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靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定
引用本文:邢克飞,吴琳,李燕,刘新平,药立波,李福洋.靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定[J].生物技术通讯,2007,18(5):756-758.
作者姓名:邢克飞  吴琳  李燕  刘新平  药立波  李福洋
作者单位:第四军医大学,生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032
摘    要:目的:在毕赤酵母中表达融合Myc—His标签的靶向性甲基化酶B1—3a并进行鉴定。方法:以含有B1—3a基因的pcDNA4.0-myc/his质粒为模板,通过PCR扩增获得融合有myc/his标签序列的目的区段B1—3a基因,然后克隆入表达载体pPIC3-5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS—PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中可见与目的蛋白相对分子质量(50000)相符的条带,该条带可被Myc标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶Bl-3a的酵母表达载体,靶向性甲基化酶能够在毕赤酵母中成功表达。

关 键 词:DNA甲基化酶  靶向性  毕赤酵母
文章编号:1009-0002(2007)05-0756-03
修稿时间:2007-01-12

Expression and Identification of Targeting DNA Methyltransferase in Pichia pastoris
XING Ke-fei,WU Lin,LI Yan,LIU Xin-ping,YAO Li-bo,LI Fu-yang.Expression and Identification of Targeting DNA Methyltransferase in Pichia pastoris[J].Letters in Biotechnology,2007,18(5):756-758.
Authors:XING Ke-fei  WU Lin  LI Yan  LIU Xin-ping  YAO Li-bo  LI Fu-yang
Abstract:
Keywords:DNA methyltransferase  targeting  Pichia pastoris
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