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苏云金芽孢杆菌的电穿孔及其工程菌的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
本文对苏芸金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,Ｂｔ)和蜡状芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ,Ｂｃ)等部分菌株的电穿孔转化进行了研究 ,主要从电穿孔的供体质粒和受体菌株等方面讨论了各种因素对该方法的影响。同时利用电穿孔方法对部分Ｂｔ的高效野生株进行遗传改良 ,希望获得含有ｃｒｙ1Ａｃ和ｃｒｙ1Ｃ高效基因组合的对鳞翅目棉铃虫、甜菜夜蛾都有效的广谱工程株。利用质粒 ｐＳＢ1 40 2 (ｃｒｙ1Ｃ) ,ｐＡＭＹ(ｃｒｙ1Ａｃ) ,ｐＮＱ1 2 2 (Ｃｍｒ)对所有的供试菌株进行电穿孔转化 ,不同菌株表现出不同的转… 相似文献
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苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白与DNA分子的相互作用 总被引：2，自引：0，他引：2
苏云金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,简称Ｂｔ)在形成芽孢的同时能够产生伴孢晶体 ,其中含有一种或几种杀虫晶体蛋白 (ＩＣＰｓ,ＩｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌＣｒｙｓｔａｌＰｒｏｔｅｉｎｓ) ,即δ 内毒素[1] 。伴孢晶体进入敏感昆虫的消化道后发生溶解并释放出 2 7～ 1 40ｋＤ的原毒素。在中肠蛋白酶的作用下 ,原毒素被激活为 2 3～ 70ｋＤ的毒性多肽[2～ 4 ] 。随后毒素与中肠刷状缘膜泡 (ＢＢＭＶ ,ＢｒｕｓｈＢｏｒｄｅｒＭｅｍｂｒａｎｅＶｅｓｉｃｌｅ)上的特异受体发生结合并且在细胞膜上形成孔道 ,破坏细胞… 相似文献
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198 9年自云南昆明市石林的红棕壤中分离到数株苏云金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎ ｓｉｓ,Ｂｔ)菌株[1] ,对其中的一株ＹＫ30 0 4进行了生物学特性、杀虫特性研究及分类鉴定。1 材料与方法1.1 供鉴定的Ｂｔ菌株由云南昆明市石林的红棕壤中分离的苏云金芽孢杆菌ＹＫ30 0 4菌株。1.2 标准Ｂｔ菌株血清型Ｈ1 Ｈ4 1、Ｈ4 4 Ｈ55及Ｈ57 Ｈ69标准Ｂｔ菌株由法国巴斯德研究院ＤｒＬｅｃａｄｅｔ提供 ,其余为本实验室保存。1.3 生物测定用昆虫小菜蛾 (Ｐｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ) 3龄幼虫 ;斜纹夜盗蛾 (Ｐｒ… 相似文献
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苏云金芽孢杆菌Cyt蛋白研究进展 总被引：5，自引：1，他引：4
苏云金芽孢杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,简称Ｂｔ)是目前世界上应用最广泛、最成功的微生物杀虫剂 ,也是公认的无公害生物农药。苏云金芽孢杆菌最主要的杀虫活性物质是杀虫晶体蛋白 (ＩｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌＣｒｙｓ ｔａｌＰｒｏｔｅｉｎｓ,ＩＣＰｓ) ,包括晶体蛋白 (Ｃｒｙ)和Ｃｙｔ蛋白 (Ｃｙｔ)两大类。这两类蛋白在氨基酸序列及其基因同源性上相距甚远 ,但它们均能在靶标害虫中肠内被激活成毒素 ,并在昆虫中肠细胞膜上形成孔道 ,进而引起中肠细胞胶样渗透裂解 (ｃｏｌｌｏｉｄ ｏｓｍｏｔｉｃｌｙｓｉｓ) ,最… 相似文献
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1 植物名称 黎豆 (Ｓｔｉｚｏｌｏｂｉｕｍｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ) ,别名猫豆、狗爪豆。2 材料类别 无菌种子苗。3 培养条件 基本培养基为ＭＳ。种子萌发及壮苗培养基 :(1 )ＭＳ Ｖｃ 0 .5ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) 0 .1 %活性炭 ;诱导丛芽培养基 :(2 )ＭＳ 6 ＢＡｌ.0 ＮＡＡ 0 .1 Ｖｃ 0 .5 ;诱导愈伤组织培养基 :(3 )ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5 ＮＡＡ 0 .0 5 ,(4)ＭＳ 2 ,4 Ｄ 0 .5 ,(5 )ＭＳ 2 ,4 Ｄ 1 .0 ,(6 )ＭＳ 2 ,4 Ｄ 2 .0 ;分化培养基 :(7)ＭＳ 6 Ａ3 .0 Ｖｃ 0 .5 ＮＡＡ 0 .0 5 ;芽体生长及诱导生根培养基… 相似文献
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1 植物名称 粗壮女贞 (Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍｒｏｂｕｓｔｕｍ) ,又名“苦丁茶”。2 材料类别 胚、下胚轴。3 培养条件 基本培养基 :Ｌｌｏｙｄ和ＭｃＣｏｗｎ培养基 (Ｌｌｏｙｄ ,1 980 ) 蔗糖 1 5 % 琼脂 0 8% (以下简称ＬＭｃ)。胚萌发培养基 :(1 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 0 5ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 0 1 ＧＡ 0 1 ;(2 )ＬＭｃ 6 ＢＡ1 0。愈伤组织诱导培养基 :(3 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 1 0 2 ,4 Ｄ 0 4。芽分化培养基 :(4)ＬＭｃ 6 ＢＡ 2 0 ＩＢＡ 0 0 2。芽增殖培养基 :(5 )ＬＭｃ 6 ＢＡ 0 4 ＮＡＡ 0 0 2 … 相似文献
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高毒广谱杀虫Bt工程菌TnY 总被引：3，自引：0，他引：3
目前 ,农作物害虫在不同程度上对Ｂｔ制剂产生了抗性或不够敏感 ,在对这些害虫有效的Ｂｔ制剂中均不含Ｃｙｔ1Ａａ蛋白。含有ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因的天然苏云金杆菌 ,这两个基因均位于大质粒上。而通过质粒转移或ＩＣＰｓ的共表达构建苏云金杆菌重组菌株以期扩大Ｂｔ杀虫谱和增强毒力 ,常因质粒的不稳定性和质粒间的排斥性而受到一定限制。本研究利用转座子衍生载体ｐＴＶ1ＴＳ将ｃｙｔ1Ａａ和ｃｒｙ1 1Ａａ基因导入新分离Ｂｔ菌株Ｓ1 84的染色体中 ,并使之缺失转座酶而获得遗传稳定的初始工程菌Ｂｔ ＴｎＸ。在筛选工程菌过程中 … 相似文献
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转双基因抗虫棉对棉铃虫的抗性 总被引：10，自引：4，他引：6
将苏云金杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,Ｂｔ)杀虫晶体蛋白 (ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌｃｒｙｓｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ ,ＩＣＰ)基因转入棉花植株中获得的抗虫棉花 (下略为Ｂｔ棉 ) ,为棉花害虫综合防治开辟了新的途径。Ｂｔ棉除具有丰产性、纤维品质好和对靶标害虫的良好控制作用等特性外 ,更重要的应用价值在于其高杀虫效果与维护生态环境的协调发展的良性作用上[1] 。但研究结果已表明 ,害虫对ＢｔＩＣＰ的抗性适应 ,将严重威胁Ｂｔ棉的使用寿命[2 ] 。已有的报道证明 ,将两种不同作用机制的杀虫基因转入植物并同时表… 相似文献
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ＴｈｅｅｎｖｅｌｏｐｅｐｒｏｔｅｉｎｏｆｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ(ＨＢＶ)ｃｏｎｓｉｓｔｓｏｆｔｈｒｅｅｐｒｏｔｅｉｎｓ:ｓｍａｌｌ(Ｓ),ｍｉｄｄｌｅ(Ｍ)ａｎｄｌａｒｇｅ(Ｌ)[1].ＴｈｅＳｐｒｏｔｅｉｎｃａｒｒｉｅｓａｌｌｔｈｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｃｅｌｌｕｌａｒｌｉｐｉｄｓｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ,ｓｕｂｖｉｒａｌｐａｒｔｉｃｌｅｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｓｅｃｒｅｔｉｏｎ.Ｉｔｈａｓｂｅｅｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｓａｃａｒｒｉｅｒｔｏｅｘｐｒｅｓｓｆ… 相似文献
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1 植物名称 败酱 (Ｐａｔｒｉｎｉａｓｃａｂｉｏｓａｅｆｏｌｉａ) ,民间称为苦菜。2 材料类别 一年生败酱的茎。3 培养条件 基本培养基为ＭＳ。 (1 )芽诱导培养基Ⅰ :ＭＳ ＢＡ 0 .5ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＫＴ0 .5 ＩＢＡ 0 .5 ;芽诱导培养基Ⅱ :ＭＳ ＢＡ 0 .5 ＫＴ 1 .0 ＩＢＡ 1 .0。 (2 )生根培养基 :ＭＳ ＢＡ 0 .2 ＩＢＡ 2 .0。培养基含蔗糖 3 0 ｇ·Ｌ- 1 ,琼脂 0 .8% ,ｐＨ5 .8,培养温度 (2 5± 1 )°Ｃ ,光照度 1 2 0 0～ 1 40 0ｌｘ ,光照 1 4ｈ·ｄ- 1 。4 生长与分化情况 取败酱嫩茎用自来水冲洗干净 ,… 相似文献
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大花蕙兰的组织培养和快速繁殖 总被引：19，自引：1，他引：18
1植物名称 大花蕙兰 (Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｆａｂｅｒｉ )。2 材料类别 幼芽、幼根。3 培养条件 以ＶＷ和 1 2ＭＳ为基本培养基。诱导圆球茎培养基 :(1 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 1 .2 ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭 ;(2 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 2 .0 0 .3 %ＣＨ ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭。圆球茎增殖培养基 :(3 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 0 .2 0 .2 %活性炭。壮苗生根培养基 :(4) 1 2ＭＳ ＧＡ1 .0 ＮＡＡ 0 .1 1 5 %香蕉泥 ;(5 ) 1 2ＭＳ… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2001,13(5)
20 0 1 :Ｊａｎｕａｒｙ 17～ 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ(70 3 ) 683～ 3 619(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0～ 2 3 ,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩ… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2002,14(2)
20 0 1 :Ｊａｎｕａｒｙ 17～ 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ( 70 3) 6 83～ 36 19(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0～ 2 3,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩ… 相似文献
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《天然产物研究与开发》2001,13(6)
20 0 1 :Ｊａｎｕａｒｙ 17～ 2 0 ,2 0 0 1:ＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＰｈａｒｍａｃｙＣｈａｉｎＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ,ＳｃｏｔｔｓｄａｌｅＰｒｉｎｃｅｓｓＲｅｓｏｒｔ,Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ ,Ａｒｉｚｏｎａ .Ｃｏｎｔａｃｔ:ＮＣＰＡＥｘｈｉｂｉｔｓｍａｎａｇｅｒ( 70 3) 6 83～ 36 19(ｆａｘ) .Ｆｅｂｒｕａｒｙ 2 0～ 2 3,2 0 0 1:ＥＸＰＯ 2 0 0 1,ＮａｔｉｏｎａｌＣｏｍｍｕｎｉｔｙＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＣｈａｉｎＤｒｕｇＭａｒｋｅｔｉｎｇＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ,ＮａｔｉｏｎａｌＨｏｍｅＩ… 相似文献
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1 引言苏云金杆菌 (Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ简称Ｂｔ)是目前世界上产量最大、应用最为成功的微生物杀虫剂 ,除了已筛选出多种Ｂｔ菌株直接发酵培养外 ,还培育出转基因工程菌及转基因植物 ,使Ｂｔ的使用范围大为扩大。Ｂｔ在形成芽孢时产生的伴孢晶体是Ｂｔ杀虫活性的主要来源 ,它可能由几种晶体蛋白即δ -内毒素组成 ,包括Ｃｒｙ和Ｃｙｔ两大类。一般认为 ,δ -内毒素的作用过程要经溶解、酶解活化、与受体结合、插入和孔洞或离子通道形成等五个环节[1] ,涉及到多种毒素和作用位点 ,单一因素的改变对其敏感性影响不大 … 相似文献
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《中国生物工程杂志》2002,(4)
4ｔｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＣｏｎｆｅｒｅｎｃｅｏｎＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＡｎｉｍａｌｓＮｏｖ 2 6- 2 9,2 0 0 2 Ｓｈａｎｇｈａｉ,Ｃｈｉｎａ大会主席 :Ｄｒ.ＷｅｎｈａｏＸｕ (ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＫａｎｓａｓＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒ)胡以平教授 (中国人民解放军第二军医大学转基因动物研究所 )大会副主席 :成国祥 教授 (上海转基因研究中心主任 )大会主题 :ＴｈｅＰｏｓｔ ｇｅｎｏｍｉｃＥｒａｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＴｅｃｈｎｏｌｏｇ… 相似文献
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对９５１个样品分离鉴定,有７４７个样品含芽孢杆菌,有菌率为７８．５５％．共分离得到芽孢杆菌１１３８株,其中苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ,简称Ｂ．ｔ）１４３株,占１２．５％;球形芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ,简称Ｂ．ｓ）１１株,占０．９７％;其他芽孢杆菌９８４株,占８６．４０％．从芽孢杆菌中选出产生晶体、苏云金素或磷酸酯酶Ｃ（ＰｈｏｓｐｈａｌｉｐａｓｅＣ,简称ＰＬＣ）的毒素菌株１６８株,其中Ｂ．ｔ占１４３株,Ｂ．ｓ有５株,其他芽孢杆菌１０株．在产毒素菌株中,经测定有１２０株菌对供试昆虫毒性达标．占７７．９２％．不同菌株的杀虫毒素、杀虫范围和毒力各异,认为这种差异取决于毒素和虫种两方面的特异性． 相似文献