大鼠延髓至下丘脑腹内侧核的儿茶酚胺能投射神经元在胃伤害性刺激后的Fos表达

本实验用ＨＲＰ注入下丘脑腹内侧核结合逆行追踪与抗ＦＯＳ蛋白和抗酪氨酸羟化酶（ＴＨ）抗血清双重免疫细胞化学相结合的三重标记方法,对大鼠孤束核和延髓腹外侧区至下丘脑腹内侧核的儿茶酚胺能投射神经元在胃伤害性刺激后的ｃ－ｆｏｓ表达进行了观察。本文发现孤束核和延髓腹外侧区有七种不同的标记细胞：ＨＲＰ、Ｆｏｓ、ＴＨ单标细胞Ｆｏｓ／ＨＲＰ、Ｆｏｓ／ＴＨ、ＨＲＰ／ＴＨ双标细胞和Ｆｏｓ／ＨＲＰ／ＴＨ三标细胞。上述七种标记细胞主要分布在延髓中段和尾段孤束核的内侧亚核和延髓腹外侧区以及两者之间的网状结构。ＨＲＰ标记细胞以注射侧为主,对侧有少量分布。本文结果证明,大鼠孤束核、延髓腹外侧区和网状结构内儿茶酚胺能神经元有些至下丘脑腹内侧核的投射,其中一部分儿茶酚胺能神经元参与了胃伤害性刺激的传导和调控。     

大鼠杏仁基底外侧核腹侧部向杏仁中央核的纤维投射──HRP逆行示踪结合免疫组织化学法研究

本实验采用ＨＲＰ逆行示踪结合免疫组织化学方法,对大鼠杏仁底基底外侧核腹侧部向中央杏仁核的纤维投射特征及其化学特性进行了研究。一侧杏仁中央核（Ｃｅ）内注射ＨＲＰ后,于双侧杏仁基底外侧核腹侧部（ＢＬＶ）观察到大量ＨＲＰ标记神经元,以对侧为主;在杏仁基底外侧核前（ＢＬＡ）、后（ＢＬＰ）部及梨状皮质内侧部（ＰＣＭ）第Ⅱ、Ⅲ层仅观察到少量ＨＲＰ标记神经元。当注射范围局限于杏仁中央核内侧部（ＣｅＭ）,ＢＬＶ的标记神经元相对多．当注射范围局限于杏仁中央核外侧部（ＣｅＬ）,ＢＬＶ的标记神经元相对少。将有ＨＲＰ标记神经元的切片分别与生长抑素（ＳＯＭ）、脑啡呔（ＥＮＫ）、Ｐ物质（ＳＰ）抗血清按ＡＢＣ法完成免疫组织化学反应,结果在ＢＬＶ、ＰＣＭ第Ⅱ、Ⅲ层观察到ＨＲＰ－ＳＯＭ免疫阳性双标记神经元,但未发现ＨＲＰ－ＳＰ、ＨＲＰ－ＥＮＫ免疫阳性双标记神经元;在ＢＬＡ和ＢＬＰ未发现ＨＲＰ－ＳＯＭ、ＨＲＰ－ＥＮＫ、ＨＲＰ－ＳＰ免疫阳性双标记神经元。本文着重讨论了ＢＬＶ与内脏功能活动的关系,认为ＢＬＶ不同于ＢＬＡ与ＢＬＰ,它参与“内脏环路”。此外,还分析了ＰＣＭ投射到Ｃｅ的神经元的功能学意义。     

KF核及B(o)tzinger复合体内GABA能神经元向膈神经核的投射

实验在６只成年猫上进行。将ＷＧＡ－ＨＲＰ微量注入Ｃ５膈神经核内,通过逆行追踪及ＧＡＢＡ免疫组织化学ＦＩＴＣ荧光双重标记方法,研究了脑干内ＧＡＢＡ能神经元向膈神经核的投射。结果在脑桥ＫＦ核和面神经后核周围区（即Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体）观察到ＧＡＢＡ－ＨＲＰ双标神经元。另外,在中缝大核、旁巨细胞外侧核及前庭神经核也观察到双标神经元。本实验结果表明：发自上述脑干神经核团,特别是ＫＦ核及Ｂｏｔｚｉｎｇｅ     

外周伤害性刺激诱导大鼠脑干内延髓网状背侧亚核传入投入神经元的c—fos表达

用荧光金逆行追踪和FOS荧光免疫组织化学染色相结合的方法对外周伤害性刺激下大鼠脑干内向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中c-fos的表达进行了研究，在麻醉状况下将0.15μl2%荧光金注入大鼠单侧延髓网状背侧亚核，存活5d后用1％福尔马林刺激同侧前爪、后爪和口周，2h后灌注取材，再行FOS免疫荧光标记。结果发现在脑的中脑导水管周围灰质、中缝背核、线形核和中缝大核内观察到荧光金记细胞、FOS样免疫阳性反应细胞及荧光金／FOS双标细胞。在这四个核团中，双标细胞数分别占荧光金逆标神经元数的25％（中脑导水管周围灰质）、11.7%（中缝背核）、8.9%（线形核）和12.1%（中缝大核）。结果提示在脑干向延髓网状背侧亚核投射的神经元中，有一部分与外周伤害性刺激信息的调控有关，还有的神经元可能具有其它的功能。     

唇针及麦角酰二乙胺(LSD)对大鼠中缝背核单位放电的影响

本实验在麻醉或固定的大鼠上进行。电刺激坐骨神经和用有齿镊夹尾作为伤害性刺激。电针“人中”和“承浆”穴位。用玻璃微电极细胞外记录中缝背核神经元的单位放电。其主要结果如下:1.外周伤害性刺激能使大鼠中缝背核大多数神经元的自发放电频率减慢或暂时停止。2.唇针可激活中缝背核大多数神经元,使其自发放电频率增加和使大多数中缝背核神经元对伤害性刺激反应的持续时间缩短。3.LSD 对中缝背核神经元自发放电的抑制作用与其剂量大小密切相关。     

大鼠内脏大神经电刺激后C－Fos在中枢神经系统中的表达

有关内脏痛的问题,已有不少学者进行了研究。但由于内脏痛本身的复杂性,至今其中枢传导途径还不太清楚。本实验刺激大鼠内脏大神经后,利用Ｆｏｓ的免疫组化技术在下列结构中可以发现Ｆｏｓ免疫组化阳性反应的神经元：隔外侧核、斜角带核、丘脑的菱形核、连接核、下丘脑室旁核、中缝背核、兰斑、中缝大核、网状外侧核、脊髓ＲｅｘｅｄⅠⅡⅢⅩ层等结构。而在对照组的上述结构中没有表达,只在耳蜗背核有较明显的表达。通过上述研究我们发现围绕脊髓中央管和各脑室的周围灰质系统与内脏伤害性刺激有关。这引起了我们极大的兴趣。关于这部分的工作我们正在进行中。     

脑桥呼吸调整中枢向延髓Botzinger复合体轴突投射的研究

实验在３３只成年猫上进行。Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体内微量注入麦角辣根过氧化酶（ＷＧＡ－ＨＲＰ,３０－６０ｎｌ,５％,９例）后,在脑桥呼吸调整中枢结合臂外侧核及Ｋｏｌｌｉｋｅｒ－Ｆｕｓｅ核观察到大量ＨＲＰ标记神经元。在２０例动物中,检测了９１个在呼吸调整中枢记录到的呼吸神经元对电刺激Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体的反应。其中１３个神经元（吸气性１１个,跨时相２个）可被逆行兴奋。实验结果表明,发自脑桥呼吸调整中枢神经元的轴突可投射到Ｂｏｔｚｉｎｇｅｒ复合体,这一投射通路可能与呼吸调节有关。     

外周伤害性刺激诱导大鼠脑干内延髓网状背侧亚核传入投射神经元的c-fos表达

用荧光金逆行追踪和 FOS荧光免疫组织化学染色相结合的方法对外周伤害性刺激下大鼠脑干内向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中 c- fos的表达进行了研究。在麻醉状况下将 0 .15 μl2 %荧光金注入大鼠单侧延髓网状背侧亚核 ,存活5 d后用 1%福尔马林刺激同侧前爪、后爪和口周 ,2 h后灌注取材 ,再行 FOS免疫荧光标记。结果发现在脑的中脑导水管周围灰质、中缝背核、线形核和中缝大核内观察到荧光金标记细胞、FOS样免疫阳性反应细胞及荧光金 / FOS双标细胞。在这四个核团中 ,双标细胞数分别占荧光金逆标神经元数的 2 5 % (中脑导水管周围灰质 )、 11.7% (中缝背核 )、 8.9% (线形核 )和 12 .1% (中缝大核 )。结果提示在脑干向延髓网状背侧亚核投射的神经元中 ,有一部分与外周伤害性刺激信息的调控有关 ,还有的神经元可能具有其它的功能。     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性原位触液神经元的观察

通过研究大鼠中缝背核内远位触液神经元与一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的关系。以探讨一氧化氮（NO）是否是触液神经元在脑-脑脊液之间的信息传递有关,选用霍乱毒素亚单位B标记的辣根过氧化物酶（CB-HRP）逆行追踪与还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（NADPH）黄递酶反应,CB-HRP标记的神经元密集分布于中缝背核,可见CB-HRP/NADPH-d双重标记的神经元,中缝背核内一部分远位触液神经元存在NOS,这些神经元在脑-脑脊液之间的信息传递中起着很重要的作用。     

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c-fos的表达及人重组白细胞介素-1β的影响

采用免疫组化方法,观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元ｃ－ｆｏｓ的表达及人重组白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）的影响。结果显示,缺氧后海马神经元中Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率随缺氧时间的延长而显著增加。图像分析的结果显示,缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度亦随缺氧时间的延长而显著增加。经ｒｈＩＬ－１β孵育的神经元缺氧后Ｆｏｓ染色阳性胞核的百分率和Ｆｏｓ染色阳性胞核的平均光密度均明显低于对照组。本结果表明,缺氧能诱导体外培养海马神经元ｃ－ｆｏｓ表达,ｒｈＩＬ－１β能抑制缺氧神经元ｃ－ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ－１β对海马神经元缺氧损伤具有一定调控作用。     

胃伤害性刺激诱导大鼠脑干星形胶质细胞GFAP蛋白表达及其与神经元的关系

研究大鼠在福尔马林诱发胃伤害性刺激时脑干内星形胶质细胞及神经元的变化。应用免疫组织化学三重标记法在脑原位切片同时显示脑干内Fos蛋白,胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）,酪氨酸羟化酶（TH）的表达,结果显示：1、在福尔马林诱发胃伤害性刺激后,脑干胶质细胞GFAP表达阳性,并表现出明显的核团或亚核定位特点,在延髓内脏带（MVZ0,中缝大核（RMg),蓝斑（LC）,臂旁外侧核（LPB）,中缝背核（DR）,中脑导水管周围灰质腹外侧区（vlPAG),上丘中灰层（IngSC)等脑区有较多的Fos阳性细胞,而且Fos阳性表达的分布与上述GFAP阳性分布基本一致;2、MVZ,LC,DR,vlPAG等部位有大量Fos及TH双标阳性神经元,周围有密集的GFAP阳性细胞;3、随着刺激后存活时间的变化,GFAP与Fos阳性细胞的反应均经历逐渐升高后又渐降低直至消失的变化。结果表明：上述核团的神经元和星形胶质细胞可能同时参与了内脏痛及其调节过程。     

大鼠三叉神经脊束间质核接受内脏和躯体伤害性信息的calbindin D-28k神经元向臂旁核的投射

应用荧光金（FG）逆行束路追踪结合Fos和calbindin D-28k(CB)免疫荧光组织化学三重标记法,观察了大鼠三叉神经脊束间质核（INV）接受口面部皮肤和上消化道伤害性信息的CB神经元向臂旁核（PB）的投射。结果显示,口周刺激组FG逆标细胞和Fos免疫反应阳性细胞主要分布于注射和刺激同侧INV的背侧边缘旁核（PaMd）和三叉旁核（PaV）;大量的CB免疫阳性细胞分布于双侧INV。同侧INV内FG逆标细胞中有77.3%呈CB免疫反应阳性,40.7%呈Fos免疫反应阳性。在FG和CB双标记的神经元中,又有一部分（约38.5%）为FG／CB／Fos三标细胞。上消化道刺激组的FG逆标细胞、CB免疫阳性细胞和FG／CB双标细胞的数量和分布与口周刺激组相似,但Fos免疫阳性细胞分布于双侧的INV。在同侧INV,FG／Fos双标细胞占FG逆标细胞总数的41.9%,FG／CB／Fos三标细胞占FG／CB双标细胞的52.0%。以上结果提示,INV直接投射到PB的CB神经元接受口面部皮肤和上消化道的伤害性信息,CB神经元可能参与经INV中继的外周伤害性信息向PB的传递。     

电刺激大鼠尾核头部镇痛的中枢效应—[^3H]—2脱氧...

Sokoloff's 2-deoxyglucose (2-DG) autoradiographic technique was used to identify changes of glucose metabolic rate in the rat brain following unilateral stimulation of the head of the caudate nucleus. The results were as follows. The local glucose metabolic rate after noxious stimulation was increased in the somatosensory cortex, cingulate cortex, ventroposterior and parafascicular nucleus of the thalamus, septal area, habenular nucleus, head of caudate nucleus, periaqueductal gray (PAG) and dorsal raphe nucleus (P < 0.05). After stimulating the head of the caudate nucleus, the local glucose metabolic rate of nucleus raphe magnus (rm) and nucleus paragigantocellularis (pgcl) was increased significantly and that of the PAG and dorsal raphe nucleus had a tendency to increase, while stimulation of the head of caudate nucleus could partially abolish the increased glucose metabolic rate in the somatosensory cortex, cingulate cortex, ventroposterior and parafascicular nucleus of the thalamus, septal area and habenular nucleus as induced by noxious stimulation. These results suggest that caudate stimulation is able to depress the activation of some brain structures related to nociception and to activate those related to antinociception. The pgcl, rm, PAG and dorsal raphe nucleus might be the key structures participating in the caudate stimulation produced analgesia.     

Bee venom acupoint stimulation increases Fos expression in catecholaminergic neurons in the rat brain

Fos immunocytochemistry was combined with tyrosine hydroxylase (TH) or dopamine-beta-hydroxylase (DBH) immunolabeling to examine brainstem catecholaminergic neuronal activation resulting from bee venom (BV) stimulation of the Zusanli acupoint (ST36) in Sprague-Dawley rats. BV injection into the Zusanli acupoint caused increased Fos expression in catecholaminergic neurons located in the hypothalamic arcuate nucleus (Arc), the dorsal raphe (DR), the A5 cell group (A5) and the locus coeruleus (LC). BV acupoint stimulation significantly increased Fos-TH double-labeled neurons in the Arc, LC and DR. Fos-DBH positive neurons were also increased by BV acupoint stimulation in the LC and A5. In contrast BV stimulation of a non-acupoint only increased Fos expression and Fos-TH double-labeled neurons in the Arc. These data indicate that BV acupoint stimulation activates brainstem catecholaminergic neurons and that this activation underlies BV acupoint-induced antinociception.     

刺激中缝背核对大鼠脊髓背角神经元伤害性反应的影响及其传出途径的分析

大量资料表明,中缝背核(DR)在痛觉调节中具有重要作用。本实验用电生理学方法研究DR在痛觉调制中的下行性抑制作用,主要观察刺激DR对清醒制动大鼠脊髓背角神经元伤害性放电的影响。其主要结果是:①刺激DR或电针可以抑制脊髓背角神经元的伤害性反应,吗啡可加强这种抑制效应;②损毁中缝大核(NRM)、纳洛酮、麦角酰二乙胺(LSD)、赛庚啶及对氯苯丙氨酸(PCPA)均能部分阻断DR对脊髓背角神经元伤害性反应的抑制,实验结果表明:刺激DR抑制脊髓背角神经元的伤害性反应,部分是通过NRM间接控制背角神经元的伤害性传入;还有一部分是不通过NRM,可能是DR直接对脊髓背角伤害性信息的调制。在这种下行性抑制通路中有5-HT和阿片样物质的参与。     

大白鼠脚内核的传入性联系

众所周知,肉食动物和大白鼠的脚内核,相当于灵长类的内侧苍白球(Nagy et al.1978;Fox and Schmitz 1944);它们的细胞形态、传入及传出均相同。早期以及近年来的一些研究工作者,虽然在研究其他核团的投射时,联系到一些本核团的传入,但是尚缺乏对本核团传人的系统研究。本实验即是应用辣根过氧化物酶的逆行传递法来研究大白鼠脚内核的传入性联系。     

电刺激大鼠尾核头部镇痛的中枢效应——〔~3H〕-2脱氧葡萄糖放射自显影研究

本文利用[~3H]-2脱氧葡萄糖定量放射自显影方法,研究了电刺激大鼠尾核头部镇痛时中枢神经系统有关结构的葡萄糖代谢率变化。结果表明,痛刺激后,皮层躯体感觉Ⅰ,Ⅱ区、扣带回皮质、丘脑束旁核、丘脑中央中核、丘脑腹后核、尾核、外侧缰核、外侧隔核、中缝背核及中脑导水管周围灰质等结等的葡萄糖代谢率均明显升高(P<0.05)。电刺激大鼠尾核头部后,中缝大核及延髓旁巨细胞网状外侧核的葡萄糖代谢率显著升高,中脑导水管周围灰质和中缝背核的葡萄糖代谢率亦有升高趋势。电刺激大鼠尾核头部可部份降低痛刺激引起的有关结构葡萄糖代谢率升高(如皮层躯体感觉Ⅰ、Ⅱ区、扣带回皮质、丘脑束旁核、丘脑中央中核、丘脑腹后核、外侧隔核及外侧缰核等)。上述结果提示,电刺激大鼠尾核头部镇痛时抑制了与痛感觉有关的结构,同时激活了与镇痛有关的结构。中缝大核、中缝背核、中脑导水管周围灰质及延髓旁巨细胞网状外侧核等结构是实现尾核镇痛的重要环节。     

中缝背核参与下丘脑弓状核对蓝斑伤害性反应的抑制

实验在56只水合氯醛麻醉的成年雄性大鼠上进行。实验结果表明:电刺激中缝背核(DR)能减慢蓝斑(LC)大多数神经元自发放电频率;而损毁DR则增加大多数LC神经元的自发放电频率。电刺激下丘脑弓状核(ARC)能抑制LC神经元对外周坐骨神经伤害性刺激的反应。刺激DR可增强此种抑制作用;相反,损毁DR能部分减弱此种抑制效应。结果提示,DR对LC神经元有紧张性抑制作用,并对刺激ARC抑制LC神经元伤害性反应起着调制作用。