男性泌尿生殖道感染标本葡萄球菌分离及抗菌谱分析

目的了解男性尿生殖道感染患者尿道分泌物和前列腺液葡萄球菌的分离及时抗菌药物的敏感情况.方法用法国生物梅里埃VITEK32型细菌鉴定分析鉴定分离自尿道分泌物和前列腺液的葡萄球菌及药敏试验,计算6种葡萄球以及耐甲氧西林(MRS)和甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)的分离率及构成比,以x2检验统计分析其差异.结果尿道分泌物葡萄球菌分离率(7.17%)明显低于前列腺液(22.16%)(P＜0.005).二者无论以溶血性葡萄球菌的分离率和构成比最高,其次为表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌等4种葡萄球菌分离率及构成比较低,其分离情况也存在差异.2种标本各型MRS都有很高的阳性率,各种葡萄球菌对万古霉素100%敏感,MRS对多种抗菌药敏感率明显低于MSS(P＜0.005);各型MRS除万古霉素、呋喃妥因、利福平和林可霉素,对其余药物敏感率(S I)%较低;与总MRS比较,对利福平、复方新诺明、庆大霉素和呋喃妥因中1种或3种药物的敏感率(S I)%,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、模仿葡萄球菌或赛氏葡萄球菌差异有显著性(P＜0.025);其余差异无显著性(P＞0.05).结论凝固酶阴性的MRS为泌尿生殖道感染的重要病原菌,对多种抗菌药物敏感性显著降低且不同种存在差异,应重视各种MRS的分离和药敏试验,有助于指导临床合理用药,达到满意的疗效.     

氟康唑对热带念珠菌活性氧和线粒体膜电位的影响

为了探讨氟康唑作用机制,观察它对热带念珠菌作用后存活率、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,△Ψm)和细胞周期的变化。参照NCCLS M27-A方案的微量稀释法测定氟康唑对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);热带念珠菌与不同浓度氟康唑共同培养后用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析热带念珠菌存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期的变化。结果表明,氟康唑作用后,热带念珠菌氟康唑耐药株的存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期各期比例均没有明显变化;而热带念珠菌氟康唑敏感株的存活率和线粒体膜电位△Ψm明显下降,ROS明显升高,而且大部分热带念珠菌阻滞于G2/M期,并出现明显凋亡峰,呈一定的时间剂量依赖关系。自由基清除剂谷胱甘肽抑制热带念珠菌ROS的产生,阻止细胞周期G2/M期阻滞和降低凋亡。由此可见,氟康唑可能通过刺激热带念珠菌产生过多ROS,并使线粒体膜电位△Ψm下降,从而诱导热带念珠菌凋亡。     

2000年至2006年屎肠球菌的临床分离与耐药变迁

目的了解本地区屎肠球菌在临床的分离与耐药变迁情况,为临床抗感染的预防与治疗提供帮助。方法用WHONET 5软件统计分析我院2000年至2006年屎肠球菌临床分离株在各病区、样本中的分布与耐药性的变迁情况。结果分离率呈逐年上升趋势,从2000年的0.32%上升到2006年的0.81%;7年中以重症监护病区（ICU）分离菌株最高,占总分离菌株的68.9%,其次为肾内科病区占13.5%;在送检标本中以尿液标本分离菌株数最高,占总分离数的62.3%,其次为痰液（10.2%）。对11种抗生素的耐药性分析显示,屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林、庆大霉素500、环丙沙星、左旋氧氟沙星呈较高的耐药率,而对四环素、呋喃妥因、链霉素2000相对较低;更值得我们注意的是对于万古霉素的耐药率呈逐年上升趋势,对于喹奴普汀/达福普汀、力奈唑烷这两类临床还未运用的抗生素已有一定的耐药率。结论屎肠球菌在临床的分离率在逐年增加,已成为医院内感染的主要病原菌之一,该菌呈多重耐药的特性,并呈不断增加趋势,临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据。     

洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林/他唑巴坦MIC值变迁的4年监测

目的了解浙江地区4年分离的洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林-他唑巴坦的MIC值变迁,以利于临床对该抗生素在抗感染中更合理的应用。方法先用VITEK-32型配套的药敏检测卡GNS-120检测2000～2003年临床分离的洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林-他唑巴坦的敏感性。对不耐药的菌株进一步用哌拉西林-他唑巴坦E-试条进行MIC检测,并统计其累积的MIC值变化情况。结果2000—2003年,洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林．他唑巴坦的耐药率分别为：40．5％,42．9％,40．6％,41．2％。对分离到不耐哌拉西林．他唑巴坦的100株菌（2000～2003年分别为21株、21株、22株、36株）进行MIC值检测,其累积的MIC百分率,M1C值≤4分别为：47．6％,42．9％,45．5％,36．I％;MIC值≤8分别为：66．7％,52．4％,54．5％,47,2％;MIC值≤16分别为：76．2％,66．7％,63．6％,52．8％。结论4年中临床分离的洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林-他唑巴坦的耐药率虽然变化不大,但其不耐药菌株对哌拉西林-他唑巴坦的累积MIC百分率降低较为明显,表明洋葱伯克霍尔德菌对哌拉西林-他唑巴坦的耐药性存在有增加的趋势,应引起临床的重视。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌

目的以PCR方法检测溶血葡萄球菌mecA基因为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEKGPS109卡微量肉汤稀释法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus haemolyticus,MRSH）的敏感度和特异性。方法用PCR扩增临床分离的114株溶血葡萄球菌．检测特异性的mecA基因片段;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测溶血葡萄球菌中耐甲氧西林的溶血葡萄球菌。结果114株溶血葡萄球菌经PCR法检测,MRSH有97株,占85．1％;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEKGPS 109卡微量肉汤稀释法检测MRSH分别有92、65、93株．与mecA基因法结果比较,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法敏感性分别为94．8％（92／97）、67．0％（65／97）、93．8％（91／97）;特异性分别为i00％（17／17）、100％（17／17）、88．2％（15／17）。矿检验,头孢西丁纸片扩散法和mecA基因法差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSH具有很高敏感度和特异性,是筛选和确认MRSH的一种可靠方法。     

洋葱伯克霍尔德菌感染家兔抗感染疗效与体外药物敏感性的比较

目的使用无CLSI完整解释标准的药物,哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/棒酸、头孢吡肟治疗洋葱伯克霍尔德菌感染的家兔模型,观察比较何种体外药物敏感试验更能准确反应临床疗效。方法 57株临床分离的洋葱伯克霍尔德菌,感染57只家兔腹腔。将感染家兔分成3组(A、B、C组),每组19只;分别在48、72、96、120和144 h注射药物:A组每只家兔注射1 mL浓度为2 g/mL哌拉西林/他唑巴坦;B组每只家兔注射1 mL浓度为0.1g/mL头孢吡肟;C组每只家兔注射1 mL浓度为0.6 g/mL替卡西林/棒酸。比较肉汤稀释法(MIC法)、K-B法及VITEK法检测的药物敏感性结果与体内药物治疗的疗效关系。结果哌拉西林/他唑巴坦治疗组(A组),K-B法检测结果与家兔感染模型治疗过程相符率为72.2%,MIC法66.7%,VITEK法为66.7%。替卡西林/棒酸治疗组(B组),MIC法83.3%,VITEK法为77.8%,K-B法检测结果与家兔感染模型治疗过程相符率为50.0%。头孢吡肟治疗组(C组),MIC法88.9%,VITEK法为77.8%,K-B法检测结果与家兔感染模型治疗过程相符率为72.2%。结论在3种药物敏感性检测法中,哌拉西林/他唑巴坦以K-B法检测结果与感染家兔的抗感染疗效最为接近;替卡西林/棒酸及头孢吡肟均以MIC法与感染家兔的抗感染疗效最为接近;针对洋葱伯克霍尔德菌的感染建议临床使用不同的方法检测不同的药物体外敏感性。     

第3代头孢耐药的阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定

目的检测3代头孢耐药的阴沟肠杆菌,了解阴沟肠杆菌对3代头孢耐药的机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药。方法收集2002年1月-2004年6月浙江省人民医院,来自各种标本对3代头孢耐药的阴沟肠杆菌165株,用三维试验检测ESBLs与AmpC酶。结果165株阴沟肠杆菌中,产ESBLs120株,占72．7％,产AmpC酶有40株,占24．2％,同时产2种酶的有1株,占0．6％,2种酶均不产的有4株,占2．5％。体外抗生素敏感试验显示,亚胺培南、头孢替坦、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为1．2％、66．0％、92．1％和92．1％,氨苄西林、头孢唑啉的耐药率达到100％。结论该院对3代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,药物敏感试验表明亚胺培南敏感率最高（97．6％）,头孢替坦次之（27．3％）,而对其它抗菌药物敏感率较低。     

2003年至2007年大肠埃希菌的临床分离及耐药趋势分析

目的了解2003年至2007年大肠埃希菌在临床标本中的分离情况及其耐药趋势,为临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析2003年至2007年间所有标本中大肠埃希菌的分离率、标本和病区的分布构成情况以及对17种抗菌药物的耐药率。结果五年间大肠埃希菌的总分离率变化不明显,但其阳性分离率呈上升趋势,从2003年的5.02%增至2007年的6.26%;其在泌尿生殖道标本（尿液标本和尿道分泌物标本）的分离率最高（50.5%）,其次是呼吸道标本（36.66%）;病区分布以重症监护室最高（20.7%）,其次是普外科（18.3%）,所有内科病区（不含ICU）占46.6%;大肠埃希菌对12种抗菌药的耐药率大于50%,仅对其中5种的耐药率每年均低于50%。结论大肠埃希菌的临床总分离率没有明显变化,但阳性分离率有呈上升趋势,其对多数抗菌药物有较高的耐药性,所以感染的治疗应当依据抗菌药物的体外敏感试验。     

亚胺培南临床用药与非发酵菌群分离率和耐药性的关系

目的了解亚胺培南临床用药和非发酵菌群分离率与耐药性变迁的关系,有利于非发酵菌感染的预防与治疗。方法统计分析浙江省人民医院2000～2003年临床分离非发酵菌的菌株分布、与亚胺培南的临床用药的相关性及耐药率。结果4年来非发酵菌的分离以铜绿假单胞菌(30．7％)、乙酸钙-鲍曼不动复合杆菌(19．％)及嗜麦芽糖寡养单胞菌(19．1％)为主．其分离率与亚胺培南用药存在相关性。对各菌属的主要菌种进行耐药性分析,嗜麦芽糖寡养单胞菌、脑膜脓毒性金黄杆菌和洋葱伯克霍尔德菌的耐药率极高,铜绿假单胞菌和乙酸钙-鲍曼不动复合杆菌的耐药率呈现明显升高的趋势。结论非发酵菌的检出率与亚胺培南使用关系密切,耐亚胺培南的菌株迅速升高。临床应合理使用抗生素,并加强对耐药菌株的监控。     

1997～2002年洋葱伯克霍尔德菌的临床分离与耐药性变迁

目的了解本地区洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离与耐药性变迁情况,以利于临床抗感染的预防与治疗.方法用WHONET5软件统计分析浙江省人民医院1997～2002年洋葱伯克霍尔德菌临床分离菌株在各病区、样本中的分布及耐药性的变迁情况.结果分离率从1977年的0.11%上升到2002年的0.37%;6年中以监护病区分离菌株最高占总分离菌株的48.4%,其次为呼吸科病区占10.9%;在送检样本中以呼吸道标本分离菌株数最高占总分离数的66.1%(痰液 咽拭子),其次为血液占10.4%.对26种抗生素的耐药性分析示,多数抗菌药物其耐药性均大于50%;小于50%只有6种,哌拉西林或他唑巴坦(40.5%～42.9%),头孢哌酮或舒巴坦(33.%～49.1%),头孢吡肟(40.1%～46.%);环丙沙星(28.6%～46.2%);左氟沙星(33.3%～46.4%),复方新诺明(28.6%～42.9%).结论洋葱伯克霍尔德菌在临床的分离率在增加,已成为医院内感染的主要病原菌之一,该菌对多数抗菌药物具有较高耐药性,且有不断增加趋势,临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据.