| 人睫状神经营养因子的原核表达,纯化及其生物效应 |
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| 引用本文： | 咸海青,范明.人睫状神经营养因子的原核表达,纯化及其生物效应[J].中国应用生理学杂志,1996,12(1):21-24. |
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| 作者姓名： | 咸海青 范明 |
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| 作者单位： | 北京军事医学科学院基础医学研究所 |
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| 摘 要： | 人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。在高浓度变性剂条件下进行ｓｅｐｈａｒｃｙｌＳ－２００凝胶过滤，解决了纯化中ｈＣＮＴＦ易聚合的问题，在低浓度变性剂条件下进行ＤＥＡＥ离子交换，有利于蛋白活性的保持。经两步纯化后得到均一性ｈＣＮＴＦ，纯度达９５％以上。在自然状态下使ｈＣＮＴＦ复性。纯化复性后的ｈＣＮＴＦ对无血清培养的鸡胚背根节神经元和脊髓腹角运动神经元有明显的维持存活和促进生长发育的生物效应。
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| 关 键 词： | 人睫状神经营养因子，原核表达，蛋白质纯化，背根节神经元，脊髓运动神经元 |
EXPRESSION,PURIFICATION AND BIOLOGICAL EFFECT OF RECOMBINANT HUMAN CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR |
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| Xian Haiqing,Fan Ming,Gan Side,Liu Shuhong,Ding Aishi.EXPRESSION,PURIFICATION AND BIOLOGICAL EFFECT OF RECOMBINANT HUMAN CILIARY NEUROTROPHIC FACTOR[J].Chinese Journal of Applied Physiology,1996,12(1):21-24. |
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| Authors: | Xian Haiqing Fan Ming Gan Side Liu Shuhong Ding Aishi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human ciliary neurotrophic factor prokaryote expression protein purification DRGneurons spinal motor neurons |
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