懒猴属的核糖体DNA变异及其种间分化关系

用１５种限制性内切酶和人２８Ｓ、１８ＳｒＤＮＡ探针构建了懒猴属各物种核糖体ＤＮＡ重复单位的限制性内切酶图谱。在进化速率较高的非转录间隔区,在大、中、小懒猴中分别定位了２３、２４、２４个酶切位点。大懒猴与中懒猴有１２个位点不同,与小懒猴有１４个位点不同,而中、小懒猴间则只有一个位点的差异。经过计算,大懒猴与中懒猴的遗传距离值为１２．６５％,与小懒猴的差异为１４．２４％,中、小懒猴间的差异则仅为０．７     

牵牛属生殖细胞和精细胞中细胞器DNA的研究

用ＤＡＰＩ荧光技术观察了大花牵牛（ Ｐｈａｒｂｉｔｉｓ ｌｉｍ ｂａｔａ Ｌｉｎｄｌ．）和圆叶牵牛（Ｐ． ｐｕｒｐｕｒｅａ（Ｌ．） Ｖｏｉｇｈｔ）生殖细胞的细胞质ＤＮＡ及其在精细胞形成过程中的动态。牵牛属这两个种的生殖细胞均为细长形,具有大量细胞器ＤＮＡ。刚形成的一对精细胞大多数一端钝,另一端呈尾状。较后期的精细胞多呈凸透镜状。生殖细胞分裂形成的一对精细胞多是同型的,也有的表现为异型。精细胞的核多偏于细胞的一端。在细胞质中有大量细胞器ＤＮＡ分布。精细胞中的细胞器ＤＮＡ 荧光点在大小及荧光强度上有所不同,可能代表线粒体和质体这两种不同的细胞器ＤＮＡ。大花牵牛与圆叶牵牛之间,无论是生殖细胞或精细胞在细胞形状和细胞质ＤＮＡ 分布状况上基本相似。一个明显的差异是,后者的细胞质ＤＮＡ 荧光点体积较小和荧光弱。研究表明,精细胞存在具有ＤＮＡ 的细胞器,为牵牛花细胞质具有双亲遗传或父系遗传的潜能提供了细胞学证据。本文还对研究的两个种的精细胞存在同型和异型的现象,以及精细胞在核质比率上的特点与质体双亲遗传的关系进行了讨论     

牵牛属质体DNA的父系遗传

利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术研究了牵牛属（Ｐｈａｒｂｉｔｉｓ）植物质体ＤＮＡ 的遗传方式。结果表明,在牵牛（Ｐ． ｎｉｌ）×大花牵牛（Ｐ． ｌｉｍｂａｔａ）和大花牵牛×牵牛中,质体ＤＮＡ 为父系遗传。在大花牵牛×牵牛中,质体ＤＮＡ还有可能为双亲遗传。研究证明牵牛属为被子植物中具有质体父系遗传方式的第三个属。牵牛属质体父系遗传机制尚不清楚,作者认为母系质体及其ＤＮＡ 在受精后的释稀、排除和／或降解可能是质体父系遗传的基础     

杉木叶绿体和线粒体遗传的研究

利用ＰＣＲ技术分别以亲本杉木（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉａｌａｎｃｅｏｌａｔａ（Ｌａｍｂ．）Ｈｏｏｋ．）、柳杉（ＣｒｙｐｔｏｍｅｒｉａｆｏｒｔｕｎｅｉＨｏｏｉｂｒｅｎｋ）和杉木×柳杉杂种的总ＤＮＡ为模板,扩增了叶绿体ｔｒｎＬｔｒｎＦ和线粒体ＣｏｘⅢ基因片段,比较了这些扩增片段的限制性内切酶ＡｌｕⅠ,ＤｄｅⅠ,ＨｉｎｆⅠ,ＭｓｅⅠ和ＲｓａⅠ的酶切片段多态性,结果表明：Ｆ１代的叶绿体ＤＮＡ为母系遗传,而线粒体ＤＮＡ为父系遗传。杉木线粒体ＤＮＡ父系遗传方式与杉科其他植物一致,而叶绿体ＤＮＡ母系遗传则为在松柏类植物中首次发现。     

中国牦牛线粒体DNA多态性及遗传分化

用２０种限制性内切酶分析了我国５个牦牛群体９０个个体的限制性片段长度多态性,其中ＡｖａＩ,ＡｖａＩＩ、ＢｇｌＩＩ、ＥｃｏＲＩ．ＨｉｎｄＩＩＩ、ＨｐａＩ６个酶切类型具有多态性,共发现５种ｍｔＤＮＡ单倍型,每种单倍型中检出５０－５５个位点,并利用双酶切制定出其物理图谱。我国牦牛群体ｍｔＤＮＡ多样度ＨＴ为０．１０６５,群体内的平均一致性概率为０．８９６６,表明我国牦牛群体ｍｔＤＮＡ多态性较贫乏,群体间的平均净遗传距离Ｐｅｔ为０．０００２０１,群体基因分化系数Ｇｓｔ为０．０２９１,我国牦牛群体ｍｔＤＮＡ变异只有２．９１％来自群体间的差异,群体间的分化程度较低。并根据报道,比较了牦牛和其他家养牛种的ｍｔＤＮＡ遗传分化,估计出牦牛和普通牛、瘤牛的分化时间大约分别在１．１－２．２百万年和１．０１－１．０２百万年之间。     

应用RAPD技术对蜘蛛系统演化的初步研究

利用随机扩增多态ＤＮＡ 技术检测了３ 类不同蜘蛛的系统发生关系．用１２ 个随机引物对各实验蜘蛛的基因组ＤＮＡ 进行扩增,选择其中扩增谱带清晰的８ 个引物进行分析并计算不同类蜘蛛间的遗传距离．结果表明：所有８ 个引物获得的ＲＡＰＤ谱带均表现为不同程度的多态性;地穴型蜘蛛与结网型蜘蛛间的遗传距离及结网型与游猎型之间的遗传距离,均比地穴型与游猎型之间的遗传距离近,体现了蜘蛛由地穴→结网→游猎的系统演化进程．这一结论与根据古生物学、胚胎学、形态学及生态学等得出的结论一致,从而进一步从ＤＮＡ 分子水平上为蜘蛛系统演化提供了新的证据．     

中国大陆若干群体的黑果蝇的线粒体DNA多态性研究

本文研究了果蝇Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ种群Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ,ｍｔＤＮＡ）的多态性。用９种限制性内切酶ＸｂａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＰｓｔⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＢｇｌⅡ,ＳａｃⅠ,ＳｃａⅠ,ＥｃｏＲＶ和ＰｕｖⅡ,对青岛、南京、上海、宁波与泉州５个Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ群体的ｍｔＤＮＡ进行了限制性片段长度多态性（ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｓｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）的研究。在５群体中,发现５种不同的酶切图谱,它们彼此之间的遗传差异π为０．４６％－１．７６％,群体内遗传差异πｉｊ为０．００％－０．３３％,群体间的差异ｄｘｙ,为０．００％－０．８２％。分布于中国大陆的Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的群体间遗传差异在总遗传差异中所占比例γｓｔ值为２４．６２％。我们发现,Ｄ．ｖｉｒｉｌｉｓ的栖息环境对ｍｔＤＮＡ的遗传变异有十分明显的影响,而不同地理纬度的群体之间其遗传距离并无倾群（ｃｌｉｎｅ）表现。     

凉山山系,小相岭山系大熊猫遗传多样性的DNA指纹比较分析

利用同位素标记大熊猫ＤＮＡ指纹探针Ｆ２ＺＧＰ９６０６０８０１,比较检测了凉山山系和小相岭山系大熊猫随机个体的ＤＮＡ指纹图,获得的遗传多样性参数如下：（１）凉山山系和小相岭山系随机个体的平均谱带数分别是３３．１４和２８．２５条;平均等位基因频率分别是０．４３和０．４８;平均杂合率分别是５７％和５２％。（２）凉山山系和小相岭山系大熊猫各自群体内部个体之间ＤＮＡ指纹的相似系数分别是０．６８和０．７２。将两个山系并为一个大群体后,随机个体的平均谱带数为３０．５３;平均等位基因频率为０．３６;个体之间ＤＮＡ指纹的相似系数为０．５８;平均杂合率上升至６４％。（３）凉山山系和小相岭山系大熊猫群体之间的遗传距离为０．４２,两山系之间已有明显的遗传分化。大熊猫以分布的山系为群体单元时,个体之间遗传相似性高,遗传多样性贫乏;若群体单元扩大到两个山系时,个体之间遗传相似性下降,遗传多样性明显上升。此结果初步表明：大熊猫作为一个物种,遗传多样性可能不是很贫乏,但各个山系内的大熊猫群体,遗传多样性的贫乏程度是相当严重的。     

DNA似近距离及进化时间的估算

在似近分析和Ｎｅｉ氏遗传距离的基础上,给出了ＤＮＡ似近距离计算公式,并以ＤＮＡ似近距离估算类群间的分歧时间（进化时间）,应用１０种限制内切酶对猕猴属（ｇｅｎｕｓ Ｍａｃａｃａ）内５个种ｍｔＤＮＡ的切点数据计算了这５个种的ＤＮＡ似近距离和进化时间,比较由ＤＮＡ似近距,遗传距离构建的歧化树和Ｆｏｏｄｅｎ及Ｄｅｌｓｏｎ的形态歧化树表明,除遗传距离的歧化树外,其它三种歧化树都有一个共同点,就是熊猴（Ｍ．ａ     

RAPD应用于蕈菌研究中的条件优化探讨

在进行鹅膏菌属蕈菌遗传多样性的ＲＡＰＤ分析时,对ＲＡＰＤ分析过程中的ＤＮＡ提取方法、ＤＮＡ纯度、模板ＤＮＡ和ｄＮＴＰ浓度、循环次数、ＤＮＡ不同来源等影响因素进行了大量的实验探索,结果表明：ＤＮＡ不同提取方法具有相同的扩增产物,ＤＮＡ模板中的ＲＮＡ对扩增产物无影响,模板浓度在一个相当大的范围内（５０～４００μｇ）不影响扩增结果．ｄＮＴＰ浓度达０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ时无带谱出现,引物浓度达１μｍｏｌ／Ｌ时出现非特异性带谱,从菌丝体和子实体中提取的ＤＮＡ可获得一致的扩增产物．扩增循环４０～４５周期条件下扩增效果较好,本实验证明了ＲＡＰＤ产物具有很好的重复性,建立了适合蕈菌ＲＡＰＤ分析的ＰＣＲ程序及条件,为ＲＡＰＤ应用于蕈菌的遗传研究打下了良好的基础．     

用显微分光光度术测定不同发育时期蚕豆子叶淀粉质体DNA含量

叙述了用显微光度术在亚细胞水平上测量蚕豆子叶细胞中淀粉质体Ｆｅｕｌｇｅｎ－ＤＮＡ含量,显示了在不同发育时期蚕豆子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量的动态变化。随着发育时期的递增,淀粉体ＤＮＡ拷贝数不断地增长。生长中期的淀粉体ＤＮＡ含量平均数为２．１４（任意单位）,到了成熟期淀粉体ＤＮＡ平均含量增长到１０．１２（任意单位）。在成熟期,子叶细胞中的淀粉体ＤＮＡ含量比生长中期增长了９．６倍。通过生物统计分析,在     

细胞质遗传并非都是母系遗传

细胞质遗传一般表现为具母系遗传的特征。随着ＤＮＡ分子标记技术的发展和应用,人们已发现在动物及植物中均存在有低频的线粒体ＤＮＡ单亲父系遗传及双亲遗传的现象,对质体ＤＮＡ遗传的研究表明,被子植物的质体ＤＮＡ大多表现为母系遗传。而裸子植物的质体ＤＮＡ则主要表现为父系遗传的方式,同时也出现存在其它的遗传规律。     

DNA分子标记技术及其在药用植物研究上的应用前景

ＤＮＡ分子标记技术及其在药用植物研究上的应用前景傅荣昭１邵鹏柱２高文远３孙勇如１１．中国科学院遗传研究所,北京１００１０１２．香港中文大学生化系香港·新界·沙田３．中国医学科学院、中国协和医科大学药用植物研究所北京１０００９４ＤＮＡ分子标记（ＤＮＡｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓ）或称遗传标记（ｇｅｎｅｔｉｃｍａｒｋｅｒｓ）本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的ＤＮＡ片段。这...     

微卫星DNA和AFLP标记在水稻分子标记连锁图上的分布

以一个栽培稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．ｓｐ．ｉｎｄｉｃａ）和野生稻（Ｏ．ｒｕｆｉｐｏｇｏｎＧｒｉｆ）杂交的Ｆ２作图群体以及由该群体构建的ＲＦＬＰ标记连锁图,分析了微卫星ＤＮＡ和ＡＦＬＰ标记的多态性、遗传行为及其在染色体上的分布。共定位了２８个微卫星ＤＮＡ标记和１７２个ＡＦＬＰ标记。２８个微卫星ＤＮＡ标记中有６个为华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室根据数据库中序列而设计,其余２２个来自美国Ｃｏｒｎｅｌ大学已发表的结果。１７２个ＡＦＬＰ标记出自２５对引物扩增得到的２２８个多态性带的片段。这些标记分布于水稻的１２条染色体。将此２００个ＰＣＲ标记与华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室构建的ＲＦＬＰ连锁图整合,得到一张含６１２个分子标记位点的遗传连锁图。     

遗传丰余与酵母后基因组研究

遗传丰余与酵母后基因组研究潘辉李育阳（复旦大学遗传学研究所,上海２００４３３）关键词酿酒酵母遗传丰余后基因组研究酿酒酵母（以下简称酵母）基因组ＤＮＡ全序列测定后,人们从中发现了很多ＤＮＡ重复序列,其中一部分为完全相同的ＤＮＡ序列。如ｒＤＮＡ与ＣＵＰ１...     

Taq DNA聚合酶功能区域的定位

通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个,２３５个,２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体,利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸的５个缺失体．经ＤＮＡ聚合酶活性测定表明Ｎ端缺失３个,２３５个,２８７个氨基酸后活力和完整的Ｔａｑ相近,而缺失４４３个氨基酸后则失去了ＤＮＡ聚合酶活力;Ｃ端的５个缺失体都失去了ＤＮＡ聚合酶活性．据此ＴａｑＤＮＡ聚合酶的功能区域被定位在２８７～８３２氨基酸之间．     

利用ＲＡＰＤ标记技术对白桦种源遗传变异的分析及种源区划

用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分子标记方法对白桦１７个种源１５２个个体进行了遗传变异的比较分析,通过１４个随机引物 共检测到２３３个位点,各种源多态位点百分率差异明显,范围在２０．１７％－３２．１９％之间,多态位点百分率最高的是帽儿山种源和清源种源,最低的是绰尔种源。遗璺变异在种源间占４３．５３％,在种源内个体间占５６．４７％。根据种源间的遗传距离,构建了白桦１７个种源的遗传关系聚类图,结果将东北地区的白桦为一类,华北、西北地区的白桦聚为另一类,同时根据地理气候因子和遗传距离对白桦群体进行了种源区的划分。     

分子生态学研究进展

介绍了这个新学科的基本内容,其特征是ＤＮＡ标记的应用。结合我国最近几年动植物自然种群的分子研究,介绍国际分子生态学各个领域的进展：①分子生态学的技术;②分子种群生物学;③分子环境遗传学;④分子适应。实验结果显示：只要方法灵敏,ＤＮＡ具有最高水平的多样性。即使是原先认为遗传变异很少的大熊猫和野生大豆,使用灵敏的方法,也能证实生物个体遗传组成的唯一性。种群内ＤＮＡ的高度多态性,不同景观生态类型种群之间低水平遗传分化,说明自然种群绝大多数多态ＤＮＡ位点是中性、近中性突变。至今没有发现盐渍条件下植物个体耐盐性水平与多态ＤＮＡ有相关性,更证实这一点。发现少数多态ＤＮＡ位点与形态分化有关或呈明显的地理梯度,暗示其适应意义。自然种群这两种生态学功能不同的多态ＤＮＡ的存在,说明有必要重新讨论遗传多样性研究和保存中的取样策略。分子遗传研究也指导生态系统和物种的保育。文章最后从分子生物学的方法论和已经阐明的生态过程的众多分子信息提出分子生态学的新思路。建议分解生态系统,找出一个或少数物种和环境构成生态系统的基本功能单位,研究所涉及的基因及基因对基因的相互作用。进一步提议首先分析最简单的生态系统里发生的专一过程的分子细节。     

小小卫星DNA阳性克隆的鉴定及DNA指纹分析

提取四种近交系小鼠的肝脏ＤＮＡ,分别用ＨｉｎｆＩ和Ｈａｅ　Ⅲ酶切。用３３．１５和本课题组克隆的小鼠小卫星阳性克隆ＤＮＡ片断作探针,用［α－３２Ｐ］ｄＣＴＰ随机引物标记,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,获得了理想的小鼠ＤＮＡ指纹图谱。初步确定阳性克隆ＤＮＡ片断Ｖ２具有较好的多态性,可作为小鼠基因组小卫星探针,用于实验动物的遗传监测、基因连锁分析和小鼠遗传图谱的研究。     

北京东灵山辽东栎群落DNA多样性的研究

在同工酶研究基础上,利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）及ＤＮＡ扩增指纹（ＤＡＦ）方法,从生态学观点分析了北京东灵山区辽东栎（Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｉａｏｔｕｎｇｅｎｓｉｓ Ｋｏｄｄｚ．）种群的遗传和多样性。对１２个引物扩增产生的２０５个产物（部分）经,Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数分析,结果表明：辽东栎群群内部存在丰富的遗传变异,中央种群的遗传多样性高于边缘种群的遗传多样性。总遗传多样性的９５％发生在种群内