典型籼粳杂种不育性的分子标记分析及其遗传基础

对典型籼粳杂种育性遗传基础的研究是快速进行广亲和系培育的前提。以回交群体Balilla/南特号∥Balilla为育性基因的分析群体,利用SSR标记研究了该群体中控制小穗育性和花粉育性的基因位点,对于小穗育性共检测到2个QTLs,Qsptf1和qSPTF6,分别位于第1和第6染色体上,其加性效应分别为13．501和—16．414。根据前人的研究结果,以及qSPTF6在第6染色体上所处的位置,可以推断qSPTF6即为S—5位点。在花粉育性的QTLs检测中,发现在第7和第9染色体上有两个QTLs,qPLLN7和qPLLN9,其加性效应分别为—12．003和—11．012,可以分别解释表型变异的12．9％和10．3％。位点的互作分析表明,在该研究群体中,存在大量的位点互作影响小穗育性和花粉育性,在0．005显著水平上,检测到61对和51对位点互作分别影响小穗育性和花粉育性。说明籼粳杂种的不育性除了主效基因的单独作用以外,位点之间的互作,即上位性也是一重要的遗传因素。     

小麦冠层叶片性状基因效应的岭估计

选用6套具有P_1、P_2、B_1、B_2、F_1和F_2的六世代遗传材料,采用K．Mather提出的六参数遗传模型,用岭回归方法估算了小麦冠层叶片性状的基因效应．结果表明：各冠层叶片性状都存在1～3种上位性效应,遗传机制较为复杂,其遗传模式可分为加性—显性—上位性、以加性为主的加性—显性—上位性和显性—上位性3种,还讨论了现有几种常用遗传模式的复共线性,以及对冠层叶片性状的选择．     

光（温）敏核雄性不育水稻在广州的育性表现及光温反应特性研究

对１２个光（温）敏核雄性不育水稻在广州的育性测定表明：１２个不育系在夏季都有一个不育期,但不育性稳定程度不尽相同,以Ｗ６１１１ｓ和Ｗ６１５４ｓ育性波动较大．其中９个不育系在早晚季各有一个长短不一的可育期,ＫＳ—９仅见第二可育期,ＫＳ—１４则未见可育期．在晚季,７００１ｓ,Ｎ５０８８ｓ,农垦５８ｓ和８９０２ｓ可育恢复较好,可育期明显,而其余７个不育系仅能部分恢复正常．光温处理表明：７００１ｓ,Ｎ５０８８ｓ,８９０２ｓ,农垦５８ｓ和８９１２ｓ为光敏型,长日条件下不育性受温度影响不大,但短日条件下不育性恢复程度与温度有一定关系．Ｗ６１５４ｓ和Ｗ８０１３ｓ,培矮６４ｓ,ＫＳ—１４和ＫＳ—９为温敏型．Ｗ６１５４ｓ和Ｗ８０１３ｓ转育起始温度在２４—２７℃间,ＫＳ—１４和培矮６４ｓ则在刀一２４℃间．     

建宁莲子糖蛋白的分离、纯化及清除自由基作用

从红花建莲(Nelumbo nucifera Gacrtn.Fujian)的莲子中提取出具有生物活性的糖蛋白(GLP),并进行清除自由基作用的研究。用60％(NH^4)2SO4饱和溶液沉淀蛋白质,经ConA-Sepharose 4B亲和层析校分离,SephadexG-150凝胶层析校纯化,得到2个组分的糖蛋白,分子量分别为25kD的GLP-I和92．5kD的GLP—E,后者为其主要成分。GLP中蛋白质含量是58．8％,总糖含量是36．4％。TLC和GC分析结果：GLP—I是由L—鼠李糖,D—木糖,D—甘露糖和D—葡萄糖组成。其中性糖摩尔比：1．08：0．92：2．54：4．15。GLP—E是由L—鼠李糖D—木糖,D—甘露糖,L—阿拉伯糖,D—半乳糖,D—葡萄糖和D—葡萄糖醛酸组成,其中性糖摩尔比：1．25：1．03：2．85：0．94：3．1634．65。药理实验表明：两种糖蛋白均有清除自由基的作用,而GLP—Ⅱ清除能力大于GLP—I。     

FLIP、FADD在上皮性卵巢癌中表达及其临床意义

目的：研究FLIP、FADD在上皮性卵巢癌组织中的表达情况,探讨二者在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法及RT—PCR法检测44例上皮性卵巢癌及17例正常卵巢组织中FLIP、FADD的表达,并检测上皮性卵巢癌中PCNA的表达,分析FLIP,FADD表达与上皮性卵巢癌临床病理参数及PCNA表达的关系。结果：FLIP、FADD在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率,与正常卵巢组织相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP,FADD表达与上皮性卵巢癌病理分级及临床分期有关,FLIP、FADD在I—II期中的阳性表达率,与III．IV期相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP、FADD在病理组织学-1级中的阳性表达率,与2—3级相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。FLIP、FADD的表达与患者年龄、组织学分型及淋巴结转移无关。上皮性卵巢癌组织中FLIP表达与PCNA表达成线性正相关,r分别0．880和0．564;FADD表达与PCNA表达成线性负相关,r分别为-0．591和-0．683。结论：FLIP、FADD与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关,可能是治疗上皮性卵巢癌的潜在靶点。     

《生物产业技术》正稿简则

《生物产业技术》（CN11—5606／Q．ISSN1674—0319．邮发代号80—627）立足生物产业,关注技术进步．面向生物农业、生物医药、生物制造、生物能源以及生物环保等领域的技术研发、工业生产、市场营销以及经营管理等环节,宣传国家相关产业政策．发布相关技术．生产、市场、产品等信息,帮助企业进行正确的经营管理决策．推动国家生物技术产业的快速发展,具有较强的技术性、应用性和信息性。     

动物胚胎发育早期母源性基因表达研究进展

动物早期胚胎发育是由贮存在受精卵内的母源性mRNAs和蛋白质控制的：卵母细胞成熟过程中母源性基因(maternal gene)表达并贮存产物．主要是由RNA和包装蛋白组成的RNP(ribonucleoprotein)颗粒．其中Y—box结合蛋白是主要的包装成分．它不仅参与了RNA的包装,并可能与RNP的亚细胞定位有关．卵子受精激发贮存的mRNA翻译并调节第一次卵裂。翻译起始因子eIF4E及其结合蛋白4E—BP(4E—binding protein)参与第一次卵裂的调节。母源性基因指导受精卵最初的数次卵裂．合子基因在随后的胚胎发育中起调控作用、母源性基因Tumorhead(TH)的表达产物TH蛋白能够影响所有卵裂球的增殖,而合子表达的TH蛋白具有外胚层特异性。     

一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对大鼠脑缺血耐受诱导的影响

采用大鼠四血管闭塞全脑缺血耐受模型和脑组织切片形态学方法,观察应用一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L—NAME对大鼠海马CAl区脑缺血耐受(BIT)诱导的影响,在整体水平探讨一氧化氮(NO)在BIT诱导中的作用。54只Wistar大鼠凝闭双侧推动脉后分为6组：(1)假手术组(n＝6);分离双侧颈总动脉,但不阻断脑血流;(2)损伤性缺血组(n＝6)：全脑缺血10min;(3)预缺血 损伤性缺血组(n＝6)：脑缺血预处理(CIP)3min,再灌注72h后行全脑缺血10min;(4)L—NAME组;分别于CIP前1h和后1、12及36h腹腔注射L—NAME(5mg／kg),每个时间点6只动物,其余步骤同预缺血 损伤性缺血组;(5)L—NAME L—精氨酸组(n＝6)：于CIP前1h腹腔注射L—NAME(5mg／kg)和L—精氨酸(300mg／kg),其它步骤同L—NAME组;(6)L—NAME 损伤性缺血组(n＝6)：于腹腔注射L—NAME(5mg／kg)72h后行全脑缺血10min。实验结果表明,(1)单纯10min全脑缺血可使海马CAl区组织学分级增加(表明损伤加重),神经元密度降低(P＜0．01);(2)预缺血 损伤性缺血组的海马CAl区组织学分级、神经元密度与假手术组相比,无显著性差别(P＞0．05);(3)L—NAME组中,应用L—NAME后海马CAl区组织学分级增加,神经元密度降低,与预缺血 损伤性缺血组相比有显著性差异(P＜0．05),表明L—NAME可阻断CIP对神经元的保护作用;(4)L—NAME L—精氨酸组与L—NAME组相比,海马CAl区组织损伤明显减轻(P＜0．05),但与预缺血 损伤性缺血组相比仍有显著性差别(P＜0．05),提示L-精氨酸可部分逆转L—NAME的作用;(5)L—NAME 损伤性缺血组的组织学表现与损伤性缺血组相同(P＞0．05)。这些结果表明,在整体情况下N0参与BIT的诱导。与CIP前1h及后1、12h给予L—NAME组相比,CIP后36h给予L—NAME对CIP保护作用的阻断效应明显减弱,提示N0在CIP后较早阶段即开始参与BIT的诱导。     

成人急性髓性白血病SOCS-1基因及其甲基化的研究

目的：通过检测成人急性髓性白血病中SOCS．1基因表达水平及其甲基化水平,研究其在白血病发病中的作用。方法：运用甲基化特异性PCR（Methylation specificPCR,MSP）方法,对24例急性髓性白血病患者和4株白血病细胞株（Jurkat、Raji、U937、NALM17）,进行SOCS-1基因甲基化水平的研究;同时运用Real—timePCR法定量分析SOCS—1基因表达水平。以10例健康人为正常对照组。结果：24例成人急性髓性白血病患者中,15例有SOCS-1基因甲基化（62．5％）,而正常对照组无SOCS-1基因甲基化（0％）,二者有显著差异（P〈0．05）;SOCS-1基因甲基化组与无SOCS-1基因甲基化组相比较,其SOCS—1基因相对表达量明显减少（P口0．05）;与患者临床病理特征相结合比较,发现SOCS-1基因的甲基化与患者年龄、性别和病程阶段无相关。4株白血病细胞株中,Jurkat和U937表现有SOCS—1甲基化（50％）,Raji和NALM17无SOCS—1甲基化,前者SOCS-1基因表达量较后者也明显降低（P〈0．05）。结论：SOCS—1基因在成人急性髓性白血病中甲基化水平明显增高,且SOCS-1基因甲基化后表达水平受到抑制,提示SOCS-1基因及其甲基化在急性髓性白血病的发生发展中可能具有一定作用。     

棉红铃虫性信息素应用技术研究

1986-1993年在棉红铃虫（Pectinop hora gossypiella Saunders）发生中密度、高密度区应用红铃虫性信息素2％微胶囊、2%改进微胶囊、塑料纤维夹片、PVC胶带、聚乙烯塑料管,采用干扰交配方式进行防治技术的研究。经过22个年次试验结果表明：在红铃虫发生中密度地区以自然沟,沟渠为界．5—8公顷连片棉田为使用单位,所用剂型均能有效控制红铃虫的为害。青铃活虫、籽棉含虫量、僵瓣花比常规农药防治区减少70—80%以上。在高密度区．试验区四周需有100公尺以上隔离带．使用PVC胶带剂型．在越冬代始蛾对时施挂一次,干扰交配时间可达三个月以上．性信息素释放稳定,控制青铃活虫、籽棉含虫量与使用4—5次菊酯农药的效果相当。     

农田生态系统N、P营养平衡及其肥料效应

９年的农田生态系统Ｎ、Ｐ营养平衡定位试验研究表明,Ｎ、Ｐ肥配合施用,实行秸秆还田,可提高土壤有机质和全Ｎ含量,使土壤速效和迟效Ｐ库容量得到补充．最后几年的Ｐ肥利用率达２１．１—６５．１％,Ｎ肥为４９—７５％．储备性施Ｐ第１年的利用率只有６．５－７．３％,而前３年之和达到２４—２８．５％,９年３个时段平均利用率２７．９—４２．８％,补偿性施Ｐ的１９．５—４２．９％．施Ｐ６５．５ｋｇ·ｈａ－１·ｙｒ－１时,既能满足作物对Ｐ的需求又能补充土壤速效Ｐ库容量．     

不同树种混交林及其纯林对土壤理化性质影响的研究

对针阔混交林土壤理化性质的研究表明,针阔混交林比针叶树纯林对土壤的改良作用要好,它使土壤总孔隙度增加２—１９％,水分含量增加６—３１％,枯枝落叶年凋落量增加２—２００％;土壤养分含量全Ｎ、ＮＨ４－Ｎ、代换性Ｃａ、代换性Ｍｇ和腐殖质含量分别增加４５—７５％、３３—８２％、５５—８５％、４４—８４％和３７—４６％．     

上皮性卵巢肿瘤组织MKP-1及p-ERK1/2蛋白表达的研究

研究丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase, MAPK） 相关蛋白丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶（mitogen activated protein kinase phosphatase-1, MKP-1）和磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylation extracellular signal-regulated kinases, p-ERK1/2）曲在上皮性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达差异,并探讨其在卵巢癌发生、发展中的作用,为卵巢癌的治疗提供新的思路及实验依据。选取64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤及32例卵巢上皮性良性肿瘤患者的组织,另选取26例正常卵巢组织作对照,进行MKP-1及p-ERK1/2的免疫组化分析,并同时对其中部分病例进行上述蛋白的Western—blot研究。结果显示正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织MKP—1的表达依次递减,各组之间进行两两比较均有显著性差异（P〈0．01）,FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织MKP-1的表达显著低于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）;而p-ERK1/2在正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织的表达依次递增．各组之间进行两两比较也均有显著性差异（P〈0．01）。FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织P～ERK1/2的表达显著高于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）。且免疫组化及western—blot均显示MKP-1与p—ERK1/2在卵巢癌组织中的表达存在显著的负相关性,（r=-0．90,P〈0．01及r=-0．78,P〈0．01）。本研究结果表明MKP-1与p—ERK1/2的异常表达可能跟上皮性卵巢肿瘤的发生、发展有关,它们之间的表达失衡可能是卵巢癌发生、发展的原因之一．     

北京棒状杆菌等五种细菌的DNA中G-C含量的测定

1．利用核酸的增色性测定了属于四个属五个种的细菌G—C克分子百分数含量,其中包括一个过去尚未测定G—C含量的菌种,即北京棒状杆菌(CC=52．4)。所有的测定结果表明G—C含量是与传统分类允许的范围一致的。 2. 在提取核酸前破坏细胞壁时采用了前人较少使用的超声波法破坏细胞壁。 3．本试验在比色时小杯上没有加盖,任其自由蒸发。为此,本文中提出了一个校正蒸发量的公式。     

靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定

目的：在毕赤酵母中表达融合Myc—His标签的靶向性甲基化酶B1—3a并进行鉴定。方法：以含有B1—3a基因的pcDNA4．0-myc／his质粒为模板,通过PCR扩增获得融合有myc／his标签序列的目的区段B1—3a基因,然后克隆入表达载体pPIC3-5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS—PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定。结果：表达产物中可见与目的蛋白相对分子质量（50000）相符的条带,该条带可被Myc标签单克隆抗体特异识别。结论：正确构建了靶向性甲基化酶Bl-3a的酵母表达载体,靶向性甲基化酶能够在毕赤酵母中成功表达。     

海栖热袍菌胞外α-淀粉酶在E.coli中的高效表达

为解决密码子偏好性差异造成的表达水平低下问题,采取了3种手段提高海栖热袍菌胞外α-淀粉酶在E．coli中的表达水平。用PCR方法从海栖热袍菌（Thermotoga maritima）基因组DNA中扩增出胞外α-淀粉酶A的完整基因amyA,插入表达载体pET-20（b）中构建成质粒pET—amyA;运用基因工程手段将amyA基因富含稀有密码子的信号肽进行切除,将不含信号肽的amyAⅠ基因插入pET-20（b）中构建成质粒pET—amyAⅠ;用PCR法从大肠杆菌基因组中扩增出argU基因,插入pET—amyAⅠ中构建成质粒pET—amyAⅡ。将重组质粒分别转化到E．coli JM109（DE3）,并将重组质粒pET—amyAⅠ转化E．coli BL21-Codon Plus（DE3）-RIL。通过IPTG诱导测酶活性：在E．coli JM109（DE3）中表达的重组酶（pET—amyA）、（pET—amyAⅠ）、（pET—amyAⅡ）的酶活分别是1658．0U／mL、6721．7U／mL、8904．5U／mL,在E．coil BL21-CodonPlus （DE3）-RIL中表达的重组酶（pET—amyAⅠ）的酶活是13867．7U／mL。表明通过这些手段能大幅提高T.maritima胞外α-淀粉酶在E．coli中的表达水平。     

温室条件下增强UV-B辐射对小麦、谷子大小等级性和异速生长的影响

通过温室盆栽试验,研究了小麦与谷子种群在增强UV—B辐射条件下个体大小等级性与异速生长的变化模式。结果如下：①UV—B辐射处理组与对照组相比株高和生物量极显著下降（P〈0．01）,并且其株高和生物量的频率分布均向左偏移。②增强的UV—B辐射使小麦、谷子株高和各部位生物量的Gini系数极显著增大（P〈0．001）。③在增强UV-B辐射下,小麦和谷子株高．生物量之间仍表现为“简单异速生长关系”（P〈0．05）,但株高一生物量之间这种关系发生较大的偏离。结果表明增强UV—B辐射对不同大小的植物个体影响是不均匀的。     

卵巢上皮性癌中MMP-7、VEGF—C的表达和微淋巴管密度变化的相关性及其意义

目的观察基质金属蛋白酶-7（matrix metalloproteinase-7,MMP-7）、血管内皮生长因子-C（vascular endothelial growth factor—C,VEGF—C）和D2—40在上皮性卵巢癌中的表达,探讨MMP-7、VEGF-C表达以及D2—40标记的微淋巴管密度（microlymphatic vessel density,MLVD）与卵巢癌临床病理生物学行为的关系。方法应用免疫组化对80例EOC及20例卵巢良性上皮性肿瘤组织进行MMP-7、VEGF-C和D2—40的检测,并进行MLVD测定。结果MMP-7、VEGF—C蛋白的表达阳性率及MLVD计数在EOC组分别为60．0％、57．5％以及13．06±6．16,均分别高于良性肿瘤组25．0％、25．0％及9．25±4．33（P〈0．05）。EOC中,MMP-7、VEGF-C蛋白的阳性表达率随肿瘤组织学分级的增加而升高,分别为29．4％、56．7％、78．8％和11．8％、60．0％、78．8％（P〈0．05）,腹腔脏器及淋巴结有转移者高于无转移者,分别为86．8％＆35．7％及86．8％＆27．1％（P〈0．05）,两个指标在PTNMⅢ-Ⅳ期阳性表达率分别为83．8％、83．8％,均显著高于PTNMⅠ-Ⅱ期的阳性表达率39．5％、34．9％（P〈o．05）;D2—40标记的MLVD计数在EOC中随组织学分级的增加而增高,分别为7．29±2．85、12．63±6．25、16．48±4．94,腹腔脏器及淋巴结有转移者高于无转移者16．50±4．31＆10．00±5．99（P〈0．05）,PTNMⅢ-Ⅳ期显著高于PTNMⅠ-Ⅱ期16．65±4．15＆10．02±5．99（P〈0．05）。EOC中,MMP-7、VEGF-C的表达分别与MLVD呈正相关性（r分别为0．510,0．455,均PG0．01）;MMP-7、VEGF-C的表达分别与EOC患者腹腔器官及淋巴结转移亦呈正相关（r分别为0．521,0．565,均P〈0．01）。结论MMP-7、VEGF-C的表达可以促进EOC中淋巴管的形成及淋巴道转移,联合检测MMP-7、VEGF-C及MLVD可能作为预测EOC患者侵袭、转移等生物学行为和评价预后的重要指标。     

花生过敏原iso-Ara h 3的克隆、表达和免疫学鉴定

采用Touchdown PCR技术从花生cDNA中克隆到花生的过敏原iso-Ara h 3基因,并进行重组蛋白表达,再用Western blot技术鉴定重组蛋白过敏原性。结果显示,构建的pET44a-iso—Ara h 3重组菌能表达iso—Ara h 3蛋白。用8例花生过敏的阳性血清鉴定表明,重组的iso—Ara h 3蛋白血清IgE识别率为12．5％,是一种低过敏原性的过敏原蛋白。     

《生物产业技术》征稿简则

《生物产业技术》（CNll—5606／Q．ISSNl674一0319．邮发代号80～627）立足生物产业．关注技术进步．面向生物农业、生物医药、生物制造、生物能源以及生物环保等领域的技术研发、工业生产、市场营销以及经营管理等环节．宣传国家相关产业政策．发布相关技术、生产、市场、产品等信息．帮助企业进行正确的经营管理决策,推动国家生物技术产业的快速发展．具有较强的技术性、应用性和信息性。