难免流产蜕膜组织遗传印记基因PEG10的表达

采用半定量逆转录聚合酶反应(RT-PCR)、原位杂交、免疫印记(Western blot)及免疫组织化学技术检测了36例难免流产患者蜕膜组织PEG10 (Paternally expressed gene 10) mRNA及蛋白的表达与分布, 并以36例同期正常早孕妇女为对照, 研究遗传印记基因在难免流产蜕膜组织中的表达, 探讨其在自然流产中的作用。RT-PCR结果显示, PEG10在两组蜕膜组织中均有表达, 正常妊娠组平均表达水平为0.5994±0.049, 难免流产组为0.1783±0.037, 两组比较具有显著性差异(P<0.05)。原位杂交、免疫组化及Western blot分析也显示PEG10的表达规律与RT-PCR结果相吻合。研究结果表明, 遗传印记基因PEG10维持一定水平的表达对早期胚胎发育和正常妊娠的维持有重要意义, 而其表达下调可能是导致难免流产的原因之一。     

稽留流产患者血清和绒毛中HIF-1alpha和VEGF表达水平及其相关性分析

目的：探讨缺氧诱导因子-1alpha（HIF-1alpha）和血管内皮生长因子（VEGF）在稽留流产患者血清和绒毛中的表达水平及其相关性 分析。方法：选择2014 年8 月至2015 年8 月我院妇产科76 例稽留流产患者为观察组及行人工流产的60 例正常早产孕妇为对 照组;根据患者稽留流产时间将稽留流产患者分为稽留时间<2 周组（12 例）,2~4周组（33 例）,>4周组（31 例）;采用酶联免疫吸 附（ELISA）和免疫组化SP 法检测并分析患者血清与绒毛中HIF-1琢与VEGF的表达水平。结果：观察组血清中HIF-1alpha与VEGF 表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组和对照组绒毛VEGF 和HIF-1-alpha均表达,其中VEGF 主要表达 于滋养层细胞细胞质和细胞间质,HIF-1琢主要表达于滋养层细胞的细胞核与细胞质,且观察组患者绒毛HIF-1-alpha与VEGF 表达水 平均显著低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;不同稽留时间患者绒毛HIF--alpha与VEGF表达水平间比较,差异均无统计学意 义（P>0.05）观察组患者血清HIF-1alpha与VEGF的表达水平呈现正相关关系（r=0.601;P<0.05）;且绒毛HIF-1琢与VEGF的表达水平 也呈现正相关关系（r=0.401;P<0.05）。结论：HIF-1琢和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是稽留流产的发生的重要原因,临床 上可以通过检测患者血清和绒毛组织中HIF-1琢和VEGF的水平,有针对性的对患者进行监护和治疗,预防稽留流产的发生。     

印记基因PEG10 在葡萄胎组织中的表达以及意义

目的:通过免疫组化方法,探讨印记基因PEG10在葡萄胎组织中的表达及其在早期鉴别葡萄胎妊娠中的应用价值。方法:选取经病理组织学诊断为完全性葡萄胎、部分性葡萄胎、正常早孕、难免流产的标本共计156例,采用免疫组织化学技术检测PEG10在其中的表达,研究遗传印记基因PEG10在葡萄胎妊娠以及非葡萄胎妊娠中的表达。结果:PEG10在四组蜕膜组织中均有表达,在难免流产组呈弱阳性表达,在正常早孕组呈弱阳性和中度阳性表达,在部分性葡萄胎组中呈中度阳性和强阳性表达,在完全性葡萄胎组中呈强阳性表达。PEG10在葡萄胎妊娠组表达明显增多于非葡萄胎妊娠组,两组比较具有显著性差异(P0.01),部分性葡萄胎组表达增多于难免流产组,两组比较差异有显著性(P0.05)。结论:遗传印记基因PEG10在葡萄胎组织中的表达明显高于正常早期妊娠和难免流产组,PEG10基因表达上调与葡萄胎的发生可能有重要关系,是否可将其用于病理诊断鉴别困难时的辅助手段。     

SSTR-2、E-cad与不明原因的反复自然流产相关性研究

目的:研究生长抑素2型受体(SSTR2)、E-钙粘附素(E-cad)与不明原因的反复自然流产相关性。方法:选取2011年1月到2014年12月我院收治的不明原因反复自然流产患者60例(研究组),另选同期早期正常孕妇且准备流产者60例(对照组),应用免疫组化技术检测两组蜕膜组织中的SSTR2和E-cad表达,并进行比较。结果:研究组蜕膜组织中SSTR-2阳性细胞平均光密度显著高于对照组,而E-cad阳性细胞平均光密度显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05);研究组蜕膜组织中SSTR-2与E-cad水平呈负相关关系,对照组蜕膜组织中SSTR-2与E-cad水平呈正相关关系(P0.05)。结论:蜕膜组织中SSTR-2高表达与E-cad低表达可能与不明原因的反复自然流产有关。     

Rictor对小鼠基质细胞蜕膜化的影响及其在人自然流产子宫蜕膜组织中的表达

该研究探讨Rictor及SGK1对小鼠基质细胞蜕膜化的影响及其在人自然流产子宫蜕膜组织中的表达。分离和培养小鼠基质细胞,siRNA沉默小鼠基质细胞Rictor基因并人工诱导蜕膜化,检测Rictor和SGK1的蛋白及mRNA表达情况,并检测蜕膜化标志物Dtprp mRNA的水平;此外,过表达SGK1,检测Dtprp mRNA的水平。选取妊娠8～10周无菌新鲜自然流产及正常人工流产的蜕膜组织标本作为实验研究组(自然流产组,n=17)及正常对照组(正常妊娠组,n=34);分别用Western blot、免疫组织化学、Real-time PCR检测Rictor及SGK1的蛋白和mRNA表达水平。结果表明,沉默Rictor基因后,Rictor及SGK1的蛋白和mRNA表达水平均显著降低,同时蜕膜化指标Dtprp mRNA也显著降低,而过表达SGK1后,蜕膜化指标Dtprp mRNA较前升高且差异有统计学意义。与正常妊娠组相比,Rictor和SGK1的蛋白及mRNA表达水平在自然流产组明显降低。该研究得出,Rictor可通过影响SGK1的表达来抑制基质细胞蜕膜化;Rictor和SGK1在自然流产组的表达均显著低于正常组,从而可能成为流产发生的原因之一。     

血清妊娠相关血浆蛋白A在诊断异常妊娠中的临床意义

目的:探讨血清妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)在诊断异常妊娠中的临床意义,分析其与异常妊振的关系。方法:选取299例5~13周的正常早孕妇为正常早孕组,同期选取稽留流产86例,先兆流产54例,异位妊娠76例为异常妊娠组,用酶联免疫吸附试验(ELASA)测定两组受试者的血清PAPP-A水平,分析两组受试者各个孕周内的血清PAPP-A水平的差异。结果:稽留流产孕妇在各个孕周内(9~13周)的血清PAPP-A水平显著低于同孕周内正常早孕孕妇(t值分别为9.500,8.113,3.511,9.538,8.504,P值均0.05);稽留流产孕妇总的平均血清PAPP-A水平亦低于常早孕孕妇(t=3.651,P值均0.05);异位妊娠孕妇在各个孕周内(9~13周)的血清PAPP-A水平显著低于同孕周内正常早孕孕妇(t值分别为7.976,9.030,9.941,11.625,14.079,12.569,P值均0.05),异位妊娠孕妇总的平均血清PAPP-A水平亦低于常早孕孕妇(t=28.168,P值均0.05);先兆流产孕妇(除孕8周)与正常早孕妊娠血清PAPP-A水平比较无显著统计学意义。结论:血清PAPP-A水平在异常妊娠如异位妊娠、稽留流产中显著降低,可作为诊断异位妊娠、稽留流产及先兆流产辅助诊断的生物学指标。     

稽留流产患者血清和绒毛中HIF-1α和VEGF表达水平及其相关性分析

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产患者血清和绒毛中的表达水平及其相关性分析。方法:选择2014年8月至2015年8月我院妇产科76例稽留流产患者为观察组及行人工流产的60例正常早产孕妇为对照组;根据患者稽留流产时间将稽留流产患者分为稽留时间2周组(12例),2~4周组(33例),4周组(31例);采用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫组化SP法检测并分析患者血清与绒毛中HIF-1α与VEGF的表达水平。结果:观察组血清中HIF-1α与VEGF表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组和对照组绒毛VEGF和HIF-1α均表达,其中VEGF主要表达于滋养层细胞细胞质和细胞间质,HIF-1α主要表达于滋养层细胞的细胞核与细胞质,且观察组患者绒毛HIF-1α与VEGF表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);不同稽留时间患者绒毛HIF-1α与VEGF表达水平间比较,差异均无统计学意义(P0.05)观察组患者血清HIF-1α与VEGF的表达水平呈现正相关关系(r=0.601;P0.05);且绒毛HIF-1α与VEGF的表达水平也呈现正相关关系(r=0.401;P0.05)。结论:HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是稽留流产的发生的重要原因,临床上可以通过检测患者血清和绒毛组织中HIF-1α和VEGF的水平,有针对性的对患者进行监护和治疗,预防稽留流产的发生。     

干细胞相关因子在子宫内膜息肉中的表达

探讨ipo13、c-kit、CD146、bcl-2和bax在子宫内膜息肉(endometrial polyp,EP)和正常内膜组织中的表达差异及临床意义。收集本院2010年3-7月行宫腔镜手术取得的40例子宫内膜息肉(病例组)与40例正常内膜组织(对照组)。采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)检测ipo13、c-kit、bcl-2和bax mRNA的表达;免疫组织化学S-P法检测ipo13、CD146、bcl-2和bax蛋白的表达。无论在月经周期的增生期或分泌期,EP中ipo13、c-kit、CD146和bax mRNA和蛋白的表达均低于同期正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(P<0.05),bcl-2均比同期正常子宫内膜增加,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜干/祖细胞活性异常和子宫内膜凋亡减少与子宫内膜息肉发病有关,其中子宫内膜干/祖细胞活性异常使内膜凋亡减少可能是EP发病的主要因素。     

原癌基因C-MET在自然流产蜕膜中的表达降低

为探讨原癌基因C-MET在胚胎着床中的作用,本实验分别采用实时荧光定量PCR,原位杂交和免疫荧光化学方法检测C-MET的mRNA及其蛋白在正常妊娠人工流产子宫蜕膜和自然流产蜕膜中的表达情况;进一步采用围着床期小鼠(d3)单侧宫角注射C-MET多克隆抗体,观察胚胎着床变化。结果显示C-MET基因和蛋白在正常妊娠蜕膜组织中的表达量显著高于自然流产蜕膜组织(P0.01),且主要分布在蜕膜基质细胞胞浆和胞核中。围着床期小鼠单侧宫角注射C-MET多克隆抗体后,该侧多个胚胎发生流产。该结果提示原癌基因C-MET可能在胚胎着床过程中发挥了重要作用,其表达降低可能通过某些途径诱发自然流产。     

胎儿稽留流产与染色体异常的关系及其影响因素分析

目的：探讨B超联合FISH实验室诊断技术分析胎儿稽留流产与染色体非整倍体关系并对其他影响因素进行综合分析。方法：采用FISH技术对广西267例B超诊断为稽留流产孕妇的胎儿绒毛组织行13,16,18,21,22,X,Y染色体数目检测,荧光显微镜下观察结果;采用SPSS13．0对相关数据进行统计分析。结果：267例稽留流产胎儿绒毛组织中,染色体数目异常95例,异常率35．6％,数目异常以三体最常见,其次为四体,少见部分单体;异常病例样本中存在多种染色体混合嵌合体现象,如混合嵌合三体（2n＋1／2n）,混合嵌合四体（2n＋2／2n）,混合嵌合单倍体、三体、四体（2n-1／2n＋l／2n＋2／2n）等;稽留流产与患者年龄、流产史、孕周具有显著相关性。结论：染色体数目异常与染色体混合嵌合均是稽留流产的重要原因,同时稽留流产发生与患者高龄、多次流产史、早期妊娠密切关系。     

HGF和EZH2在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)、果蝇zeste基因增强子2(EZH2)在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:选取2016年10月到2018年1月期间在新疆医科大学附属肿瘤医院接受治疗的宫颈癌患者50例,收集其手术切除的病理组织作为宫颈癌组的检测标本,另选取同期在我院收治的子宫肌瘤患者,收集其行全子宫切除术时切除的宫颈组织,其中上皮内瘤样病变(CIN)组织和正常宫颈组织各50例,CIN组织作为CIN组的检测标本,正常宫颈组织作为对照组的检测标本。比较宫颈癌组、CIN组和对照组标本中HGF和EZH2的阳性表达情况。分析HGF和EZH2的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系,分析宫颈癌组织中HGF、EZH2表达的相关性。结果:各组标本中的HGF和EZH2的阳性表达率整体比较差异均有统计学意义(P0.05),宫颈癌组、CIN组的HGF和EZH2的阳性表达率均明显高于对照组,且宫颈癌组EZH2的阳性表达率高于CIN组(P0.05)。宫颈癌组织中HGF和EZH2的表达与年龄、肿瘤类型、肿瘤大小无关(P0.05),临床分期II期、有淋巴结转移、病理分级G3的宫颈癌组织中HGF和EZH2的阳性表达率高于临床分期I期、无淋巴结转移、病理分级G1+G2的宫颈癌组织(P0.05)。经Spearman相关分析显示,宫颈癌组织中HGF与EZH2表达呈正相关(P0.05)。结论:HGF和EZH2在宫颈癌组织中呈高表达,且其表达水平与临床分期、淋巴结转移、病理分级有关。     

自然流产患者绒毛和蜕膜中ZEB1的差异性表达及意义

目的：检测锌指结合蛋白（zincfingerE—box—bindingprotein,ZEB1）在自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的差异性表达。方法：选取2010年3月到2011年3月在我院妇产科门诊进行人工流产的患者,分为正常人工流产（对照组50例）和自然流产（实验组50例）两组,两组年龄和孕周间差异无统计学意义（P〉0．05）。用荧光实时定量PCR（qRT—PCR）技术检测在绒毛和蜕膜组织中ZEBlmRNA的表达量。结果：自然流产患者绒毛（0．835±0．047）中ZEB1的表达量低于对照组（1．942±0．095）,自然流产患者蜕膜（0．65±0．058）中ZEBl的表达量低于对照组（1．13±0．084）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：绒毛及蜕膜组织中ZEB1的异常表达可能参与自然流产的发生发展过程。     

孕早期亚临床甲状腺功能减退与流产发生的相关性

目的:探讨孕早期亚临床甲状腺功能减退与流产发生的相关性。方法:2017年2月至2019年选择在本院进行建档的孕早期孕妇120例,检测血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)含量,判断亚甲减发生情况。调查所有孕妇的流产等妊娠结局情况并分析相关性。结果:在120例孕妇中,发生亚甲减18例(亚甲减组),发生率为15.0%。亚甲减组的年龄、孕周、孕次、产次、心率、收缩压、舒张压等指标与非亚甲减组对比差异无统计学意义(P>0.05)。亚甲减组的血清TSH含量高于非亚甲减组,FT3值低于非亚甲减组(P<0.05),两组FT4值对比差异无统计学意义(P>0.05)。亚甲减组的流产发生率为38.9%,显著高于非亚甲减组的2.9%(P<0.05)。亚甲减组的早产、前置胎盘、胎膜早破、产后出血、巨大儿、低体重儿、新生儿窒息等发生率也显著高于非亚甲减组(P<0.05)。在120例孕妇中,Pearson相关分析法显示流产与亚甲减、血清TSH、FT3值都存在相关性(P<0.05)。结论:孕早期亚甲减在临床上比较常见,可导致流产发生率增加,也可增加妊娠不良结局的发生几率,亚甲减与流产存在正向相关性。     

Role of uterine natural killer cells in angiogenesis of human decidua of the first-trimester pregnancy

Decidualization is accompanied by extensive angiogenesis, which is an essential step in the maturation of new blood vessels in mammalian pregnancy. The purpose of this study was to determine a distribution of uNK cells (CD56⁺ uNK or CD56^bright cells) in human decidua of the first-trimester pregnancy, and investigate whether uNK cells in human decidua could express vascular endothelial growth factor (VEGF-A) and/or angiopoietin2 (Ang2). Our immunohistochemical staining results demonstrated that a great amount of uNK (CD56⁺) cells scattered throughout the decidual stroma and near endometrial gland and spiral vessels in human decidua. The protein expression of VEGF-A and Ang2 was detected in decidual stroma cells, capillary endothelial cells and glandular cells in tissue specimens. There was a positive correlation between microvessel density (MVD) and the number of the CD56-positive uNK cells in decidual stroma, and also between the number of the CD56-positive uNK cells and VEGF-A protein expression in the tissue. In addition, we found that uNK cells in human decidua could express VEGF-A mRNA, but not Ang2 mRNA, in isolated uNK cells in human decidua of the first-trimester gestation by combination of LCM and Nested-PCR. Our study indicated that uNK cells, through expressing VEGF-A, may play an important role in the angiogenic response at the time of human decidualization and early placenta development.     

检测人老化胎盘组织中miR-182的表达

目的：通过检测miR-182在正常妊娠各期、老化胎盘组织中的表达,探讨miR-182在胎盘发育过程中的调控作用,并同时探讨miR-182与血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的相关性,为寻找胎盘老化特别是胎盘提前老化发生机制提供依据。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测42例标本（早孕绒毛和胎盘组织）中miR-182的表达情况。结果：miR-182在正常妊娠早孕绒毛组织、正常妊娠胎盘组织及老化胎盘组织中均表达。miR-182表达水平各个组间比较：早期与中期妊娠组、中期与晚期未足月妊娠组、晚期未足月与晚期足月妊娠组有显著差异（P〈0.05）;胎盘老化组与正常妊娠早期、中期、晚期未足月、晚期足月组有极显著差异（P〈0.01）;妊娠的早期、中期、晚期,miR-182的表达逐渐增多,老化胎盘组织中miR-182高水平表达。结论：miR-182与胎盘老化的发生高度相关,可能在胎盘老化机制中起重要的调控作用。     

Glycodelin protein and mRNA is downregulated in human first trimester abortion and partially upregulated in mole pregnancy.

Glycodelin (Gd) is a major reproductive glycoprotein and a mediator for immunomodulatory effects directed to cellular, humoral, and innate immunity. Human pregnancy depends on a diversity of physiological processes including modulation of the maternal immunosystem. We evaluated the expression of Gd protein and mRNA in first trimester decidual tissue of normal pregnancies and spontaneous abortion and hydatidiform moles. Furthermore, in vitro experiments on endometrial cancer cells to analyze the effect of human chorionic gonadotropin (hCG) on Gd regulation were performed. In decidual tissue of abortion patients, Gd expression was significantly decreased compared with normal gestation, which was confirmed by in situ hybridization. In mole pregnancy, an upregulation of Gd in the first 8 weeks of pregnancy was present. Gd is a main product of decidual tissue in the first trimester of human pregnancy. Reduced Gd expression in abortive pregnancy could lead to an increased activation of the maternal immunosystem, thus causing rejection of the developing fetus. Moreover, Gd expression in endometrial cancer cells in vitro could be stimulated by addition of hCG. Therefore, we speculate that hCG could be one of the factors regulating Gd expression because hCG is downregulated in women with abortion and upregulated in mole pregnancy. In addition, we found a positive feedback loop in Gd and hCG expression in human pregnancy.     

E-cadherin在人输卵管妊娠蜕膜组织中的表达

目的探讨E-cadherin在人输卵管妊娠蜕膜组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测输卵管妊娠蜕膜组织中E-cadherin的表达,同时以正常输卵管粘膜为对照。结果E-cadherin在输卵管妊娠组中的表达低于正常输卵管组,差异有显著性(P<0.05)。结论E-cadherin的低表达可能是引起人输卵管妊娠的因素之一。