癌基因Src在骨肉瘤细胞侵袭伪足形成中的作用

目的:探讨癌基因Src在体外培养骨肉瘤细胞侵袭伪足形成中的作用。方法:构建Src sh RNA慢病毒表达载体,在HEK293T细胞中包装慢病毒,感染HT-1080骨肉瘤细胞,经嘌呤霉素加压筛选,获得稳定沉默Src基因的骨肉瘤细胞系HT-1080-sh Src;实时定量PCR和Western Blot法检测基因沉默效率;采用原位明胶酶谱法检测侵袭伪足形成;采用侵袭小室实验检测下调Src基因表达对HT-1080细胞侵袭力的影响。结果:成功构建稳定沉默Src基因的骨肉瘤细胞系HT-1080-sh Src及对照细胞系HT-1080-shluc,经实时定量PCR和Western Blot检测,与对照细胞系相比,HT-1080-sh Src细胞中Src基因表达下调3倍以上;下调HT-1080细胞中Src基因表达能显著抑制HT-1080细胞侵袭伪足形成及其对细胞外基质的降解能力;下调Src基因表达能显著抑制骨肉瘤细胞侵袭力。结论:癌基因Src参与调节骨肉瘤细胞HT-1080侵袭伪足形成,促进肿瘤侵袭、转移。     

植物基因转移方法

基因工程的诞生和发展是与基因转移方法的出现和发展分不开的。为了实现不同的目标，就需要各种各样的基因转移方法。一般来说，向植物中转移基因，存在的困难要比微生物和动物多些；但由于植物基因工程对作物改良的重要性，近年来获得了迅速发展，各种基因转移方法层出不穷。本文系统地介绍了现有的植物基因转移方法。     

蛋白质截短检测在基因突变在检测中的应用

蛋白质截短检测（ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒｕｎｃａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ，ＰＴＴ）是从蛋白质水平对基因突变进行检测的方法。由于ＰＴＴ具有与以往广泛使用的方法不同的独特优点，自１９９３年发明以来，先后在ＡＰＣ、ＤＭＤ、ＢＲＣＡ１、错配修复基因（ｍｉｓｍａｔｃｈ ｒｅｐａｉｒ ｇｅｎｅ）突变检测中得以应用。     

血液高粘滞综合征治疗进展

血液中存在一系列的粘滞因素,即血液粘度,血细胞压积,红细胞聚集,红细胞脆性,以及血小板聚集等,这些因素的升高,可导致血液的高粘滞状态,1981年 Dintenfass 将这种状态称之为血液高粘滞综合征(Blood High ViscositySyndrome,BHVS)也称之为高粘滞血症(Hyperviscosacmia).BHVS 可致微循环血流不畅,根据林氏等研究发现,微循环血流不畅是疾病特别是心脑血栓性疾病的起因,是引起机体癌症的早期原因.因此,欲减少或避免上述疾病的发生,就应有效的预防微循环血流不畅.一旦出现微循环血流不畅应及时治疗,以保证组织细胞不缺血,不缺氧,不缺营养物质,使新陈代谢     

人睫状神经营养因子的原核表达,纯化及其生物效应

人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。在高浓度变性剂条件下进行ｓｅｐｈａｒｃｙｌＳ－２００凝胶过滤，解决了纯化中ｈＣＮＴＦ易聚合的问题，在低浓度变性剂条件下进行ＤＥＡＥ离子交换，有利于蛋白活性的保持。经两步纯化后得到均一性ｈＣＮＴＦ，纯度达９５％以上。在自然状态下使ｈＣＮＴＦ复性。纯化复性后的ｈＣＮＴＦ对无血清培养的鸡胚背根节神经元和脊髓腹角运动神经元有明显的维持存活和促进生长发育的生物效应。