红螯光壳螯虾胚胎及仔虾发育过程中卵黄磷蛋白的ELISA检测

建立了间接竞争酶联免疫吸附反应(ELISA)方法,对红螯光壳螯虾(Cherax quadricarinatus)胚胎及仔虾发育过程中的卵黄磷蛋白含量及其亚基组分进行了研究。该方法对卵黄磷蛋白具有良好的特异性,有效检测范围为31.25~250 ng/ml。结果表明,在发育初期胚胎先降解分子量比卵黄磷蛋白大的蛋白;亚基中,分子量较大和较小的亚基都先被消耗;胚胎内卵黄磷蛋白含量总体上呈下降趋势,其中在卵裂囊胚阶段后略有上升(3.19%),至后无节幼体期卵黄磷蛋白含量达最高(4.67%),之后不断下降,到仔虾离开母体独立生活时,含量只剩下卵裂期的1/4。     

大阪鲫鱼两种卵黄蛋白免疫细胞化学的研究

以电泳提纯的卵黄脂磷蛋白和卵黄蛋白Ｌ制备兔抗两种蛋白的抗血清,采用ＰＡＰ法对性腺成熟雌性大阪鲫鱼的肝细胞和卵母细胞进行两种蛋白免疫细胞化学位研究。肝细胞的粗面内质网上有强烈的卵黄脂磷蛋白的阳性反应,特别是在线粒体的基质中也发现卵黄脂磷蛋白的阳性反应,而另外一种类似于卵黄高磷蛋白的卵黄蛋白－卵黄蛋白Ｌ在肝细胞的粗面内质网和线粒体均呈现阴性反应,提示卵黄脂磷蛋白的前体物质存在于肝细胞的粗面内质网和线粒     

柞蚕卵母细胞发育和卵黄磷蛋白摄入

在蛹化第一天的卵巢管中一可见卵母细胞已经分化．但大小和滋养细胞接近。到第三天,卵母细胞体积明星增大,细胞核大而清新,滋养细胞排列趋于规则．滤胞细胞仍为合胞体．分布于卵巢管的周围,以后,滤胞细胞分化,卵母细胞开始摄取卵黄蛋白,并随着卵黄沉积而增大,滋养细胞逐新缩小消失。从卵母细胞纯化出卵黄磷蛋白并制备抗血清．对卵黄磷蛋白的摄入进行了研究,观察到卵黄磷蛋白是由滤胞细胞间隙经滤细胞膜主动运输进入卵母细胞的。     

蛋黄中卵黄高磷蛋白的提取优化及其磷酸肽制备

卵黄高磷蛋白是已知天然蛋白中含磷量最高的蛋白,经适宜蛋白酶水解后形成磷酸肽,该磷酸肽能够与Ca2+、Fe2+、Mg2+等二价金属离子结合形成可溶性络合物,抑制磷酸钙等非可溶性磷酸盐的形成,从而促进机体对钙、铁的吸收。本文主要探索了不同缓冲溶液、不同稀释程度、不同p H值等因素对卵黄高磷蛋白提取效果的影响,并在单因素实验的基础上采用正交试验,进一步优化了卵黄高磷蛋白的提取工艺。结果表明,应用10倍体积的0.05 M的p H 5.2的醋酸-醋酸钠溶液提取的卵黄高磷蛋白效果较好,每10 m L的卵黄可以提取约90mg的卵黄高磷蛋白。提取的卵黄高磷蛋白成品含磷量为7.2%,N/P比为3.9。经过进一步脱磷、酶解等处理制备了卵黄高磷蛋白磷酸肽,该磷酸肽能明显阻滞磷酸钙沉淀的形成,每100 mg能够结合9.1 mg的钙。本实验结果,为后续动物体内补钙功能实验及相关磷酸肽补钙制剂的研发奠定了基础。     

红螯光壳螯虾卵黄磷蛋白的分离纯化和鉴定

采用凝胶层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对红螯光壳螯虾(Cherax quadricarinatus)卵巢中的卵黄磷蛋白进行了分离、纯化和鉴定。结果显示该虾的卵黄磷蛋白是一个分子量为369ku的多聚体,由分子量为85．4、80．6、76．6、73．7ku的四个亚基组成。染色分析表明卵黄磷蛋白为糖-磷-类胡萝卜素结合的复合蛋白。氨基酸组成分析显示天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)为主要氨基酸。     

小体鲟卵黄蛋白生化特性及合成途径的研究

使用葡聚糖凝胶（Sephadex G-200）从小体鲟鱼卵粗提液中,提纯卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin, Lv )和卵黄高磷蛋白(Phosvitin, Pv)。卵黄脂磷蛋白（含糖、磷和脂,等电点7.50）具有雌性特异性, 分子量为144 kD,由97.4 kD和30 kD的大小2个亚基组成。卵黄高磷蛋白（含糖、磷,等电点8.30）其分子量为66 kD,其具有两个亚基,分子量分别为47.6 kD、16.8 kD。制备卵黄脂磷蛋白兔抗血清,采用免疫组化方法对不同年龄小体鲟的肝脏、肠、卵（Ⅱ-Ⅴ期卵巢）及血涂片,进行免疫组织化学定位研究。小体鲟卵巢发育到 Ⅳ期前,卵黄蛋白主要靠卵母细胞自身合成,这个时期内源性合成卵黄蛋白;当卵巢发育到 Ⅳ期,卵母细胞自身不合成卵黄蛋白,主要是通过肝脏合成卵黄蛋白原,通过血液循环运送到卵巢,被卵母细胞吸收后,裂解为卵黄蛋白,这个时期外源性合成卵黄蛋白。     

西伯利亚鲟卵黄脂磷蛋白的分离纯化及性质

卵黄是鱼类胚胎发生期的主要营养物质,卵黄的含量和质量对于早期幼体维持生命和生长发育至关重要.本研究采用Sephacryl S-300凝胶过滤层析法和蛋白质电泳技术分离纯化西伯利亚鲟(Acipenser baerii)卵黄脂磷蛋白(lipovitellin,Lv),层析洗脱共得到7个蛋白峰.对每个峰进行SDS-PAGE电泳及油红O、甲基绿和Schiff试剂特异染色,峰b蛋白均呈阳性,表明峰b蛋白为西伯利亚鲟卵中的一种卵黄脂磷蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,其由3个亚基构成,相对分子质量分别为30.6 ku、40.8 ku和76.7 ku.对西伯利亚鲟Lv氨基酸组成进行分析,证明是一种含有相对较多天冬氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丝氨酸、缬氨酸和亮氨酸的蛋白,并且所含鲜味氨基酸含量比其他鱼偏高.     

半滑舌鳎胚胎发育中后期卵黄囊超微结构观察

在胚胎发育中期,半滑舌鳎胚胎由胚体、卵黄囊和卵周液构成.对半滑舌鳎胚胎发育中后期的卵黄囊进行超微结构观察.结果表明,卵黄囊是由卵黄囊膜和包裹其内的卵黄物质组成.在半滑舌鳎胚胎发育过程中,卵黄囊内的卵黄物质逐渐消耗产生低分子量的卵黄磷蛋白分裂小泡.分裂小泡转移到卵黄囊内部消黄细胞中,在消黄细胞的作用下分裂小泡转化成卵黄颗粒.随后卵黄颗粒在卵黄囊内表面聚集成囊状结构并转移运输到卵黄囊膜内部,最后把卵黄物质从卵黄囊膜转移并释放到卵周液中,为胚胎发育提供营养.     

莫桑鼻给非鲫卵黄球结晶体的电镜观察

运用透射电镜观察了莫桑鼻给非鲫卵母细胞内卵黄球的结构;卵黄球由被膜、结晶体及两者之间的非结晶区三部分组成。卵黄球结晶体呈斜方点阵,组成结晶体的卵黄高磷蛋白分子排列呈拟六角形列阵。本文还探讨了卵黄球结晶体形成的可能机制及生物学意义。     

家蚕卵半胱氨酸蛋白酶纯化及抗血清制备

据报道,家蚕卵中存在半胱氨酸蛋白酶(Cysteine proteinase,CP),其性质与哺乳类溶酶体半胱氨酸蛋白酶类的组织蛋白酶L相似,最佳作用pH为3.5,体外最适作用底物为牛血红蛋白,体内最适作用底物为卵黄磷蛋白。经SDS—PAGE分析,分子量47KD。其主要作用是在胚胎发育过程中降解卵黄蛋白质,供胚胎发育之需要。 在成熟卵中具很高含量的半胱氨酸蛋白酶,在胚胎发育开始前,并不发生卵黄蛋白质的水解,其作用机制尚待阐明。为了进一步研究半胱氨酸蛋白酶的组织分布、合成位点、及cDNA克隆等,作者从家蚕卵中纯化了半胱氨酸蛋白酶,并制备了抗血清。     

西安市学生膝部长骨的干骺融合时间与身高等发育指标的关系

本文根据西安市2612例学生的活体测量以及电子计算机对数据的统计分析,得出了西安市学生身高等发育指标及有关指数,绘制了有关的发育曲线,讨论了身高等发育指标与膝部长骨干骺融合的关系。