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从产果胶酶的黑曲霉(Aspergillus niger)菌中分离出一支产酸性蛋白酶等多种水解酶的菌株No.3号。经铜蒸汽激光诱变,选育出一支高产复合酶的菌株FID-1,该菌在简单的固体发酵培养基上,28℃培养48hr,每克鲜曲的酶活力(U)为:酸性蛋白酶7500u、纤维素Cx 酶 9061U、纤维素CL酶3581U、果胶酶5471U、糖化酶5582U。酶活平均提高率为38.86%,最高幅度是78.6%。该菌经多次连续传代和贮存一年后,产酶性状稳定。该菌株是目前国内饲料用酶制帮生产株中,酶系最齐全,产酶水平位于前列的优良菌株。 相似文献
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高活力β-淀粉酶菌种的选育和发酵条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
产β一淀粉酶的腊状芽孢杆菌(Bacillus cereus)Asl.447,通过紫外线、亚硝基胍和利福平的反复处理诱变,获得一株具有高活力β-淀粉酶的变异菌株M一3,产酶活力从74u/ml提高到5000—7000u/ml。牛肉汁液体培养基成分为:每100ml牛肉汁中加人蛋白胨1g,可溶性淀粉1g,酵母膏0.5g,NaCl 0.5g pH6.0。该变异菌的最适培养条件是:pH6—6.5 30℃48小时。酶的最适反应条件是:温度40℃,pH7 0,pH稳定范围是6—9,酶的抗热性较差,对可溶性淀粉水解率达85%以上。 相似文献
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黑曲霉A3菌株木聚糖酶粗酶制剂的制备和性质 总被引:8,自引:0,他引:8
本文研究了黑曲霉(AspergillusnigerA3)菌株固体发酵培养的产酶过程,发酵3d产木聚糖酶活最高,固体曲最适浸提比为1:7(W/V),通过60%~65%饱和度的硫酸按盐析,获得的木聚糖酶活力最高。冻干酶粉活力为15400u/g,得率为71%,40℃烘干酶粉活力为15395U/g,得率为51%,酶反应最适温度55℃,最适pH4.6,保温1h半失活温度(t1/2)为54℃,酶对四种不同底物半纤维素水解作用的亲合性为鼓皮最强,稻草最弱。 相似文献
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顺式环氧琥珀酸水解酶产生菌的筛选及产酶条件 总被引:5,自引:1,他引:4
从65株诺卡氏菌中,筛选到一株产顺式环氧琥珀酸水解酶(ESH)的菌株,经鉴定为酒石酸诺卡氏菌(Nocardia tartaricans)SW13-57。在14L发酵罐中通过诱导培养,能在细胞内产生ESH酶活力达120u/g。产酶条件研究表明用丙二醇作碳源,硫酸铵作氮源,顺式环氧琥珀酸作诱导剂,初始pH7.0,温度30℃,通过培养24~30h,产酶量最高。该产酶菌株已被用于固定化细胞方法连续生产L(+)酒石酸。 相似文献
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热稳定β-淀粉酶高产菌株选育及发酵条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从土壤中分离得到一株高温放线菌V4菌株(Thermoactinomyces sp.v4),经测定能产生热稳定β-淀粉酶。V4菌株经过热诱变获得一株具高活力β-淀粉酶的变异株A61产酶活力从400u/ml提高到1000u/ml。A61菌株产生的β-淀粉酶最适反应温度为60℃,酶的热稳定性良好,50℃保温4小时不失活,55℃保温2小时仍具有最初活力的96%。 相似文献
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二株高活力纤维素分解菌EA3-867和N2-78的获得及其特性的比较 总被引:7,自引:0,他引:7
中国科学院上海植物生理研究所纤维素酶组上海酒精二厂 《微生物学报》1978,18(1)
拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii Rifai)野生型菌株AS 3.3002和木3,分别经多种物理化学因素(高能电子、60钴、紫外线、亚硝基胍、硫酸二乙酯等)诱变处理后,得到二株变异菌株EA3,-867和N2-78。它仉的固体曲、液体曲和酶制剂的各项纤维紊酶活力测定结果,均比野生型菌株明显提高。N2-78菌株经摇瓶培养60小时,其CMC糖化力为255毫克葡萄糖/毫升酶液,滤纸糖化力为8.2毫克葡萄糖/毫升酶液,棉花糖化力为13.4毫克葡萄糖/毫升酶液,分别比野生型菌株提高H.6倍、5.3倍和7倍。由EA3-867和N2-78的固体曲制取的纤维素酶粗制剂,其各项纤维紊酶话力测定结果,均较Onozuka R-10纤维索酶制剂为高。上述野生型菌株及变异菌株均具有果胶酶、半纤维紊酶、淀粉酶和少置蛋白酶的活力。变异菌株中果胶酶的活力较野生型菌株为高,淀粉酶和蛋白酶活力则较低。同时,变异菌株的形态也与原始菌株有明显差异。上述四株菌的孢子致死温度相同,CMC糖化、滤纸崩溃和滤纸糖化的最适pH相近,最适温度相同,分别为pH 4.4、60℃,pH4.8、60℃和pH4.8、60℃。 相似文献
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嗜碱芽孢杆菌XE22-4-1碱性弹性蛋白酶发酵条件的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从西藏天然碱湖中筛选到一株产碱性弹性蛋白酶 (alkalineelastase)菌株 ,最适生长pH为 1 0 0 ,经鉴定为Bacillussp .,编号XE2 2 4 1。该菌产酶最适碳源为 2 %葡萄糖 ,氮源为0 2 5%酵母粉 ,豆饼粉对发酵产酶有促进作用。 2L发酵罐实验表明 ,溶解氧是影响该菌株产酶的重要因素。通过提高通气量和改变搅拌速度 ,该菌株可在发酵 48h内达到产酶高峰 ,酶活力最高达 2 66u mL 相似文献
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微小毛霉凝乳酶的生物合成和性质的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
从19株真菌中筛出一株徽生物凝乳酶高产菌株,微小毛霉(Mucor pusillus)602。在含有50—60%麸皮的半固体培养基中、起始pH 5.0-6.7,28℃,培养96小时,凝乳酶最高活力为17 000u/g麸皮。补加葡萄塘、蔗糖、硫酸铵、乳清粉均对酶的产生无显著影响。酶的凝乳活力与蛋白水解活力作用的最适温度均为65℃,此酶具有较高的凝乳活力对蛋白水解活力的比值,凝乳酶的pH意定范围为4-8,凝乳酶在60℃保温5分钟,活力完全丧失。以上性质对于干酪的制造是有利的。 相似文献
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黑曲酶有较强的糖化力,我国目前大多用黑曲酶AS3.4309作为糖化酶生产菌种,但酶活力相差很大,直接影响经济效益。我们采用自然选育的方法获得优良菌种,酶活力达10000u/ml—12000u/ml,现将研究结果报告如下: 相似文献
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本实验对已有的十株红曲霉菌株进行纯种制曲,筛选出一株生长良好、Monacolin K含量高、不产桔霉素、产色素能力强及糖化酶活力相对较高的红曲霉菌株.以大米为原材料,采用液固联合制曲法,通过单因素实验对纯种红曲的培养条件进行优化.结果表明,固体培养基初始含水量为45%,接种量为8%,变温培养红曲时,红曲霉M-7所得纯种红曲最佳,其Monacolin K含量高达243 μg/g,色价450 U/g,糖化酶活力4 289 U/g.与优化之前比较,Monacolin K含量提高了37.2%. 相似文献
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烟色红曲霉耐热解脂酶的形成及特性 总被引:2,自引:0,他引:2
烟色红曲霉(Monacus fulginosus)M-101菌株经麦麸固态培养生成耐热脂肪酶和酯酶。产酶的适宜条件为:培养温度30℃,初始pH 3.0—3.5,麸曲初始含水量75%。培养4—5天后,脂肪酶活力可达207u/g,酯酶活力达14.6u/g。粗酶试验表明,脂肪酶和酯酶的最适反应温度为50℃,脂肪酶最适反应pH为6.0。酯酶最适反应pH为6.8。酯酶耐热性略高于脂肪酶,在55℃处理1小时和45℃处理24小时,两种酶活力基本不变。 相似文献
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嗜碱性芽孢杆菌碱性蛋白酶的研究II.诱变株选育及产酶条件 总被引:2,自引:0,他引:2
嗜碱性的短小芽孢杆菌R115(Alkaliphilic Bacillus pumilus)经0.4mg/ml亚硝基胍和0.4μg/ml利福平处理,获得一株具有高产稳产碱性蛋白酶的变异株(B45),产酶活力由2803μ/ml提高到6000u/ml(28℃测定),该诱变株的最适产酶条件为起始pH10.5-11.0,温度30—35℃,培养时间52—54b。0.4-0.6%K2HPO4.可增加酶的产量。 相似文献
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丝状真菌表达分泌系统中受体菌的构建 总被引:8,自引:0,他引:8
黑曲霉糖化酶高产菌株T21经紫外诱变后, 通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株076%的菌株A.nigerT21-201,其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体PEG法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒Pgt10-vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T21,检测在蛋白酶缺陷株Aspergillus niger T21-201 和原株T21中VHb的分泌表达,结果表明在A.nigerT21-201中VHb表达水平显著高于原株,但Northern blot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似,由此证明酸性蛋白酶缺陷对保护外源蛋白产生了显著效果。
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以工业生产菌株黑曲霉CICIM F0410基因组DNA为模板,扩增出糖化酶glaA基因,测序并进行表达研究。GlaA基因的核苷酸序列长为2167 bp,包含4个内含子。氨基酸序列比对表明此黑曲霉糖化酶与其他曲霉属来源的糖化酶有很高的同源性。将glaA基因克隆到pBC-Hygro载体中,构建重组质粒pBC-Hygro-glaA并转化A. nigerF0410。携多拷贝glaA的转化子用150μg/mL潮霉素抗性筛选并通过荧光实时定量PCR鉴定。结果表明,在染色体整合2~3倍糖化酶基因对糖化酶的过量合成是适宜的,有助于提高糖化酶活力。对转化子进行摇瓶发酵研究,发酵终止时转化子GB0506的糖化酶活力比出发菌株F0410提高了17.5%。因此,增加黑曲霉染色体糖化酶基因的拷贝数可以显著提高糖化酶活力。 相似文献