肺结核合并非发酵菌下呼吸道感染的临床特征及耐药性分析

目的了解肺结核患者合并非发酵菌下呼吸道感染的临床特征及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用ATB全自动细菌鉴定仪,对临床分离菌株进行菌种鉴定,用K．B法对非发酵菌做药物敏感试验。结果从肺结核患者下呼吸道标本中共分离非发酵菌156株,其中铜绿假单胞菌最多,占46．5％,其次为鲍曼不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌,分别占37．8％和9．6％。药敏试验显示5种非发酵菌对多种抗生素均表现为高度耐药或多重耐药,高于相关研究,差异有统计学意义（P≤0．05）。结论肺结核患者肺部感染非发酵菌的分离率较高,多重耐药现象严重,临床应重视非发酵菌感染和耐药性监测。     

血标本检出420株菌的菌谱分布及药敏分析

本文报告中山医科大学附一院从１９９５年１０月至１９９７年８月应用Ｂａｃｔ／Ａｌｅｒｔ血培养仪检测３６００份血液培养结果,阳性标本４１４份,其中６份为复数菌,菌株数４２０,其中革兰阳性球菌（Ｇ＋Ｃ）２３６株,革兰阴性杆菌（Ｇ－Ｂ）发酵菌７２株,Ｇ－Ｂ非发酵菌３４株,真菌５３株,革兰阳性杆菌（Ｇ＋Ｂ）１３株,革兰阴性球菌（Ｇ－Ｃ）２株,厌氧菌１０株。主要的细菌分离率由高到低为凝固酶阴性葡萄球菌（ＳＣＯＮ）１７８６％,金黄色葡萄球菌（ＳＡ）１２８６％,α—溶血性链球菌９５２％,肠球菌属９０５％,大肠埃希氏菌８１％,微球菌属６４３％,铜绿假单胞菌４２９％和沙门氏菌３１％。药敏结果显示Ｇ＋Ｃ中万古霉素的耐药率最低,Ｇ－Ｂ却对各种药物表现出不同的耐药率,其中对泰能和头胞噻甲肟的耐药率较低。     

VITEK－IMSGNS系列药敏卡对~（162）株绿脓杆菌的药敏分析

本文就临床标本中分离的１６２株绿脓杆菌,用ＶＩＴＥＫ－ＩＭＳ全自动微生物系统的ＧＮＳ－ＰＡ等四种药敏卡,共测定２３种抗生素药敏试验．该菌对亚胺硫霉素的敏感度（敏感和中度敏感）最高９７．７８％,其次是哌拉西林、替卡西林、丁胺卡那霉素、妥布霉素、环丙氟哌酸、头孢他啶和头孢哌酮,复方新诺明等八种抗生素耐药率均在９０％以上。分析该菌对１０种抗生素药敏结果发现,几种常用抗绿脓杆菌药物的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）值普遍增高,并结合绿脓杆菌生物微膜形成和该菌对β－内酰胺类抗生素抗性机制作了讨论。     

重症监护病房非发酵菌的分布及耐药性分析

目的分析重症监护病房(ICU)非发酵菌感染的临床分布及耐药状况,总结非发酵菌的感染特点,探讨治疗对策。方法采用ATB Expression细菌鉴定及药敏分析系统,对ICU非发酵菌临床分离株进行菌种鉴定及耐药性测定。结果重症监护病房医院感染非发酵菌检出率为45.0%。其中铜绿假单胞菌为最常见(32.1%),其次为鲍氏不动杆菌(27.4%)和嗜麦芽窄食单胞菌(13.3%)。非发酵菌可感染不同部位,其中以呼吸道感染为最常见(75.5%),其次为创面分泌物(8.7%)和引流液(5.5%)。药敏结果显示非发酵菌对替卡西林、庆大霉素、喹诺酮类等多种抗菌药物高度耐药,且多重耐药现象较严重。结论重症监护病房医院感染中非发酵菌分离率高,分布范围广泛且耐药性强,多重耐药现象严重,应引起临床高度重视。     

决明组织培养的研究

以草决明无菌苗子叶为外植体,接种于７类诱导愈伤组织的培养基上：Ａ．ＭＳ＋２．０２,４－Ｄｍｇ／Ｌ（以下单位省略）＋０．３ＢＡ＋０．２ＮＡＡ．Ｂ．ＭＳ＋０．２２,４－Ｄ十０．２ＢＡ＋２．０ＮＡＡ．Ｃ．ＭＳ＋１．０２,４－Ｄ＋０．５ＢＡ＋０．２ＫＴ．Ｄ．ＭＳ＋０．７ＢＡ＋１．５ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｅ．ＭＳ＋１．５２,４－Ｄ＋０．７ＢＡ十０．２ＭＡＡ．Ｆ．ＭＳ＋０．４２．４－Ｄ＋１．０ＮＡＡ＋０．１ＫＴ．Ｇ．ＭＳＢ（ＭＳ的无机成份和Ｂ５有机成分）＋０．１５ＮＡＡ＋ＢＡ,ＫＴ和ＺＴ各０．５。８～１５天后分别有９０～９９．６％的子叶片被诱导出愈伤组织,并且Ｆ．与Ｃ．类培养基对诱导愈伤组织比较理想,放于Ｇ培养基上的愈伤组织有９．２～３０．２％的芽分化率。芽在生根培养基１／２ＭＳ＋０．２ＩＢＡ中、９８％生根,形成完整的再生植株。     

呼吸道与非呼吸道标本主要非发酵菌分离株的耐药性比较

目的对2 229份住院患者标本进行分离培养,并对非发酵菌分离株进行药敏试验,了解呼吸道与非呼吸道主要分离株的耐药率差异,以便指导临床合理使用抗菌药物。方法收集2008年8月至2010年10月分离自患者呼吸道、非呼吸道标本的革兰阴性非发酵菌,采用VITEK-32全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定,药敏测定采用K-B法,并比较呼吸道与非呼吸道标本所检出的主要革兰阴性非发酵菌对抗菌药物的耐药率差异。结果共检出非发酵菌556株,其中呼吸道标本366株,非呼吸道标本190株,前3位非发酵菌分离株分别为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。非发酵菌菌株ESBLs、AmpC、MBL、同产ESBLs+AmpC和同产ESBLs+MBL检出率分别为17.62%、13.67%、14.39、12.23%和6.12%,其中呼吸道标本分离株铜绿假单胞菌的ESBLs、AmpC检出率明显高于非呼吸道标本(均P<0.05),鲍曼不动杆菌的ESBLs、AmpC检出率明显低于非呼吸道标本(均P<0.05);呼吸道、非呼吸道标本的铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌分离株对多种抗生素的耐药率不同,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论呼吸道与非呼吸道标本分离的主要非发酵菌分离株对同一抗菌药物耐药率不同,治疗不同部位非发酵菌引起的感染,要考虑由于感染部位不同而产生的耐药性以及药物有效浓度的差异,根据药敏结果合理使用抗菌药物。     

优化mRNA翻译起始区提高人粒－巨噬细胞集落刺激因子在E．coli中的表达

人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）是一种重要的造血生长因子．利用基因重组技术构建两个ｈＧＭ－ＣＳＦ的Ｅ．ｃｏｌｉ表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对ｍＲＮＡ翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ））,另一个为未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））．经酶切电泳、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等分析鉴定,证明两者均能表达特异性的１４．６ｋＤｈＧＭ－ＣＳＦ,但ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ）的表达水平较ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ）提高了１．２６倍,占菌体总蛋白的１６．９％．ｍＲＮＡ翻译起始区二级结构预测分析表明,优化突变后生成自由能ΔＧ从原来的－１０．２提高至－９．４Ｋｃａｌ,ＡＵＧ从部分配对状态变为非配对状态．     

医院肺部感染病原菌及耐药性调查

目的 掌握医院肺部感染病原菌及耐药变化特点,为临床肺部感染防治提供指导。方法 对１０７例性肺部感染患者痰液进行细菌学检验,反应Ｋ－Ｂ纸片扩散法测定其分离病原菌对临床常用抗生素的敏感性。结果 １０７例性院肺部感染患者共分离增减现原菌２４４株,其中Ｇ＾－杆菌占８８．４％（Ｇ＾＋球中１１．６％。分离的病原菌除泰宁,万古霉外对其他临床应用的抗生素均具有相当离的耐药率。结论 医院肺部感染病原菌以Ｇ＾－杆菌占     

连续5 a临床常见非发酵菌分离率变化及耐药性分析

对中国医科大学附属盛京医院2004～2008年5a间非发酵菌的分离情况及其耐药性进行比较和分析,旨在为临床制定合理有效的抗感染治疗方案提供依据。采用琼脂扩散法药敏试验,测定5a间临床常见非发酵菌菌株的药敏,数据统计分析用WHONET5．4软件进行。5a间分离的非发酵菌在革兰阴性杆菌中的比率呈上升趋势,到2008年占革兰阴性杆菌的46．49％。非发酵菌的耐药率逐年升高,其中耐药最严重的是鲍曼不动杆菌。非发酵菌为医院感染的主要致病菌,且对抗菌药物呈多重耐药,临床医生应注重本地区、本治疗区的细菌耐药监测情况,合理选择抗生素,减少耐药菌出现的机会,采取有效措施减少医院内感染的发生和耐药菌在医院内的传播。     

L-赖氨酸产生菌FH128菌株的研究(Ⅰ)FH128菌株的选育及摇瓶发酵

以赖氨酸产生菌Ａ１１１（ＨＳ－、ＡＥＣｒ）为出发株,经化学诱变剂ＭＮＮＧ（Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍）及单氟醋酸处理获得单氟醋酸抗性突变株Ｆ７９,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐７．０％～７．５％,对糖转化率３８％～４０％,分别比Ａ１１１株提高约２５％及２０％。然后,再以Ｆ７９菌为亲株经ＭＮＮＧ及噻唑丙氨酸处理获得噻唑丙氨酸抗性突变株ＦＨ１２８,在适宜的培养条件下,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐８．５％～９．５％,最高产酸率１１％,对糖转化率４５％～５０％。在１６Ｌ自控发酵罐发酵,产Ｌ－赖氨酸盐酸盐１２％～１４％,对糖转化率４０％～４５％;在２０～１００ｍ３发酵罐发酵,产酸率为８．５％～９．５％,对糖转化率４０％～４２％,提取总收率８０％～８５％,成品（饲料级Ｌ－赖氨酸盐酸盐）质量符合国家标准（ＧＢ８２４５－８７）。ＦＨ１２８菌株遗传性能稳定,营养要求粗放,工艺较简单,便于工业化,二年前已应用于工业生产。     

非发酵菌的耐药性与临床对策

非发酵菌广泛存在于自然界,抗菌药物的使用及该菌在医院环境中广泛存在,使其成为医院内感染的主要病原菌。由于其对多种抗菌药物天然耐药,加上抗生素压力,临床分离菌的耐药率快速上升,尤其是鲍曼不动杆菌对碳青酶烯类的耐药率上升至50％以上,部分细菌出现对常用消毒剂耐药的现象。非发酵菌多为条件致病菌,宿主因素是影响其感染预后的重要因素。针对非发酵菌感染的治疗,碳青酶烯类仍是可选择的药物,多黏菌素、替加环素和舒巴坦及含舒巴坦制剂可根据不同细菌及药敏试验作为选择。如何控制非发酵菌感染无疑是对临床医师的挑战。     

甲基单胞菌Methylomonassp.GYJ3中甲烷单加氧酶还原酶组分的…

Ｍｅｙｌｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ＧＹＪ３菌的甲烷单加氧酶（ＭＭＯ）粗酶提取液经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ阴离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００凝胶过滤层析和ＤＥＡＥ－ＴＳＫｇｅｌ ＨＰＬＣ分离纯化出ＭＭＯ还原酶组分,经ＨＰＬＣ分析,纯度大于９５％,纯化倍数为４．４,加入至ＭＭＯ羟基化酶和调节蛋白Ｂ的体系中表现比活为２２８ｎｍｏｌ环氧丙烷每分钟毫克蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明的酶由     

野花生豆凝集素的化学修饰与荧光光谱研究

野花生豆凝集素（ＣＭＬ）经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００测得分子量为１０３．ＯｋＤ．用对二甲基氨基苯甲醛（ＤＡＢ）为显色剂,测得每个ＣＭＬ分子含有５．９个色氨酸残基．在ｐＨ５．１,含８ｍｏｌ／Ｌ脲的醋酸缓冲液中,Ｎ－溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）可修饰ＣＭＬ分子中的５．６个色氨酸（Ｔｒｐ）残基,同时使ＣＭＬ的凝血活性完全丧失．用焦碳酸二乙酯（ＤＥＰＣ）和Ｎ－乙酰顺丁烯酰胺（ＮＥＭ）分别修饰ＣＭＬ的组氨酸残基和半胱氨酸巯基后,ＣＭＬ的活性均无变化．ＣＭＬ在天然状态下荧光发射峰位于３３６ｎｍ处,用ＣＭＬ的专一性抑制糖Ｎ－乙酰半乳糖胺研究色氨酸的微环境,发现Ｎ－乙酰半乳糖胺可以淬灭ＣＭＬ中８８％的色氨酸残基萤光,Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ常数Ｋ＝１．７３Ｌ／ｍｏｌ．同时发现Ｎ－乙酰半乳糖胺能够保护ＣＭＬ,避免ＮＢＳ对ＣＭＬ的修饰作用,表明色氨酸可能是ＣＭＬ维待活性所必需,并直接参与和专一性抑制糖的结合,其微环境较为疏水．     

欧文氏菌和棒杆菌的属间融合研究*

研究了用原生质体融合技术获得欧文氏菌和棒杆菌的融合细胞。串联发酵Ｄ－葡萄糖产生２－酮基－Ｌ－古龙酸的第一步发酵菌株欧文氏菌ＳＣＢ２４７经０．８ｍｇ／ｍＬ溶菌酶酶解０．５ｈ后,原生质体的形成率和再生率分别为９９．８％和２７．８％。第二步发酵菌株棒杆菌ＳＣＢ３０５８经预处理后由１．３ｍｇ／ｍＬ溶菌酶酶解２ｈ,原生质体的形成率和再生率分别为９９．５％和５６．３％。用携带氨苄青霉素抗性标记的ＳＣＢ２４７和经热灭活的ＳＣＢ３０５８为亲本,在４０％ＰＥＧ６０００和０．２ｍｏｌ／Ｌ新生磷酸钙等适宜条件下融合,融合频率为３．６×１０~(－６)。在非选择和选择培养基上连续传代十几次后,对融合子的单菌形态、染色结果、菌落形态、色泽、总蛋白量、同工酶、发酵性能等方面与亲本进行了比较。结果表明,融合子确系棒杆菌和欧文氏菌的融合细胞。摇瓶发酵结果显示,所得的３８株稳定的融合子中约４０％能转化葡萄糖为维生素Ｃ前体２－酮基－Ｌ－古龙酸。     

欧文氏菌和棒杆菌的属间隔合研究

研究了用原生质体融合技术获得欧文氏菌和棒杆菌的融合细胞,串联发酵Ｄ－葡萄糖产生２－酮基－Ｌ－古龙酸的第一步发酵菌株欧文氏菌ＳＣＢ２４７经０．８ｍｇ／ｍＬ溶菌酶酶解０．５ｈ后,原生质体的形成率和再生率分别为９９．８％和２７．８％。第二步发酵菌株棒杆菌ＳＣＢ３０５８经预处理后由１．３ｍｇ／ｍＬ溶菌酶酶解２ｈ,原生质体的形成率和再生率分别为９９．５％和５６．３％,用携带氨苄青霉素抗性标记的ＳＣＢ２４７和     

香港新记载的三种蕨类植物

香港新记载的三种蕨类植物苏美灵（香港浸会学院生物系，香港九龙窝打老道２２４号）ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＯＦＦＥＲＮＳＩＮＨＯＮＧＫＯＮＧ￥ＳＵＭｅｉ－Ｌｉｎｇ（Ｍ．Ｌ．Ｓｏ）（ＢｉｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＨｏｎｇＫｏｎｇＢａｐｔｉｓｔＣｏｌｌｅｇ...     

L—赖氨酸产生菌FH128菌株的研究：（Ⅰ）FH菌株的选育及摇瓶发酵

以赖氨酸产生菌Ａ１１１（ＨＳ＾－,ＡＥＣ＾ｒ）为出发株,经化学诱变剂ＭＮＮＧ（Ｎ－’－硝基－Ｎ－亚硝基胍）及单氟醋酸处理获得单氟生突变株Ｆ７９,摇瓶发酵产Ｌ－赖氨酸盐酸盐７．０％－７．５％,对糖转化率３８％－４０％,分别比Ａ１１１株提高红２５％及２０％。     

引发下呼吸道感染的非发酵菌的菌群分布及耐药性分析

目的了解引发下呼吸道感染的非发酵菌的菌群分布及耐药性分析,为临床合理使用抗生素提供依据。方法对2011年1月至2013年9月深圳罗岗医院门诊及住院患者痰标本分离的非发酵菌的菌群分布及优势菌的耐药性进行回顾性分析。结果702株非发酵菌中铜绿假单胞菌（PA）362株,占51．6％,鲍氏不动杆菌（AB）158株,占22．5％;PA对NIT、CXM、SAM、AMP、CZO、CTF、CRO、SXT耐药率均在99．0％以上,对IPM、LVF和TZP耐药率均在15．0％以下;AB对NIT、CXM、AMP、CZO、CTT耐药率均为100％,对SAM、FEP、TOB、GEN、IPM、LVF和TZP耐药率均在15．0％以下;耐IPM的PA和AB的检出率分别为20．4％和11．4％;耐IPM的PA对NIT、CXM、SAM、AMP、CZO、CTT、CRO、SXT、1PM耐药率均为100％,对其余10种抗生素的耐药率在25．0％～84．0％;耐IPM的AB对NIT、CXM、AMP、CZO、CTT、CRO、SXT、ATM、PIP、IPM耐药率均为100％,对其余9种抗生素的耐药率在21．0％～90．0％。结论引发下呼吸道感染的非发酵菌以PA和AB为主且耐药现象严重,临床医师在选择抗菌药物前应重视病原学培养,根据药敏试验选择用药。     

栝楼种子中一种新型小分子核糖体失活蛋白——S—tric …

通过硫酸铵分级沉淀、ＣＭ－５２阳离子交换层析、Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－１００凝胶过滤和ＦＰＬＣ Ｍｏｎｏ－Ｓ离子交换层析等步骤,从栝楼种子中分离到一种核糖体失活蛋白－－Ｓ－ｔｒｉｃｈｏｋｉｒｉｎ,经１５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量为８ｋＤ左右,１３．５％聚丙烯酰胺凝胶酸性电泳结果显示其等电点在ｐＨ９．５左右。通过对大鼠肝核糖体作用的研究,表明Ｓ－ｔｒｉ－ｃｈｏｋｉｒｉｎ属于ＲＮＡ Ｎ－糖苷酶催化型     

126株铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性分析

目的调查分析象山县中医医院铜绿假单胞菌的临床分布及药敏情况,为临床合理选用抗生素提供可靠的依据。方法采集疑似患者的标本,进行分离、培养与鉴定。采用自动微生物鉴定／药敏分析仪进行鉴定及药敏试验,对2012年7月至2013年10月分离出的126株铜绿假单胞菌（包括21株黏液型铜绿假单胞菌）的分布及耐药性进行回顾性分析。结果126株铜绿假单胞菌临床主要分布情况：痰占80．2％,尿液占11．1％,脓液占7．1％,以呼吸道感染为主。对铜绿假单胞菌保持活性较强同时耐药率〈20％的抗生素有阿米卡星、妥布霉素、亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦,其中碳青霉烯类耐药率升至5％,原来被认为抗铜绿假单胞菌较为有效的喹诺酮类抗生素的耐药率也有了很大提升,左氧氟沙星耐药率升至33％。黏液型铜绿假单胞菌的体外抗菌药物敏感试验耐药性较弱,且明显弱于非黏液型铜绿假单胞菌的耐药性。结论铜绿假单胞菌为医院呼吸道感染的常见致病菌,对多种抗菌药物呈不同程度耐药。加强动态监测,合理使用抗菌药物,对铜绿假单胞菌感染的预防和药物治疗具有重要指导意义。