RAPD应用于蕈菌研究中的条件优化探讨 |
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引用本文: | 陈作红,张志光.RAPD应用于蕈菌研究中的条件优化探讨[J].生命科学研究,1998,2(3):199-204. |
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作者姓名: | 陈作红 张志光 |
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作者单位: | 湖南师范大学生物学系 |
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摘 要: | 在进行鹅膏菌属蕈菌遗传多样性的RAPD分析时,对RAPD分析过程中的DNA提取方法、DNA纯度、模板DNA和dNTP浓度、循环次数、DNA不同来源等影响因素进行了大量的实验探索,结果表明:DNA不同提取方法具有相同的扩增产物,DNA模板中的RNA对扩增产物无影响,模板浓度在一个相当大的范围内(50~400μg)不影响扩增结果.dNTP浓度达0.75mmol/L时无带谱出现,引物浓度达1μmol/L时出现非特异性带谱,从菌丝体和子实体中提取的DNA可获得一致的扩增产物.扩增循环40~45周期条件下扩增效果较好,本实验证明了RAPD产物具有很好的重复性,建立了适合蕈菌RAPD分析的PCR程序及条件,为RAPD应用于蕈菌的遗传研究打下了良好的基础.
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关 键 词: | RAPD,蕈菌,条件优化 |
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