干扰血红素加氧酶-1改善黑色素瘤细胞对顺铂耐药性的机制研究 |
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引用本文: | 程小耕,王梓乐,毕敬涛,汪琳,董志.干扰血红素加氧酶-1改善黑色素瘤细胞对顺铂耐药性的机制研究[J].生物技术通讯,2018(1). |
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作者姓名: | 程小耕 王梓乐 毕敬涛 汪琳 董志 |
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作者单位: | 重庆医科大学药学院生化与分子药理研究室;西南大学动物科技学院;北京积水潭医院;北京出入境检验检疫局; |
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摘 要: | 目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对皮肤黑色素瘤细胞耐药性的影响并分析其分子机制。方法:采用慢病毒载体介导RNA干扰HO-1稳定低表达的恶性皮肤黑色素瘤细胞A375(KD组),用RT-PCR和Western印迹验证其干扰效率;CCK-8法检测HO-1敲减后细胞的增殖情况及对药物顺铂的敏感性变化;流式细胞术检测顺铂对细胞凋亡的影响;RT-PCR及Western印迹检测顺铂处理的HO-1稳定敲减细胞系中凋亡相关基因的变化。结果:构建了HO-1稳定低表达的A375细胞株,敲低HO-1明显抑制细胞增殖;敲低HO-1后细胞对顺铂的敏感性增加,在低浓度顺铂(0.25~6μg/m L)处理的情况下,A375-sh HO-1细胞抑制率比正常A375细胞高8倍以上;顺铂处理后,在RNA水平和蛋白水平上A375-sh HO-1细胞中凋亡相关基因Bax、active Caspase-3显著增加,并降低Bcl-2的表达。结论:RNA干扰抑制HO-1基因表达能够增强皮肤黑色素瘤细胞A375对顺铂的敏感性。
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