人轮状病毒命名法

<正>人轮状病毒发现后不久,即已查明在病毒颗粒内衣壳层中具有所有轮状病毒共同的“群”特异性抗原。1978年比利时布鲁塞尔Zissis等和英国伯明翰Felwett等首次报导了轮状病毒的不同血清型。布鲁塞尔报告中中最初采用的是补体结合试验和免疫电镜法,后来美国比塞大Yokan和布鲁塞尔Zissis用ELISA法来鉴别。在英国伯明翰的报导中用免疫荧光灶中和试验法(NIFF)测出血清能中和细胞培养中人粪便轮状病毒的感染能力。     

ELISA和标准法负染做电镜检测轮状病毒中几个问题的探讨

国内外应用ELISA试剂盒和电镜检测小儿腹泻粪便悬液中轮状病毒已有不少报导。目前我国已有轮状病毒诊断试剂盒,使用甚为方便。但应用这种试剂盒检查和临床诊断的相互关系,以及ELISA、ELISA阻断试验中的抗原抗体滴度选择和应用标准法负染做电镜检查的方法值得进一步研究。本研究为探讨经临床大夫诊断,认为是轮状病毒感染引起的小儿腹泻患者,经实验室检查与临床诊断的关系及二者的复合率(由中国医科大学第一附属医院儿科另文发表)以便为临床诊断治疗提供依据。本文就应用国产轮状病毒检测试剂盒做ELISA及其阻断试验中抗     

轮状病毒酶联免疫吸附试验

<正>用电镜技术可以对轮状病毒感染进行快速有效的诊断,但这种技术需要有一台电子显微镜,需要有技术熟练的人员掌握使用电镜并对电镜图象能正确地辩认和解释,另外,只有当病毒颗粒完整可辩时,才能用电镜得到诊断结果。 由于上述限制,人们就想到寻找一些不需要电镜的新方法来诊断轮状病毒,其中大多数都是免疫学方法,因为实验室已经可以用实验动物来制备特异性抗轮状病毒的抗体。虽然人轮状病毒与动物轮状病毒在抗原性上有明显差别,但目前所有已知轮状病毒都具有一种共同特异性的群抗原(group antigen)。用一种轮状病毒毒株制备的免疫血清     

杭州地区腹泻儿童轮状病毒与腺病毒感染调查

目的分析不同季节及不同年龄段腹泻患儿感染轮状病毒(RV)与腺病毒(Eads)情况,为临床提供早期、快速、准确、可靠的依据,以便及时采取相应的治疗使患儿早日康复。方法采用杭州艾博医药有限公司提供的轮状病毒(A组)/腺病毒检测试剂盒(乳胶法),对2012年1月至2015年12月浙江省人民医院门诊和住院就诊的3 368例腹泻儿童粪便标本进行轮状病毒和腺病毒抗原检测。结果 3 368例腹泻儿童粪便中,RV阳性578例占17.16%,Eads阳性106例占3.15%。11月至次年1月为轮状病毒感染的高发月份,1~3岁为儿童感染的高发年龄;腺病毒感染阳性率低,呈散发性。结论杭州地区近年1~3岁婴幼儿的腹泻主要是由轮状病毒和腺病毒引起,其中轮状病毒感染率明显高于腺病毒,且有明显的季节性;而腺病毒感染呈散发流行,未表现出明显的季节性及年龄分布。     

腹泻患儿粪便中A群轮状病毒抗原阳性率及其相关因素分析

目的回顾性分析我院腹泻患儿粪便中A群轮状病毒抗原检测情况,为临床提供快捷、准确、可靠的诊断依据。方法收集腹泻患儿粪便标本2 869例,应用免疫层析双抗体夹心法检测A群轮状病毒抗原,对阳性率及其影响因素进行统计分析。结果2 869例检测结果中阳性946例,总阳性率为32.9%。1~2岁患儿阳性率最高,为36.5%;0~1岁阳性率其次,为32.3%;2~6岁患儿阳性率相对较低,为27.0%。不同年龄段间比较差异具有统计学意义(χ2=11.17,P0.05)。秋冬季节为轮状病毒感染率的高峰期,春夏季节较低,分别为39.5%和22.6%。不同季节两组间比较差异具有统计学意义(χ2=10.15,P0.05)。并且发现粪便以黏液便或水样便为特征的患儿A群轮状病毒感染率较高。结论轮状病毒是婴幼儿急性重症腹泻的主要病原体之一,及时进行轮状病毒抗原检测,对腹泻患儿的及时诊断和合理预防治疗具有重要意义。     

被动免疫轮状病毒NSP4&VP7双抗原重组腺病毒对感染乳鼠的排毒保护作用

为建立小鼠轮状病毒(Rotavirus,RV)感染动物模型,研究可同时表达轮状病毒NSP4 (Nonstructural protein 4)和VP7(Viral protein 7)的重组腺病毒疫苗免疫孕鼠后对新生乳鼠感染RV的被动保护作用.新生乳鼠口服异源株轮状病毒Wa、ZTR-68或SA11株后(分2次给予,每次含5×104 CCID50的RV),观察乳鼠是否有腹泻症状、肠道病理变化,检测乳鼠粪便排毒百分率;另以重组腺病毒rAd-NSP4-VP7免疫孕鼠后,检测母鼠血清抗体产生情况,并对比乳鼠粪便中RV抗原检出率初步评价疫苗的被动免疫保护作用.发现口服异源株RV的乳鼠未出现类似人类婴幼儿感染后的明显腹泻症状,但在粪便中可检测到RV抗原的存在(Wa、ZTR-68攻毒组均超过80％).经rAd-NSP4-VP7被动免疫的乳鼠接受Wa和ZTR-68攻毒后其粪便中的RV检出率比未受到被动免疫保护的对照组降低(P＜0.05).rAd-NSP4-VP7重组腺病毒免疫母鼠可显示出对孕鼠感染RV的被动免疫保护作用.     

婴幼儿轮状病毒性肠炎病原检测和治疗

目的了解辽河油田地区秋冬季3岁以下腹泻儿童轮状病毒感染率,观察口服抗轮状病毒免疫球蛋白(抗-HPV IgY)对轮状病毒感染性肠炎的疗效。方法酶联免疫吸附(ELISA)法检测患儿大便轮状病毒抗原阳性者,比较抗．HPV IgY治疗组和常规药物治疗组2组的有效率。结果粪便中轮状病毒抗原检出率为71％,抗-HRV IgY治疗组的3d有效率为82．3％,常规药物治疗组为32．5％。结论轮状病毒感染是婴幼儿秋季腹泻的主要致病微生物,口服抗轮状病毒免疫球蛋白疗效高于常规药物治疗组。     

健康儿童与轮状病毒感染儿童肠道菌群结构的比较研究

目的比较分析轮状病毒感染个体与健康个体肠道菌群结构的差异。方法采集11例轮状病毒感染个体及6例健康个体的粪便样品,提取粪便样品中细菌的混合DNA,先通过ERIC-PCR结合分子杂交的技术分析两组个体之间肠道微生物组成的相似性;再扩增粪便样品中菌群的16SrRNA基因,利用PCR—TGGE技术分析肠道菌群的组成情况。结果轮状病毒感染个体与健康个体相比,肠道菌群中GC含量较低的菌明显减少,同时肠道菌群有宿主专一性。结论轮状病毒感染会导致儿童肠道内菌群结构失调。     

人轮状病毒HRB-02株的分离鉴定

从哈尔滨医科大学第二临床医学院发生腹泻患儿粪便中取得标本 ,用MA10 4细胞传代培养 ,传至第4代时 ,细胞出现明显病变 ;电镜观察见到典型的轮状病毒颗粒 ;其RNA电泳型为 4∶2∶3∶2型 ,属A群轮状病毒。对其蚀斑特性和血凝特性进行了初步研究 ,把这株轮状病毒地方株命名为HRB 0 2株。为研究该株轮状病毒的分子生物学特性 ,从而研制诊断性抗原和疫苗奠定基础。     

胶体金法与RT-PCR法测定A群轮状病毒及G血清型分型

目的了解婴幼儿A群轮状病毒腹泻的流行病学特征。方法收集浙江省苍南县人民医院2009年1-12月份的婴幼儿腹泻粪便标本,采用胶体金免疫层析法和逆转录-聚合酶链反应法进行轮状病毒抗原检测和血清型分型,分析G血清型分型。结果 828份婴幼儿腹泻粪便轮状病毒阳性率为33.45%。在轮状病毒腹泻患儿中,1岁以内占49.82%,2岁以内占89.89%。本地区轮状病毒腹泻呈现季节高峰,11月至次年1月为轮状病毒腹泻流行期。毒株分型显示G3型为流行优势株（51.6%）,其次是G1型（26.6%）;另有13.7%为混合感染,包括G1＋G3型（10.5%）、G2＋G3型（2.4%）和G1＋G9型（0.8%）。结论 2009年浙江省苍南县婴幼儿轮状病毒腹泻的主要血清型是G3和G1,G3为优势毒株。 更多还原     

上海部分地区小于5岁儿童轮状病毒及星状病毒性腹泻的临床分析

目的 了解上海地区≤5岁的患急性稀水样便腹泻患儿中轮状病毒感染及星状病毒感染的流行情况及其临床特征。方法 留取2006年6月~2007年3月复旦大学附属儿科医院门诊、住院及医院内感染腹泻患儿的部分粪便标本,应用免疫层析胶体金法检测轮状病毒。排除轮状病毒感染后,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测星状病毒。本实验主要研究对象为年龄≤5岁,病程≤2周,大便培养无条件致病菌生长患儿。结果 共收集724例急性腹泻粪便标本,年龄≤5岁人群轮状病毒阳性检出率42.5%,约85%患儿年龄≤2岁;病例全年均有发生,发病高峰主要集中在2006年12月~2007年1月。共240例急性腹泻轮状病毒阴性粪便标本中,年龄≤5岁人群星状病毒阳性检出率11.6%,53.6%患儿年龄≤2岁;观测期间病例散发,发病高峰主要集中在2006年10月~2007年1月。结论 轮状病毒是上海地区婴幼儿病毒性腹泻的重要病原,部分患儿伴肠道外损伤。星状病毒是上海地区婴幼儿病毒性腹泻的又一重要病原。     

从绵羊羔和山羊羔腹泻粪样中检出B组轮状病毒

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,从新疆巴里坤县的22份绵、山羊羔腹泻粪样中,检出11份具有B组轮状病毒的RNA电泳图型,联合电泳表明,绵羊羔与山羊羔的B组轮状病毒电泳图型完全相同,电镜观察表明,该病毒与典型轮状病毒(A组)具有相同的形态特征,但易降解破碎,口服接种剥夺初乳的绵羊羔和山羊羔,经11～13小时羔羊发生急性水样腹泻,并排出大量病毒,经A组轮状病毒组抗原ELISA检测,不具有共同组特异抗原,但经对流免疫电泳检测,它与成人腹泻轮状病毒(B组)具有共同组特异抗原,从而证实我国存在与国外报道相同的羊B组轮状病毒,既感染绵羊羔也感染山羊羔。是引起绵,山羊羔急性腹泻的不可忽视的病原之一。     

大熊猫幼兽腹泻粪便分离出的轮状病毒鉴定

11 只5 ～ 11 月龄的断奶大熊猫幼兽先后患一种急性传染性、顽固性腹泻病,1 只大熊猫幼兽在发病4 d 后死亡,相同饲养条件下由母兽哺育的同龄大熊猫幼兽未见发病。取发病大熊猫幼兽粪便、血液以及呕吐物进行细菌学和寄生虫学检查,未检出病原;用轮状病毒粪便抗原ELISA 快速诊断,受检的8 只大熊猫幼兽腹泻便都多次检出阳性结果。采集发病大熊猫的病料进行病毒病原分离,从腹泻大熊猫幼兽的粪便中分离出病毒颗粒,通过电镜形态、理化特性和中和试验鉴定,确认分离病毒为轮状病毒。      

在我国患急性腹泻成人中发现一种新轮状病毒

从3例急性成人腹泻患者粪便中,经电镜观察,成人腹泻轮状病毒—酶联免疫吸附试验(ADRV-ELISA)、普通轮状病毒—酶联免疫吸附试验(Rota-ELISA),猪抗C型(组)轮状病毒和鸡抗D型(组)轮状病毒血清分别与本病毒的免疫电镜试验以及RNA电泳等实验结果,发现了一种新轮状病毒,该病毒的形态结构与普通轮状病毒(Rotavirus)、成人腹泻论状病毒(Adult Diarrhoea Rotavirus,简称ADRV)极为相似,但抗原性与普通轮状病毒(A组),成人腹泻轮状病毒(B组),C型轮状病毒(C组),D型轮状病毒(D组)显然无关。基因分析表明,该病毒基因组由11个双链RNA片段组成,但其RNA电泳图型具有独自的特点,与目前公认的A组、B组、C组、D组论状病毒韵RNA电泳图型均不同,免疫电镜证实,该病毒能被人恢复期血清所凝集,表明该病毒可能是腹泻病人的病因。     

沙市婴幼儿腹泻中检出3株C群轮状病毒

1987～1988年在沙市165份婴幼儿急性腹泻标本中,用PAGE法检出轮状病毒37株(22.4％),其中3株为少见的轮状病毒,此种病毒经电镜观察,具有典型轮状病毒的形态结构,ELISA证实该病毒不具有A群和B群轮状病毒的群特异性抗原。RNA电泳分析表明,其基因组由11个双链RNA片段组成,电泳图型特殊,呈4:3:2:2的排列模式。上述试验表明,该病毒为世界上罕见的C群轮状病毒。免疫电镜证实,该病毒能被病人恢复期血清所凝集,提示该病毒是腹泻病儿的致病因子。     

四、轮状病毒的电镜检查

<正>电子显微镜检查法在腹泻病的研究中一直起着很重要的作用,人轮状病毒最早就是在电镜观察中发现的,后来根据它的形状命名为轮状病毒。其它与腹泻有关的病毒如星状病毒,萼状病毒等也都有其独特的形态学特征,电镜为我们识别区分这些病毒提供了有利的武器,特别对于那些难于进行组织培养的病毒。因此病毒的形态和大小等特征已成为分类学和实验室诊断的重要依据。     

由小白鼠腹水制备抗HRV抗体的方法

HRV(人轮状病毒)抗原不容易获得。从人粪便中提取抗原产量少,给家兔免疫时有很大困难。为了克服这个困难,Edwin 介绍了用腹水瘤诱导方法制作抗体。据此,作者使用少量人轮状病毒便悬液与福氏佐剂混合免疫小白鼠。免疫完成后用艾希氏腹水瘤诱导小白鼠产生腹水,以腹水代替血清使用。为了比较腹水与血清的效能,用 ELISA 方法测定二者的抗体滴度及非特异干扰。现将结果分述     

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法诊断轮状病毒腹泻的研究

轮状病毒是致人及动物腹泻的一个重要病原,从Bishop等用电镜从粪便中发现了该病毒以来,相继出现了许多有效的检测方法。由于轮状病毒的基因组是具有11节段的双股RNA,因此可用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法进行检测。轮状病毒的RNA在电泳中形成了11个片段的迁移区带图,称为电泳型(electropherotype),不同种型的轮状病毒其电     

中国南部地区接种与未接种轮状病毒疫苗儿童的轮状病毒胃肠炎感染状况调查

感染轮状病毒是全球5岁以下儿童严重腹泻的最常见的原因。在引入轮状病毒疫苗接种以前,几乎每一名婴儿至少经历过一次轮状病毒感染。据统计,2000年全球5岁以下儿童死于轮状病毒感染者达52.8万例(范围为46.5万~59.1万例),2013年这一数据为21.5万例(范围为19.7万~23.3万例)。2009年世界卫生组织策略咨询专家工作组建议将轮状病毒疫苗接种纳入各国国家免疫规划(NIPs),尤其是非洲和亚洲那些具有高度腹泻病相关性儿童死亡率的国家应首当其冲地引入轮状病毒疫苗接种。至2018年3月,已有95个国家将轮状病毒疫苗免疫纳入国家免疫规划,23个国家已经宣布计划将轮状病毒疫苗引入国家免疫计划。     

用乳胶凝集滤膜小瓶法检查轮状病毒抗原

<正>一、引言 用乳胶凝集反应法(LA)检测冬季婴儿腹泻粪便中的轮状病毒,敏感度高、简便,可广泛使用。 以前用LA小盒,须预先在粪便材料中加入小盒附带的缓冲液,低速离心,用其上清液进行反应。现在用Orion公司研制的新滤膜瓶,不需离心分离,仅对粪便检样进行短时间处理即可。现将轮状病毒滤膜小瓶法与过去的轮状病毒离心分离法,以及标准的电镜法(EM)对患儿粪便中轮状病毒的检查结果作以比较。