频繁使用染发剂对小鼠染色体畸变率影响的研究

研究了多次接触７ 种染发剂对不同组小鼠骨髓和生殖细胞染色体畸变率的影响。结果发现, ７ 种染发剂均导致出现较高的染色体畸变率,３ 种能引起小鼠骨髓细胞染色体畸变率显著上升, 其中以粉末状染发剂的影响最为严重。４ 种染发剂对进行生殖细胞染色体畸变实验的小鼠均产生显著影响, 尤以氧化型染发剂最为明显。     

频繁使用染发剂对小鼠染色体畸变影响的研究

研究了多次接触７种染发剂对不同小鼠骨髓和生殖细胞染色体畸变率的影响。结果发现,７种染发剂均导致出现较高的染色体畸变率,３种能引起小鼠骨髓细胞染色体畸变率显著上升,其中以粉末状染发剂的影响最为严重。４种染发剂对进行生殖细胞染色体畸变实验的小鼠均产生显著影响,尤以氧化型染发剂最为明显。     

槲皮素对中国地鼠肺成纤维细胞、小鼠骨髓细胞和小鼠睾丸精母细胞染色体影响的初步研究

目的:研究槲皮素对中国地鼠肺成纤维细胞、小鼠骨髓细胞和小鼠睾丸精母细胞染色体的影响.方法:采用80、40、20、10、5μg/mL 5个剂量组的槲皮素在有或无代谢活化条件下处理体外培养的中国地鼠肺成纤维细胞(CHL)3小时后更换新鲜培养液,恢复生长21小时后收获细胞制片.体内试验以10000、5000、2500mg/kg剂量的槲皮素给ICR小鼠灌胃后取股骨骨髓、两侧睾丸进行制片.观察槲皮素对三种哺乳动物细胞染色体的影响.结果:在有或无代谢活化条件下槲皮素在浓度>10μg/mL均能够诱导CHL细胞染色体断裂和交换等,染色体细胞畸变率显著增加(P<0.01);而槲皮素各剂量组未引起小鼠骨髓细胞染色体断片、交换、畸变细胞率显著增加,亦未引起小鼠睾丸精母细胞染色体断片、易位、畸变细胞率、常染色体单价体、性染色体单价体显著增加.结论:在本试验条件下槲皮素对体外哺乳动物细胞显示出明显致突变性,存在潜在的遗传毒性,对体内哺乳动物体细胞及生殖细胞染色体无明显损伤作用.     

谷胱甘肽对顺铂致小鼠染色体畸变的保护作用

为了研究谷胱甘Lk．（GSH）对顺铂（cDDP）所致染色体畸变的影响,将昆明小鼠随机分为空白对照组、GSH组、CDDP组、GSH＋CDDP组进行实验,GSH组按照1200mg／（kg·d1连续3天尾静脉注射GSH,对照组注射等量生理盐水;CDDP组于第2天一次注射顺铂20mg/ｋg。对小鼠尾静脉取血检测血常规,处死小鼠,取骨髓进行有核细胞计数、微核实验和染色体G显带,双盲阅片并进行统计学分析。结果表叽对照组细胞染色体数目与形态完好,微核出现的机率极低。GSH组与空白对照组相比无显著差异（Ｐ〉0．05）。CDDP组、GSH＋CDDP组出现了明显的骨髓抑制现象,染色体畸变率及微核率显著增高,与空白对照组比较均有显著性差异（Ｐ〈0．01）。GSH＋CDDP组与CDDP组相比染色体畸变率明显下降（Ｐ〈0．05）。表明谷胱甘肽对顺铂所致的染色体损伤具有一定的保护作用。     

减毒麻疹活疫苗对小鼠的细胞遗传学效应

本文以C57BL/6J小鼠为材料,以骨髓细胞微核、染色体畸变和生殖细胞微核、染色体畸变为指标,对国产减毒麻疹活疫苗的遗传安全性进行评价。结果表明,麻疹疫苗可引起小鼠骨髓微核细胞率、染色体畸变率以及精细胞微核细胞率明显升高,与接种剂量和接种后的时间有关;生殖细胞染色体畸变和对照比无显著性差异。     

金不换鲜三七液对哺乳动物致突变和致畸安全性评价

研究了金不换鲜三七液特殊毒理学效应的致突变性。以小鼠骨髓细胞染色体畸变试验、小鼠睾丸减数分裂染色体畸变及小鼠致畸试验为指标, 研究金不换鲜三七液的安全性。结果： （ａ） 小鼠骨髓细胞染色体畸变试验： 低、中、高３ 个剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率分别为０－７ ％ 、０－２％ 和０－９ ％ , 与对照组相比无显著差异。阳性对照组染色体畸变率大大增高。（ｂ） 小鼠睾丸减数分裂细胞染色体畸变： 在本实验条件下, 小鼠睾丸细胞染色体畸变率［ 包括性染色体单价体（Ｘ－ ＹＵ） , 常染色体单价体（ＡＵ）］ 在各实验组和对照组之间无显著差异。（ｃ） 小鼠致畸试验： 小鼠口服金不换鲜三七液的累积剂量达１５ ｇ／ｋｇ 体重的１／１０、１／５ 和１／２ , 小鼠致畸试验也无显著差异。实验结果表明, 金不换鲜三七液安全无毒。     

合成洗涤剂对人和哺乳动物细胞的诱变性研究

各种合成洗涤剂(洗衣粉,洗发膏,餐具洗涤剂等)产量日增。在日常生活中使用越来越普遍。洗涤剂直接或间接通过环境污染对人类健康产生影响,特别是潜在的致突变性引起公众的普遍注意。而现有的研究结果并不一致。本研究选用三种型号的合成洗涤剂,以小鼠生殖细胞染色体畸变和骨髓细胞微核率及离体的人类细胞和中国仓鼠细胞的染色体畸变和姐妹染色单体交换(SCE)为测定指标,系统地对合成洗涤剂的诱变活     

小鼠染色体畸变类型研究

世界卫生组织对人体细胞染色体分析方法作了详细的规定,使各实验室的结果便于比较。小鼠是遗传学研究的常用动物,但迄今关于小鼠体细胞、生殖细胞染色体畸变分析方法尚无统一规定。小鼠的染色体属端着丝粒染色体,其结构畸变与人类的染色体结构畸变类型     

金不换群三七液对哺乳动物致突变和致畸安全性评价

研究了金不换鲜三七液特殊毒理学效应的致突变性。以小鼠骨髓细胞染色体畸变试验,小鼠睾丸减数分裂染色体畸变及小鼠致畸试验为指标,研究金不换鲜三七液的安全性。结果：（１）小鼠骨髓细胞染色体畸变试验：低,中,高３个剂量组小鼠肌髓细胞染色体畸变率分别为０．７％,０．２％和０．９％,与对照组相比无显著差异。阳性对照组染色体畸变率大大增高。（２）小鼠睾丸减数分别细胞染色体畸变;在本实验条例上,小鼠睾丸细胞染色体     

男性不育的减数分裂研究 Ⅲ.21例不育男性的细胞遗传学分析

21例男性不育症患者的生殖细胞和外周血淋巴细胞的染色体分析表明,10例患者的精子发生过程阻滞在精原细胞或初级精母细胞阶段;3例患者的减数分裂中期Ⅰ出现多价体和单价体;在2例射线引起不育的患者中减数分裂中期Ⅰ畸变细胞率明显增高,其中的1例体细胞染色体畸变率高达16.0％。有6例仅作了精液标本分析,未能作出明确的诊断。     

miR-218与口腔癌顺铂耐药性的相关性分析

本研究检测了顺铂敏感性和非敏感性口腔癌组织中的miR-218表达,发现在非敏感性口腔癌中miR-218的表达水平显著增加。本研究将人舌鳞状细胞癌细胞系(UM1)暴露在顺铂中6个月,发现miR-218在顺铂耐药的UM1细胞中明显上调。通过转染miR-218抑制剂可显著增加UM1细胞对顺铂的敏感性。转染miR-218模拟物可抑制PPP2R5A的表达。转染过表达PPP2R5A的慢病毒可增加UM1细胞对顺铂的敏感性。转染miR-218模拟物增强了UM1细胞活力,而转染过表达PPP2R5A的慢病毒则抑制了miR-218诱导的细胞活力。转染miR-218模拟物上调了β-catenin的表达,而转染过表达PPP2R5A的慢病毒则抑制了β-catenin的上调。本研究证明miR-218是口腔癌中顺铂耐药性的重要调节因子。miR-218的上调通过抑制PPP2R5A,从而激活Wnt信号通路,进而降低了口腔癌的顺铂敏感性。     

miR-17-92对急性白血病L1210/DDP细胞多药耐药性影响研究

目的:研究miR-17-92在白血病L1210/DDP细胞多药耐药形成中的作用.方法:首先构建L1210/DDP耐药细胞系,运用real-time PCR方法检测miR-17-92在L1210/DDP细胞与L1210细胞中的表达差异.利用脂质体Lipofectamine 2000将miR-17-92抑制物(miR-17-92sponge)及阴性对照(sponge vector)转染L1210/DDP细胞,构建miR-17-92表达下调的L1210/DDP细胞系.用MTS法检测转染后耐药细胞对顺铂和阿霉素体外药物敏感性.结果:miRNA-17-92在L1210/DDP耐药细胞系中高表达,上调倍数为(1.61±0.01)倍.体外药物敏感性实验表明,转染miR-17-92抑制物的实验组对顺铂和阿霉素的IC50分别为(3.29±0.51)、(1.35±0.13)g/ml,而转染阴性对照组对上述药物的IC50分别为(6.73± 0.82)、(2.66±0.42)g/ml,在耐药株中抑制miR-17-92在L1210/DDP细胞中的表达,显著增加细胞对顺铂和阿霉素的敏感性.结论:miR-17-92在白血病耐顺铂L1210/DDP细胞中高表达.抑制miR-17-92的表达可增加白血病L1210/DDP细胞对顺铂和阿霉素化疗药物的敏感性,部分逆转耐药.     

苯和环磷酰胺诱发小鼠肝、骨髓和精原细胞染色体畸变的比较分析

在同一个体小鼠上比较分析苯和环磷酰胺诱发的肝、骨髓和精原细胞的染色体畸变率。结果表明,这三种靶细胞的遗传毒理学敏感性是不同的。按每只0.01毫升的剂量皮下注射两次苯于部分肝切除的小鼠,按其诱发的染色体畸变率,敏感性的次序是肝>骨髓>精原细胞。而以环磷酰胺处理的小鼠(15微克/每克体重,腹腔注射),诱发的染色体畸变是骨髓>肝>精原细胞。苯和环磷酰胺诱发的染色体畸变类型无明显差别,主要都是染色单体型的畸变。这种在同一个体小鼠上比较分析三种靶细胞染色体畸变的方法,对于需要肝代谢活化的前致癌剂/前诱变剂活性的测定以及体内比较三种靶细胞的遗传毒性敏感性提供了新的检测途径。 不同组织、器官对化学诱变剂敏感性的差异及其机制的研究,在遗传毒理学中是一项重要的研究课题。 本文试图以苯和环磷酰胺作为检测剂,以同一个体上的肝、骨髓、精原细胞为靶细胞,比较分析诱发的染色体畸变率差异以期对遗传毒理学敏感性有较好的了解。     

阿霉素联合顺铂诱导宫颈癌细胞凋亡实验研究

目的:研究化疗药物阿霉素(ADM)联合顺铂(DDP)对宫颈癌CaSki细胞株的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的相互作用机制。方法:应用MTT比色法检测不同浓度阿霉素、顺铂单独和联合应用对宫颈癌CaSki细胞的增殖抑制作用;同时RT-PCR法在mRNA水平上检测Bcl-2和TNF-α基因表达量的变化。结果:两种药物单独应用均可抑制CaSki细胞的增殖,联合用药(<12μg/mL)时具有协同抑制作用并与各药物单一应用比较具有显著性差异(P<0.05);阿霉素、顺铂作用CaSki细胞后能上调TNF-α基因和下调Bcl-2基因的表达。结论:宫颈癌CaSki细胞在化疗药物阿霉素和顺铂两药联合作用下通过诱导TNF-α和Bcl-2 mRNA表达量的变化发挥协同抑制作用,同时TNF-α的高表达增强了化疗药物阿霉素和顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的敏感性,其机制主要与凋亡诱导效应有关。     

苦参碱对小鼠S_(180)肉瘤细胞凋亡及对FAS/FASL信号途径的影响

本研究探讨苦参碱对肉瘤小鼠肿瘤生长和凋亡的影响,及其对FAS/FASL信号途径的影响。建立S_(180)肉瘤小鼠模型,30只小鼠分为5组,每组6只,分为对照组,10 mg/kg苦参碱、25 mg/kg苦参碱、50 mg/kg苦参碱和5 mg/kg顺铂,对照组采用生理盐水灌胃,苦参碱组采用不同浓度苦参碱灌胃,顺铂组顺铂腹腔注射3天,饲养12天后取出瘤体,测定瘤体重量。TUNEL法检测肿瘤组织凋亡,测定Caspase-8活性,免疫组化检测FAS/FASL,Western blot检测FAS/FASL和Caspase-8蛋白表达。与对照组相比,10、25、50 mg/kg苦参碱组瘤体重量显著减小,瘤体细胞凋亡率显著增加,均具有显著统计学差异(P0.01),且具有浓度依赖性。与对照组相比,10、25、50 mg/kg苦参碱组瘤体组织Caspase-8活性显著增加,FAS/FASL及Caspase-8蛋白表达增加,均具有显著统计学差异(P0.01),且这些作用与苦参碱浓度呈现正相关趋势。与顺铂组相比,25和50 mg/kg苦参碱组瘤体重量显著减小,瘤体细胞凋亡率显著增加,FAS/FASL及Caspase-8蛋白表达和Caspase-8活性显著增加,均具有显著统计学差异(P0.01)。苦参碱能够促进肉瘤小鼠肿瘤组织的凋亡,并且该作用与上调FAS/FASL表达及活化Caspase-8有关。     

干扰血红素加氧酶-1改善黑色素瘤细胞对顺铂耐药性的机制研究

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对皮肤黑色素瘤细胞耐药性的影响并分析其分子机制。方法:采用慢病毒载体介导RNA干扰HO-1稳定低表达的恶性皮肤黑色素瘤细胞A375(KD组),用RT-PCR和Western印迹验证其干扰效率;CCK-8法检测HO-1敲减后细胞的增殖情况及对药物顺铂的敏感性变化;流式细胞术检测顺铂对细胞凋亡的影响;RT-PCR及Western印迹检测顺铂处理的HO-1稳定敲减细胞系中凋亡相关基因的变化。结果:构建了HO-1稳定低表达的A375细胞株,敲低HO-1明显抑制细胞增殖;敲低HO-1后细胞对顺铂的敏感性增加,在低浓度顺铂(0.25～6μg/m L)处理的情况下,A375-sh HO-1细胞抑制率比正常A375细胞高8倍以上;顺铂处理后,在RNA水平和蛋白水平上A375-sh HO-1细胞中凋亡相关基因Bax、active Caspase-3显著增加,并降低Bcl-2的表达。结论:RNA干扰抑制HO-1基因表达能够增强皮肤黑色素瘤细胞A375对顺铂的敏感性。     

秋水仙素对洋葱根尖细胞染色体结构变异的影响

用0.05%和0.1%秋水仙素溶液对洋葱Allium cepa根尖进行控时处理,研究不同秋水仙素浓度和不同处理时间对洋葱根尖细胞有丝分裂畸变的影响。结果显示,秋水仙素有促进细胞有丝分裂染色体停滞在中期的能力;不同固定时间对洋葱根尖细胞有丝分裂有影响;秋水仙素对洋葱根尖细胞染色体有畸变效应,诱导产生畸变的能力受溶液浓度和处理时间的影响。     

小鼠脾脏与骨髓细胞在微核试验和染色体畸变分析中的应用

由于小鼠骨髓多染红细胞微核(PCEMN) 试验法具有简便快速等优点,在遗传毒理学研 究中得到了广泛应用,但与中期细胞染色体畸 变（CA）分析法相比,能检测的染色体畸变类 型较少〔11。虽然小鼠骨髓染色体畸变分析可弥 补其不足,但认为难以得到足够的分裂相C2)。自 Nowell发现植物血凝素（PHA）在体外有刺 激细胞分裂的能力［19I; Moorhead等建立人外 周白细胞培养以来〔33, PHA 已广泛用于血细胞 转化试验。作者受吴氏启发‘31,应用PHA直接 注射于小鼠背部皮下,刺激脾胜、骨髓淋巴细胞 转化,有效地提高了它们的分裂指数,观察到 PHA对脾脏、骨髓PCEMN 和CA无任何影 响。经丝裂霉素C (MMC)验证表明,此法可 同时完成细胞染色体畸变率和微核率两项指标 的观察,不仅有利于活体样本中微核（MN）和 CA的相关性研究,而且脾脏和骨髓可以相互 替代,为评价被检物的毒理效应提供了方便。     

昆明山海棠诱发小鼠精子8号染色体、不分离的研究

应用荧光原位杂交 (FISH)技术检测了昆明山海棠 (THH)水抽提物在小鼠生殖细胞形成过程中对 8号染色体不分离的诱发效应。以THH水抽提物 (12 0mg/kg、2 4 0mg/kg、4 80mg/kg)腹腔注射昆明种雄性小白鼠 ,于处理 2 2天后取小鼠附睾精子涂片 ,以生物素标记的 8号染色体着丝粒重复序列探针进行FISH ,结果发现 ,THH在中间剂量组(2 4 0mg/kg)和高剂量组 (480mg/kg)诱发精子 8号染色体非整倍体频率均显著高于溶剂对照 (P <0 .0 0 1) ,低剂量组(12 0mg/kg)的异常精子频率与溶剂对照无显著差异 (P >0 .0 5 )。研究表明 ,THH在雄性小鼠生殖细胞发育过程中具有染色体不分离诱发效应。     

顺铂对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及caspase-3表达的影响

目的:建立小鼠顺铂(CDDP)耳毒性模型,研究不同剂量顺铂对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法:采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测螺旋神经节细胞的凋亡;应用免疫组织化学Envision法检测caspase-3在螺旋神经节中的表达;同时结合听脑干反应(ABR)测试,观察用药前后小鼠听力的变化。结果:不同剂量顺铂组小鼠体重和听力明显下降,与对照组比较均有显著性差异(P0.05,P0.01);并且随着顺铂给药剂量的增加,小鼠耳蜗螺旋神经节中TUNEL阳性细胞数增多,以及caspase-3表达明显增强。结论:应用小鼠能建立可靠的顺铂耳毒性模型;顺铂可导致耳蜗螺旋神经节细胞凋亡,而且此凋亡过程中有caspase-3的参与,进一步证实了凋亡可能是顺铂耳毒性机制之一。