地塞米松干预对哮喘大鼠气道形态、肺组织Galectin-8及ERK1/2表达的影响

为探讨地塞米松对哮喘大鼠气道形态、肺组织半乳糖凝集素-8(Galectin-8)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达情况的干预作用,本研究选取SPF级健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组10只,哮喘组和地塞米松组大鼠采用卵清白蛋白致敏与激发,建立大鼠哮喘模型。其中,地塞米松组在每次激发前给予地塞米松干预,对照组用生理盐水腹腔注射和雾化吸入。采用图像分析技术测定各组气道壁形态指标,免疫组化、RT-PCR检测Galectin-8、p-ERK1/2、Galectin-8 mRNA和ERK1/2 mRNA的表达。在气道壁厚度、平滑肌厚度、Galectin-8、ERK1/2表达上,哮喘组较对照组均显著增加(p0.05);地塞米松组较哮喘组均明显降低(p0.05),但仍高于对照组(p0.05)。相关性分析显示:哮喘组大鼠气道壁厚度、平滑肌厚度与Galectin-8、Galectin-8 mRNA、p-ERK1/2及ERK1/2 mRNA呈正相关。研究说明,Galectin-8和ERK1/2可能参与了大鼠哮喘气道重塑过程,而地塞米松干预可抑制气道壁厚度和平滑肌厚度,并显著降低Galectin-8和ERK1/2表达。     

布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制

摘要 目的：探究布地奈德通过干预线粒体钙单转运蛋白影响哮喘大鼠气道上皮细胞自噬和屏障功能的机制。方法：30只雄性SD大鼠作为研究对象,并根据实验目的分为3组：对照组（正常大鼠,生理盐水干预,n=10）,哮喘组（通过OVA诱导大鼠哮喘模型,n=10）,布地奈德组（气雾剂布地奈德用于治疗过敏性哮喘的大鼠,n=10）。通过钙测定试剂盒和蛋白印迹分析大鼠气道上皮细胞中Ca²⁺的吸收和MCU蛋白表达;TEER和TRITC 荧光分析检测大鼠气道上皮中的屏障功能;免疫组化分析分气道上皮细胞屏障功能相关因子ZO-1、E-cadherin的蛋白表达;ELISAF分析BALF上清液中炎性因子IL-4、IL-5和IL-13的水平;二氢乙锭衍生物和蛋白印迹分析BALF中ROS含量和caspase-3活性。结果：哮喘组较对照组Ca²⁺浓度降低,MCU蛋白表达升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组Ca²⁺浓度升高,MCU蛋白表达降低（P<0.05）。哮喘组较对照组TEER降低,TRITC升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组TEER升高,TRITC降低（P<0.05）。哮喘组较对照组ZO-1、E-cadherin的蛋白表达降低（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组ZO-1、E-cadherin的蛋白表达升高（P<0.05）。哮喘组较对照组IL-4、IL-5和IL-13的水平升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组IL-4、IL-5和IL-13的水平降低（P<0.05）。对照组组支气管和肺泡结构未见异常,与对照组相比哮喘组大鼠表现出肺泡间隔增厚,可见的肺毛细血管水肿,以及肺毛细血管和肺泡间隙中的大量炎性细胞浸润（P<0.05）,与哮喘组相比,布地奈德组显著减轻肺部病变的严重程度（P<0.05）。哮喘组较对照组LC3B II/I、ATG5、Beclin-1 和LC3II 的表达升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组LC3B II/I、ATG5、Beclin-1 和LC3II 的表达降低（P<0.05）。哮喘组较对照组ROS含量和caspase-3活性升高（P<0.05）,布地奈德组较哮喘组ROS含量和caspase-3活性降低（P<0.05）。结论：布地奈德通过调节MCU表达介导气道上皮细胞的屏障完整性和自噬水平,缓解哮喘气道炎症,改善哮喘症状。     

VEGF与其受体2在哮喘大鼠气道中表达变化及其对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)在哮喘大鼠气道中表达变化及其对气道平滑肌细胞增殖的影响.方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松干预组各6只.以腹腔注射1%卵蛋白致敏和2%卵蛋白雾化吸入激发复制哮喘模型,干预组在每次激发前给予地塞米松干预.用免疫组织化学技术检测气道平滑肌α-actin以及VEGF和Flk-1蛋白质在不同组大鼠肺组织的表达程度;用RT-PCR方法检测VEGF和Flk-1mRNA在不同组大鼠肺组织的表达程度;采用HMIAS-2000型高清晰度彩色医学图文分析系统进行图像分析.结果 (1)哮喘模型组气道壁平滑肌厚度较对照组和干预组显著增加(P<0.05).(2)哮喘模型组VEGF及Flk-1蛋白质在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05).(3)哮喘模型组VEGF144,VEGF188 mRNA和VEGF205 mRNA在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05或P<0.01).哮喘模型组Flk-1mRNA在大鼠肺组织中的表达较对照组和干预组显著增加(P<0.05).直线相关性分析显示,气道壁平滑肌厚度与大鼠肺组织中VEGF205,188,144及Flk-1mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.739,0.747,0.744,0.682;P<0.05);气道壁平滑肌厚度与大鼠肺组织中VEGF及Flk-1蛋白质表达水平也呈正相关(r分别为0.693,0.672;P<0.05).结论哮喘模型大鼠肺组织中VEGF及其受体Flk-1表达上调,并与气道平滑肌增殖有密切关系.该结果提示VEGF及其受体2可能参与了哮喘气道重建中气道平滑肌增殖的过程.     

淫羊藿苷对RSV感染诱发哮喘小鼠体内PGD2水平的影响

摘要 目的：观察淫羊藿苷对RSV感染诱发哮喘小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中前列腺素D2（Prostaglandin D2,PGD2）表达水平的影响,以期为哮喘治疗寻找新的靶点。方法：30只Balb/c小鼠随机均分为三组：即正常组,OVA/RSV-YYH组（即淫羊藿苷治疗组）及OVA/RSV-非YYH组（即未经淫羊藿苷治疗组）。卵蛋白致敏RSV感染诱发小鼠哮喘模型成功建立后,予以淫羊藿苷2.5 mg连续腹腔注射治疗2周,比较治疗前后肺功能检测结果、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中细胞分类计数、血清及BALF中PGD2表达水平、肺组织病理学变化。结果：淫羊藿苷治疗后,哮喘小鼠肺功能较治疗前明显改善,差异有统计学意义（P<0.05）;PGD2水平较前明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）;各分类白细胞计数较前明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）,气道管壁增厚及管腔狭窄现象较前明显改善,肺组织炎症细胞浸润较前减少。结论：淫羊藿苷可有效降低RSV感染诱发哮喘小鼠体内炎性介质PGD2水平,从而改善气道重塑,减轻小鼠的哮喘症状,它可能是以后哮喘治疗的一个新的靶点。     

布地奈德混悬液对哮喘幼鼠上皮-间充质转化和气道重塑的影响及机制

摘要 目的：探讨布地奈德混悬液对哮喘幼鼠上皮-间充质转化和气道重塑的影响及机制。方法：将哮喘幼鼠(n=36)随机平分为三组-模型组、布地奈德1组、布地奈德2组,三组分别给予雾化吸入生理盐水、布地奈德混悬液0.1 mg与布地奈德混悬液0.2 mg,1次/d,共14d,检测与观察幼鼠上皮-间充质转化和气道重塑变化情况。结果：布地奈德1组、布地奈德2组的支气管肺泡灌洗液白细胞总数与嗜酸性粒细胞总数都低于模型组(P<0.05),布地奈德2组低于布地奈德1组(P<0.05)。布地奈德1组、布地奈德2组的血清肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α、血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)-1含量低于模型组(P<0.05),布地奈德2组低于布地奈德1组(P<0.05)。布地奈德1组、布地奈德2组的支气管壁厚度(WAt/Pi)、支气管壁平滑肌细胞核数量(N/Pi)、支气管壁平滑肌厚度(WAm/Pi)都高于模型组,布地奈德2组高于布地奈德1组(P<0.05)。布地奈德1组、布地奈德2组的肺组织E-cadherin、NF-κB蛋白相对表达水平低于模型组(P<0.05),布地奈德2组低于布地奈德1组(P<0.05)。结论：布地奈德混悬液在哮喘幼鼠的应用能抑制上皮-间充质转化和气道重塑,也可抑制TNF-α、HO-1的释放,减轻嗜酸性粒细胞与白细胞的浸润,从而发挥肺保护作用,且存在剂量依赖性。     

车前草提取物对缺氧性肺动脉高压SD大鼠模型肺动脉压力、肺功能及炎症因子的影响

摘要 目的：探讨车前草提取物对缺氧性肺动脉高压(HPH)SD大鼠模型肺动脉压力、肺功能及炎症改变的效果。方法：随机选取18只SD雄性大鼠分为3组,正常对照组（Control组）、缺氧性肺动脉高压（HPH组）、车前草干预组（PW组）,每组各6只。观察并记录各组大鼠日常状况,于第21天测定大鼠肺动脉压力、肺功能后处死各组6只大鼠,获取大鼠肺组织标本,左肺泡灌洗液予Elisa试剂盒检测各组ICAM-1、TGF-β、MMP-9因子含量,右肺上中下叶各取一块组织行苏木精-伊红染色,其余肺组织研磨匀浆后予Elisa试剂盒检测HIF-1α含量。结果：用PW干预HPH大鼠,可降低SD大鼠的平均肺动脉压力,提高0.4 sFEV、FVC、0.4sFEV/FVC、MMEF等肺功能指标,降低肺泡灌洗液中ICAM-1、TGF-β、MMP-9炎症因子水平及肺组织中HIF-1a水平,气道及肺动脉管腔扩大,管壁变薄,炎性细胞浸润减少。结论：车前草提取物能降低HIF-1a水平,减轻HPH SD大鼠的炎症反应,降低肺动脉压力,提升肺功能,改善肺动脉及气道重塑。     

1,25二羟维生素D3对哮喘大鼠气道重塑及纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的观察1,25二羟维生素D3（VD）对哮喘大鼠气道重塑及其肺组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）表达和血浆中PAI-1含量的影响。方法 30只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、VD干预组,每组各10只。卵蛋白致敏和激发复制慢性哮喘模型。VD干预组每次激发前给予VD干预。用免疫组化检测肺组织PAI-1的表达,酶联免疫法测血浆中PAI-1含量,采用图像分析进行图像分析。结果 （1）哮喘组支气管管壁厚度较对照组和VD干预组显著增加（P〈0.01）。（2）哮喘组PAI-1在大鼠肺组织的表达程度较对照组和VD干预组显著增加（P〈0.01）。（3）哮喘大鼠血浆中PAI-1含量较对照组和VD干预组明显增加（P〈0.01）。（4）直线相关性分析显示,哮喘组支气管管壁厚度与大鼠肺组织中PAI-1表达水平呈正相关（r=0.822,P〈0.01）;哮喘组支气管管壁厚度与大鼠血浆中PAI-1含量呈正相关（r=0.942,P〈0.01）。结论 1,25二羟维生素D3干预可明显减轻慢性哮喘气道重塑的病理改变,并可通过部分抑制PAI-1的表达来延缓气道重塑。     

Calpeptin通过抑制GATA3减轻变应性鼻炎大鼠炎症

摘要 目的：本研究旨在评估钙蛋白酶抑制剂calpeptin减轻变应性鼻炎大鼠炎症的作用并探讨其机制。方法：将20只雄性SD大鼠采用数字表法随机分为4组：正常组（Normal）、变应性鼻炎组（AR）、地塞米松干预AR组（DXMS+AR）、calpeptin干预AR组（Calpeptin+AR）。造模成功后,对大鼠AR症状进行行为学评分,对大鼠鼻黏膜组织切片以HE和PAS染色法观察鼻黏膜病理改变;对大鼠外周血以ELISA法检测总IgE、IL-4、IL-13水平;对大鼠鼻黏膜组织以免疫蛋白印迹法检测GATA3蛋白表达水平。单因素方差分析进行多组间比较,LSD- t检验进行组间两两比较。结果：与Normal组相比,AR组大鼠的鼻部过敏症状、鼻黏膜嗜酸粒细胞计数及外周血总IgE水平均升高,Calpeptin与地塞米松均能减轻气道炎症,减少嗜酸性粒细胞浸润,降低血清中OVA诱导的IgE的生成。探讨机制发现,酶联免疫吸附试验检测Th2细胞因子,与Normal组比较,AR组血清IL-4、IL-13水平均升高（P＜0.05）,而Calpeptin与地塞米松均能降低血清IL-4、IL-13水平（P＜0.05）。免疫蛋白印迹法检测大鼠鼻黏膜GATA3蛋白表达水平显示,与Normal组比较,AR组鼻黏膜 GATA3表达升高（P＜0.05）,而Calpeptin与地塞米松组鼻黏膜 GATA3表达均下降（P＜0.05）。结论：腹腔注射calpeptin能够减轻变应性鼻炎大鼠局部和全身过敏反应,其机制可能下调GATA3表达,影响Th2细胞的分化及细胞因子的分泌有关。     

基于p38MAPK通路探讨银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道黏液高分泌及血管重塑的影响

摘要 目的：探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract, GBE）通过调控p38MAPK通路对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）大鼠气道黏液高分泌及肺血管重塑的影响。方法：将90只大鼠随机分为空白对照组、COPD模型组、GBE高剂量组、GBE中剂量组、GBE低剂量组、SB203580组。采用香烟烟雾熏吸联合气道内注入脂多糖（LPS）的方法建立COPD大鼠模型,造模结束后分组给药;通过维多利亚蓝+VG染色观察大鼠肺小动脉病理改变,测量血管壁厚度占血管外径百分比（WT%）、管壁面积占血管面积百分比（WA%）的变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肺泡灌洗液（BALF）与血清中TNF-α、TGF-β的表达;实时荧光定量法（RT-PCR）检测肺组织表皮生长因子受体（EGFR）、黏蛋白5AC（MUC5AC）mRNA表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测肺组织EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达。结果：与空白对照组比较,COPD模型组WT%、WA%明显升高（P＜0.05）;与COPD模型组比较,各药物干预组WT%、WA%明显降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠BALF及血清中TNF-α、TGF-β水平较空白对照组明显升高（P＜0.05）,各药物干预组TNF-α、TGF-β水平较COPD模型组明显下降（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与COPD模型组相比显著降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与COPD模型组相比明显降低（P＜0.05）,不同GBE剂量干预组中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达量随着给药剂量增加而减少。结论：GBE能够抑制COPD大鼠气道黏液分泌、改善肺血管重塑,其机制可能与抑制p38MAPK通路有关。     

支气管哮喘豚鼠肺组织中KLF2 的表达及意义

目的:探讨锌指Krüppel样转录因2(KLF2)在豚鼠支气管哮喘肺组织中的表达及意义。方法:30只健康雄性豚鼠,按随机数字表法分为对照组(A组)、哮喘组(B组)及地塞米松治疗组(C组),每组10只。卵清蛋白致敏法复制哮喘模型。观察豚鼠肺组织病理学改变,BALF细胞总数及分类计数;采用原位杂交和RT-PCR检测肺组织中KLF2的mRNA表达情况,免疫组化和Westernblot检测肺组织中KLF2的蛋白表达水平。结果:(1)哮喘组豚鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)、中性粒细胞百分比(NEU%)显著高于对照组(P<0.01),哮喘组肺组织可见大量炎症细胞浸润,及明显气道重塑改变,而地塞米松治疗组BALF炎细胞浸润及肺组织病理改变较哮喘组明显减轻;(2)KLF2mRNA和蛋白在哮喘组表达显著低于对照组,在地塞米松治疗组中的表达明显高于哮喘组,3组差异均有统计学意义(P均<0.01);(3)KLF2蛋白以及mRNA与肺泡灌洗液炎细胞总数及EOS%,NEU%呈负相关。结论:KLF2在支气管哮喘急性发作期模型中表达明显下降,而地塞米松治疗后KLF2的表达上调,提示KLF2可能在支气管哮喘的发病机制与防治中起重要作用。     

p-ERK1／2及ERK2mRNA在哮喘大鼠气道中的表达变化

目的探讨细胞外信号调节激酶在哮喘大鼠气道中表达变化及其对气道平滑肌细胞增殖的影响。观察细胞外信号调节激酶是否参与了哮喘气道重构这一病理过程。方法18只6周龄雄性wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松干预组各6只。以腹腔注射10％卵蛋白和1％卵蛋白雾化吸入复制慢性哮喘模型。干预组在每次激发前给予地塞米松干预。用免疫组化与原位杂交法检测p-ERK1／2及ERK2mRNA在不同大鼠肺组织的表达程度,采用图像分析系统进行图象分析。结果（1）哮喘模型组气道壁面积和平滑肌厚度较对照组和干预组显著增加（P〈0．05）。（2）哮喘组p-ERK1／2及ERK2mRNA在大鼠肺组织的表达程度较对照组和干预组显著增加（P〈0．05）。（3）直线相关性分析显示,哮喘组气道壁面积和平滑肌厚度与大鼠肺组织中p-ERK1／2表达水平呈正相关（分别为r=0．858,r=0．848,P均〈0．05）,哮喘组气道壁面积和平滑肌厚度与大鼠肺组织中ERK2mRNA表达水平呈正相关,（分别为r=0．918,r=0．860,P均〈0．05）。结论哮喘大鼠肺组织p-ERK1／2及ERK2mRNA表达上调,并与气道重构密切相关,该结果提示细胞外信号调节激酶可能参与了气道重构中平滑肌的增殖过程。     

TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中的表达及意义

为了探讨TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中的表达及意义,本研究选取清洁级雄性SD大鼠40只,将大鼠随机分为4组,正常对照组,哮喘2周组,哮喘4周组和哮喘8周组,每组10只。其中哮喘2周组、哮喘4周组和哮喘8组大鼠制作哮喘模型,分别在激发哮喘2周、4周和8周后处死,采用HE染色观察各组气道重塑,同时测量气道形态学参数,采用免疫组化染色检测TGF-β1、Smad2和Smad7蛋白表达。结果表明与哮喘2周组和哮喘4周组相比,哮喘8周组气道支气管壁周围有大量细胞浸润,气道平滑肌增厚,管腔狭窄;哮喘各组总管壁面积、内壁面积和平滑肌面积均明显高于正常对照组(p<0.05),其中哮喘8周组总管壁面积、内壁面积和平滑肌面积分别为(42.26±1.61)μm^2、(34.40±1.22)μm^2和(8.22±1.12)μm2,明显高于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05);哮喘8周组TGF-β1和Smad2蛋白表达分别为1.562±0.122和1.613±0.121,明显高于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05),而Smad7蛋白表达为0.251±0.081,明显低于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05)。本研究初步推测TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中有重要作用,其中TGF-β1和Smads可能有促进气道重塑的作用,而Smad7可能有抑制气道重塑作用,值得进一步研究。     

血管内皮生长因子及其受体2与哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖关系的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)在哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中表达变化及其对ASMC增殖的影响。方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松干预组各6只,并培养各组气道平滑肌细胞。用免疫组织化学技术检测ASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;用RT-PCR及Western blot方法分别检测VEGF和Flk-1mRNA及蛋白质在不同组大鼠ASMC的表达程度。结果(1)哮喘模型组ASMC PCNA表达较对照组和干预组显著增加(P0.05)。(2)哮喘模型组ASMC VEGF164,VEGF188mRNA和VEGF205mRNA的表达较对照组和干预组显著增加(P0.05或P0.01)。(3)哮喘模型组ASMC VEGF及Flk-1蛋白质在大鼠ASMC中的表达较对照组和干预组显著增加(P0.05)。直线相关性分析显示,大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF205,188,164及Flk-1mRNA表达水平呈正相关(r分别为0.79,0.86,0.83,0.68;P0.05);大鼠ASMC PCNA表达与大鼠ASMC中VEGF及Flk-1蛋白质表达水平也呈正相关(r分别为0.80,0.77;P0.05)。结果 哮喘模型大鼠ASMC中VEGF及其受体Flk-1表达上调,并与气道平滑肌细胞增殖有密切关系。该结果提示VEGF及其受体2可能参与了哮喘气道重建中气道平滑肌细胞增殖的过程。     

平喘颗粒的药效学研究

目的:研究平喘颗粒的药效学作用。方法:小鼠随机分为空白组(或/和)模型组,喘嗽宁组(0.7 g/kg)、平喘颗粒组(31.2 g/kg)、平喘颗粒组(15.6 g/kg)、平喘颗粒组(7.8 g/kg)。采用酚红外排,氨水引咳,二甲苯致小鼠耳廓肿胀,琼脂导致小鼠肉芽肿炎症,小鼠负重游泳,小鼠耐常压缺氧,小鼠巨噬细胞吞噬实验观察平喘颗粒的祛痰,镇咳,抗炎,抗疲劳,抗乏氧和提高免疫力作用。大鼠随机分为空白组、模型组、喘嗽宁组(0.486 g/kg)、平喘颗粒组(21.6 g/kg)、平喘颗粒组(10.8 g/kg)、平喘颗粒组(5.4 g/kg),给予卵蛋白激发哮喘,观察平喘颗粒的平喘作用;豚鼠随机分为模型组、喘嗽宁组(0.419 g/kg)、平喘颗粒组(18.6 g/kg)、平喘颗粒组(9.3 g/kg)、平喘颗粒组(4.65 g/kg),喷入磷酸组胺和氯化乙酰胆碱,观察平喘颗粒的平喘作用。结果:平喘颗粒(31.2 g/kg、15.6 g/kg、7.8 g/kg)可显著提高小鼠酚红的排出量(P0.05),延长氨水致小鼠咳嗽的潜伏期(P0.05),减少氨水所致小鼠咳嗽次数(P0.05),减少二甲苯致小鼠耳廓肿胀程度(P0.05),减少琼脂导致小鼠肉芽肿重量(P0.01),提高小鼠负重游泳时间(P0.05),提高小鼠耐常压缺氧时间(P0.05),可显著提高小鼠巨噬细胞吞噬能力(P0.05)。平喘颗粒(21.6 g/kg、10.8 g/kg、5.4 g/kg)延长卵蛋白致大鼠哮喘发作的潜伏期(P0.05);平喘颗粒(18.6 g/kg、9.3 g/kg、4.65 g/kg)延长磷酸组胺和氯化乙酰胆碱致豚鼠哮喘发作的潜伏期(P0.05)。结论:平喘颗粒具有较好的镇咳,祛痰,抗急、慢性炎症,抗疲劳,抗乏氧,提高免疫力,平喘的作用。     

茵陈蒿汤加减方对哮喘大鼠模型气道TGF-beta1 的干预作用

目的:探讨茵陈蒿汤加减方对哮喘气道转化生长因子-β1(TGF-β1)的干预机制。方法:制备大鼠哮喘模型,模型动物随机分为四个组:模型组、西药(地塞米松)组、中药组,空白对照组,每组10只大鼠。从第17天起开始给予相应药液灌胃,西药组给予地塞米松1 g/kg,中药组给予茵陈蒿汤加减方配方颗粒溶液(浓度0.5 g/m L)5 m L/kg,每日1次。空白对照组和模型组分别以等量的生理盐水灌胃,每周按照大鼠体重调整1次。连续给药干预4周,检测血清中TGF-β1含量并进行比较分析。结果:中药组与西药组均可降低TGF-β1的含量,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),中药组与西药组效果相当(P>0.05)。结论:茵陈蒿汤加减方能通过有效地减低大鼠血清中TGF-β1的含量,从而阻断气道重塑的发生,达到预防和缓解哮喘的治疗目的。     

毛喉鞘蕊花提取物对大鼠哮喘模型炎症介质的影响及机制研究

为探讨毛喉鞘蕊花提取物(Coleus Forskohlii extract,CFE)对哮喘的治疗作用及机制,采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)结合佐剂氢氧化铝建立大鼠哮喘模型,SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为5组,即空白组、模型组、地塞米松组、CFE高剂量组(12.8g/kg)和CFE低剂量组(6.4g/kg),分别用生理盐水、地塞米松及CFE每天灌胃1次,连续14天,灌胃容积为1mL/100g。通过HE染色观察肺组织病理学形态学变化;ELISA法测定大鼠血清(serum)及肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ、IL-4和IL-17A含量变化;Western blot检测MAPK通路相关蛋白的表达变化。HE结果显示,与模型组相比,CFE高、低剂量组能显著减轻OVA刺激后大鼠肺组织病理性损伤,气道轮廓清晰,上皮细胞脱落明显减少;ELISA结果显示,与模型组相比,CFE高、低剂量组大鼠血清及BALF中IL-4、IL-17A的含量明显下降,IFN-γ的含量明显上升(P<0.05或P<0.01);WB结果显示,CFE高剂量组可显著降低大鼠肺组织p-ERK、p-JNK及p-p38蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。综上,毛喉鞘蕊花提取物可有效缓解OVA诱导的大鼠哮喘气道炎症反应,其机制与调节MAPK信号传导通路有关。     

Bulleyaconitine A inhibits the lung inflammation and airway remodeling through restoring Th1/Th2 balance in asthmatic model mice

ABSTRACT

The current study aimed to study the effects of Bulleyaconitine A (BLA) on asthma. Asthmatic mice model was established by ovalbumin (OVA) stimulation, and the model mice were treated by BLA. After BLA treatment, the changes in lung and airway resistances, total and differential leukocytes in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were detected, and the changes in lung inflammation and airway remodeling were observed. Moreover, the secretion of IgE, Th1/Th2-type and IL-17A cytokines in BALF and serum of the asthmatic mice were determined. The resuts showed that BLA attenuated OVA-induced lung and airway resistances, inhibited the inflammatory cell recruitment in BALF and the inflammation and airway remodeling of the asthmatic mice. In addition, BLA suppressed the secretion of IgE, Th2-type cytokines, and IL-17A, but enhanced secretions of Th1-type cytokines in BALF and serum. The current study discovered that BLA inhibited the lung inflammation and airway remodeling via restoring the Th1/Th2 balance in asthmatic mice.     

Critical regulation of bone morphogenetic protein-induced osteoblastic differentiation by Delta1/Jagged1-activated Notch1 signaling

Functional involvement of the Notch pathway in osteoblastic differentiation has been previously investigated using the truncated intracellular domain, which mimics Notch signaling by interacting with the DNA-binding protein CBF-1. However, it is unclear whether Notch ligands Delta1 and Jagged1 also induce an identical cellular response in osteoblastic differentiation. We have shown that both Delta1 and Jagged1 were expressed concomitantly with Notch1 in maturating osteoblastic cells during bone regeneration and that overexpressed and immobilized recombinant Delta1 and Jagged1 alone did not alter the differentiated state of MC3T3-E1 and C2C12 cells. However, they augmented bone morphogenetic protein-2 (BMP2)-induced alkaline phosphatase activity and the expression of several differentiation markers, except for osteocalcin, and ultimately enhanced calcified nodule and in vivo ectopic bone formation of MC3T3-E1. In addition, both ligands transmitted signal through the CBF-1-dependent pathway and stimulated the expression of HES-1, a direct target of Notch pathway. To test the necessity of Notch signaling in BMP2-induced differentiation, Notch signaling was inhibited by the dominant negative extracellular domain of Notch1, specific inhibitor, or small interference RNA. These treatments decreased alkaline phosphatase activity as well as the expression of other differentiation markers and inhibited the promoter activity of Id-1, a target gene of the BMP pathway. These results indicate the functional redundancy between Delta1 and Jagged1 in osteoblastic differentiation whereby Delta1/Jagged1-activated Notch1 enhances BMP2-induced differentiation through the identical signaling pathway. Furthermore, our data also suggest that functional Notch signaling is essential not only for BMP2-induced osteoblast differentiation but also for BMP signaling itself.