种ＡＥ均有明显的降低血小板作用。认为对血流变学及血小板的作用，长白山ＡＥ优于蛇岛ＡＥ，蛇岛ＡＥ优于浙江ＡＥ，而其     

蝰科(Viperidae)蝮亚科(Crotalinae)线粒体12S rRBA基因序列分析及其系统发育

对蝮亚科（蛇岛蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓｈｅｄａｏｅｎｓｉｓ Ｚｈａｏ、黑眉蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｓａｘａｔｉｌｉｓ Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ、乌苏 里蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ ｕｓｓｕｒｒｉｅｎｓｉｓ　 Ｅｍｅｌｉａｎｏｖ、　竹叶青Ｔｒｉｍｅｒｅｓｕｒｕｓ 　ｓｔｅｊｎｅｇｅｒｉ 　Ｓｃｈｍｉｄｔ和分别来自不 同地区的尖吻蝮Ｄｅｉｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎ　ａｃｕｔｕｓ　Ｇｕｅｎｔｈｅｒ、短尾蝮Ｇｌｏｙｄｉｕｓ　ｂｒｅｖｉｃａｕｄｕｓ　Ｓｔｅｊｎｅｇｅｒ各 两条）６种蛇共８个个体测定、分析了约３７０ｂｐ线粒体１２Ｓ ｒＲＮＡ基因序列;以游蛇科链蛇属半 棱鳞链蛇Ｄｉｎｏｄｏｎ ｓｅｍｉｃａｒｉｎａｔｕｓ　序列为外群构建分子系统树。分子数据结果支持尖吻蝮形态 学的属级分类地位;提示蛇岛蝮位于黑眉蝮的蛇岛亚种分类地位,同时探讨了蛇岛蝮的起源 问题;并提示短尾蝮和乌苏里蝮同位于种级分类地位。     

蛇毒降纤酶的主要药理作用

蛇毒中 “凝血酶样酶”（ Ｔｈｒｏｍ ｂｉｎｌｉｋｅ Ｅｎｚｙｍ ｅ, Ｔ Ｌ Ｅ） 由中国卫生部定名为降纤酶 （ Ｄｅｆｉｂｒａｓｅ, Ｄｆ）。类同生理凝血酶 （ Ｔｈｒｏｍ ｂｉｎ, Ｔｂ） 能降解血浆纤维蛋白原 （ Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ, Ｆｇ）, 但只解离 Ｆｇ 结构的肽链 Ａ, 而不象生理凝血酶能同时解离肽链 Ａ 和肽链 Ｂ; 经 Ｄｆ降解的 “脱肽链 Ａ 纤维蛋白”是可溶性单体, 不接受血中稳定因子 （第十三因子, ⅩⅢ Ｆ） 的催化交联, 易被血中溶纤酶 （ Ｐｌａｓｍ ｉｎ, Ｐ１） 迅速消溶并被吞噬细胞所消除, 不产生 Ｄ Ｉ Ｃ现象; 蛇毒 Ｄｆ的直接效果是降低血浆纤维蛋白原在血中的含量, 从而降低血液粘度, 得以疏畅血流, 用于防治血液高粘滞伴发的血管闭塞性疾病; 蛇毒 Ｄｆ能激发组织溶纤酶原激活物 （ｔ Ｐ Ａ） 的释放, 促使溶纤酶原转变为有活性的溶纤酶, 能使纤维蛋白降解产物 （ Ｆ Ｄ Ｐ） 得以消除, 使血栓崩解。蛇毒 Ｄｆ能阻抑血小板的聚集从而延缓血栓的形成。     

灯盏花总黄酮对血小板聚集和血栓形成的影响

采用Ｂｏｍ氏比浊法测定灯盏花总黄酮（Ｅｒｉｇｅｒｏｎ ｂｒｅｖｉｓｃａｐｕｓ ｆｌａｖｏｎｅｓ,ＥＢＦ）在体内和体外对血小板活化聚集的影响。应用Ｋｏｈｌｅｒ等法观察ＥＢＦ对小鼠尾静脉注射花生四烯酸（ＡＡ）所致突然死亡的保护作用。结果表明,ＥＢＦ在体外和体内对ＡＤＰ、ＡＡ或血小板活化因子（ＰＡＦ）引起的血小板聚集均有明显抑制作用,体外实验,其效应呈浓度依赖关系,体内试验,于给药后１８０ｍｉｎ达最大抑     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对BAEE的降解

以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯（ｂｅｎｚｏｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ,ＢＡＥＥ）为底物,研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｆｒｏｍＥｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ,ｅ－ＰＡ）的酶学性质．酶促反应的最适ｐＨ为８．４,ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ,Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ－１．测定了构成ｅ－ＰＡ的大,小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明,大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多,但比小亚基小约１０倍,即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级．大小亚基的Ｋｃａｔ比较接近,分别是全酶的１／６和１／３．研究了８种抑制剂对ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ活性的影响,其中ｐｅｐｓｔａｔｉｎ和Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）对酶促反应有激活作用,ＴＰＣＫ,ＴＬ－ＣＫ,ＰＭＳＦ,ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ和ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ对其有不同程度的抑制作用,ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的活性没有影响．对ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性和ｅ－ＰＡ的纤溶活性之间作了比较．     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分序列的测定

以新鲜蚯蚓为原料,经过保温抽提、乙醇沉淀、ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析、Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析以及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备电泳等纯化步骤,得到一种纯度达９５％以上的蝗蚓纤溶酶,该酶具有强烈的溶解纤维蛋白折作用及蛋白酶活性,平板法测得其比活性为９００ＵＫ单位／毫克蛋白,ＴＡＭＥ法测得其比活性为２５０００单位／毫克蛋白,酶学性质研究表明其最适反应温度为６５     

杭州虻纤溶酶的纯化及其生物活性分析

经过７５％硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤层析、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５离子交换层析、Ｂ ｅｎｚａｍｉｄｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析,从杭州虻（Ｔａｂａｎｕｓ ｈｏｎｇｃｈｏｗｅｎｓｉｓ）腹部匀浆液中分离纯化出分子量约为３６．５ｋＤ的纤溶酶ＴＨＦＥ。经纤维蛋白平板测定表明,ＴＨＦＥ既具有纤溶酶作用,又具有激活纤溶酶原的作用。ＴＨＦＥ能分解纤溶酶原激活剂的生色底既具有纤     

浙赣边区晚奥陶世腕足类Altaethyrella zhejiangensis（Wang）的异？…

江西玉山祝宅、塔山,石燕山和浙江江山大桥上奥陶统下镇组及相当的浙江江山木林弄长坞组中,腕足动物小嘴贝类Ａｌｔａｅｔｈｙｒｅｌｌａ ｚｈｅｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ（Ｗａｎｇ）居群间的个体大小存在着显著的差异,前三个居群于大个体居群。依据Ａｌｔａｅｔｈｙｒｅｌｌａ属不同种的个体大小及Ａ ｚｈｅｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ种在不同种的居群中个体最大宽度、平均宽度的对比分析,并结合居群动态学的研究和物种分异度分析,认     

脾脏的免疫功能及脾脏对血流变影响的研究

脾脏是人体最大的免疫器官,含有多种免疫活性细胞和细胞因子,脾脏的解剖组织学特点使其成为免疫应答的重要场所和重要调节器官.脾脏具有抗感染和抗肿瘤作用;脾脏还具有清除衰老红细胞及降低血小板,降低血小板粘度从而引起血流变改变的功能.本文将从脾脏的组织学结构及相应的功能加以论述.     

蚯蚓纤溶酶的成分分析

蚯蚓纤溶酶（ｅａｒｔｈｗｏｒｍｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓ,ＥＦＥ）是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶,是一种新的溶栓药．利用亲和层析技术,自蚯蚓匀浆液一步提取蚯蚓纤溶酶,并对该酶的成分进行了分析．实验表明,蚯蚓纤溶酶是一组非均一的糖蛋白,含糖量为５％左右,以中性已糖为主;等电点（ｐＩ）在４．０以下;富含Ａｓｐ,而Ｍｅｔ、Ｔｒｐ和Ｌｙｓ含量很少;ｌｍｇ蚯蚓纤溶酶相当于２５０～３００尿激酶单位．     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的部分性质研究

从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）中纯化出的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）在纤维蛋白平板上可表现出三种活性,分别记为：ＣＦＰｇ,ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ．为更好了解各种活性与ｅ－ＰＡ的纤溶能力的关系,考察了在ＳＤＳ和不同抑制剂存在下各种活性的变化．结果表明,ＳＤＳ可以增强ＣＦＰｇ活性且使得ｅ－ＰＡ变得对一些抑制剂更敏感;ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ,ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ,ｐｅｐｓｔａｔｉｎ,ａｐｒｏ－ｔｉｎｉｎ,ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌｆｌｕｏｒｉｄｅ（ＰＭＳＦ）和ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ（ＤＴＴ）对ｕＣＦ没有影响;ｐｅｐ－ｓｔａｔｉｎ能增强ＣＦＰｇ和ｕＣＦＰｇ活性,Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）能增强ｕＣＦＰｇ和ｕＣＦ活性．这些现象说明不能简单将ｅ－ＰＡ归结为丝氨酸蛋白酶或巯基蛋白酶．此外又以纤溶酶原为底物,分析了ｅ－ＰＡ在体外降解天然蛋白质的肽键特异性,结果表明：ｅ－ＰＡ可以切割碱性氨基酸,小的中性氨基酸及Ｍｅｔ的羧基端,同时ｅ－ＰＡ确能将纤溶酶原切割为纤溶酶;这一结论为ｅ－ＰＡ有可能成为新型溶栓药物提供了生化基础．     

夏威环毛蚓纤溶酶的分离纯化及部分性质研究

以夏威环毛蚓（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ ｈａｗａｙａｎａ）为材料,采用磷酸盐缓冲液抽提、（ＮＨ４）２ＳＯ４分段盐析,离子交换树脂 Ｄ２９０、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００和 ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０三种连续柱层析方法得到一种在 ＰＡＧＥ上显示单一区带的纤溶酶组份。采用凝胶柱层析和 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测其分子量为 １２ ０００和 １２３００,由一条肽链组成。该酶具有强烈的纤溶活力和水解ＢＡＥＥ的活力,能直接作用纤维蛋白和间接激活纤溶酶原。其最适反应温度为４５℃,最适反应ｐＨ为８．０。该酶水解ＢＡＥＥ的活力可被Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｈｇ２＋、金属离子和ＥＤＴＡ、巯基乙醇抑制,Ｃａ＋则有激活作用。该酶中性糖含量为５％,氨基酸组成中Ａｒｇ、Ｌｅｎ含量较多．     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)的分离纯化

为获得一种高效,低廉的溶栓药物,从赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆａｅｔｉｄａ）体内分离纯化出一种可体外激活纤溶酶原从而间接降解纤维蛋白的酶（ｅ－ＰＡ）．纯化过程包括：粗品的盐析,离子交换层析,凝胶过滤层析及疏水相互作用层析．该组份是由二个亚基通过疏水相互作用维系在一起的．通过凝胶过滤层析,可测得全酶的分子量为４５０００;ＳＤＳ电泳显示大、小亚基的分子量分别是２６０００与１８０００;而质谱法测得的大、小亚基的分子量分别为２４５５６．７与１５５４６．６．对大小亚基进行了氨基酸组成分析,结果显示大亚基不含Ｌｙｓ而小亚基不含Ｃｙｓ．测定了大亚基Ｎ端２５个氨基酸序列：ＶＩＧＧＴＮＡＳＰＧＥＩＰＷＱＬＳＱＱＲＱＳＧＳＷ．并与部分已知蛋白质序列进行了比较．ｅ－ＰＡ在纤维蛋白平板上表现有三种不同的纤溶活性     

蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对ATEE的降解

赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ）体内的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）能够降解人工合成底物Ｎ－乙酰－Ｌ－酪氨酸乙酯（ＡＴＥＥ）,该降解反应的最适ｐＨ为８．５,而且在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中的活性要强于在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中．分别测定了ｅ－ＰＡ的大小亚基及全酶在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４与０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）两种体系中的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明,在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中,全酶的ＡＴＥＥ活性远远高于大小亚基单独的ＡＴＥＥ活性,而在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中则没有这种现象．从蛋白质结构的角度对这一结果作了解释．用不同抑制剂和ｅ－ＰＡ作用,结果表明,ｐｅｐｓｔａｔｉｎ,Ｅ－６４和ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的ＡＴＥＥ活性都有不同程度的抑制,这一点与ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性不同．     

华广虻溶纤活性蛋白(TAFP)的性质和对大鼠血液流变学的影响

华广虻溶纤活性蛋白 (TAFP)经血纤蛋白平板法和试管凝块法测定表明 ,TAFP只具有纤溶酶作用 ,不具有激活纤溶酶原的作用 .TAFP的最适 p H为 7.5,且在 p H为 6.0时最稳定 .蛋白水解酶抑制剂对 TAFP的抑制作用显示 :STI>antipain>SBBI>antitrypsin>TLCK>leupeptin>bacteracin>PMSF>TPCK,金属蛋白酶抑制剂 1 ,1 0 - phenanthroline对 TAFP没有抑制作用 .TAFP能显著的延长大鼠出血时间、抑制血小板聚集性 ;显著降低血浆中血纤蛋白原含量、全血粘度、血浆粘度、红细胞压积 ;减慢血沉速度     

放线共生放线杆菌单克隆抗体的制备

本实验制备了针对放线共生放线杆菌（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｔｉｎｏ－ｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ,Ａ．ａ．）的三种单克隆抗体。ＥＬＩＳＡ及免疫荧光表明：抗体７８－Ｂ６和６７－Ｅ８特异性良好。６７－Ｅ８只与Ａ．ａ．的Ｃ型反应,而与Ａ．ａ．的其它血清型及其它主要口腔厌氧菌无交叉反应;７５－Ｂ６与Ａ．ａ三个血清型均有反应,与其它主要口腔厌氧菌未发现交叉反应。Ｙ４－Ｂ６免疫荧光显示与粘性放线菌有交叉反应,但因其形态特征明显不影响其使用。     

中国蝮蛇头骨形态比较及分类学讨论（蛇亚目：蝮亚科）

目前,我国蝮蛇某些种类的分类仍存在不同见解,对蝮蛇类群的分类主要集中在外部形态的比较,而较少涉及内部结构的研究。因此,本文的我国１３个地区的８种（亚种）共２６号蝮蛇的头骨进行了比较解剖,以头骨特征为依据,对岩栖蝮Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｓａｘａｔｉｌｉｓ,乌苏里蝮Ａ．ｕｓｓｕｒｅｎｓｉｓ,蛇岛蝮Ａ．ｓｈｅｄａｏｅｎｓｉｓ,短尾蝮Ａ．ｂｒｅｖｉｃａｕｄｕｓ,秦岭蝮Ａ．ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ等的有效性     

孤生受体的相互作用对视黄酸应答元件的影响

孤生受体ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的功能及其作用机理仍未阐明．以ＤＮＡ瞬时转染和测定氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）活性,以及凝胶阻抑测定,分析ＣＯＵＰ－ＴＦ和ｎｕｒ７７的相互作用对视黄酸应答元件（ＲＡＲＥｓ）的影响．实验表明,ＣＯＵＰ－ＴＦ通过降低ＲＡＲＥｓ的基础活性,来增强ＲＡＲＥ对视黄酸（ＲＡ）的敏感性,而ｎｕｒ７７则拮抗ＣＯＵＰ－ＴＦ的作用．ｎｕｒ７７能够加强不同ＲＡＲＥｓ的转录活性,并且与ＲＡ的诱导无关．结果证实,ｎｕｒ７７通过与ＣＯＵＰ－ＴＦ的直接作用而对ＲＡＲＥｓ产生影响,从而抑制ＣＯＵＰ－ＴＦ与ＲＡＲＥｓ结合和ＣＯＵＰ－ＴＦ的转录活性     

人胎肺细胞的条件化培养液中两种类型纤溶酶原活化物的分离

用正常人胎肺细胞体外培养,从其培养液中分离纤溶酶原活化物（ＰＡ）,通过ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－５０层析,硫酸铵沉淀和Ｆｉｂｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ,Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶过滤等步骤,从１０．５ｌ条件培养液中分离纯化得到两种类型的纤溶酶原活化物,ｔ－ＰＡ９０μｇ,ｕ－ＰＡ８００μｇ．在还原条件下ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均显示单带,分子量ｔ－ＰＡ为７２ｋＤ,ｕ－ＰＡ为５４ｋＤ,纤溶比活分别为１５６０００ＩＵ／ｍｇ蛋白和１０６０００ＩＵ／ｍｇ蛋白．     

凤眼莲根分泌物氨基酸组分对根际肠杆菌属F_2细菌的趋化作用

凤眼莲（Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｐｅｓ）的根分泌物中含有Ｍｅｔ等多种氨基酸,其中Ｍｅｔ、ＧＡＢＡ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ和Ｌｅｕ（１０－７～１０－２ｍｏｌ·Ｌ－１）均对凤眼莲的根际肠杆菌属Ｆ２（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．Ｆ２）细菌有强烈的正趋化作用;Ｇｌｕ、Ｔｈｒ和Ｈｉｓ（１０－７～１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１）也对该菌有一定的正趋化作用;而Ｌｙｓ、Ｃｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ和Ｔｙｐ则对该菌表现出一定的负趋化作用．对细菌的正趋化作用存在一个趋化物的最适浓度范围．具有正趋化作用的氨基酸在凤眼莲根际的浓度都较高,而具有负趋化作用的浓度则较低,这正是凤眼莲与该根际细菌结合为根际微生态系统的原因之一．