几种药物抑制马传染性贫血病毒和人免疫缺陷病毒的实验研究

用马传染性贫血病毒—驴胚肺二倍体细胞(EIAV-DELDC)为实验体系,以细胞中病毒逆转录酶活性及病毒相关抗原的表达为观察指标,检测了叠氮胸苷(AZT)、三氮唑核苷(Ribavirin,病毒唑)、磷羧基甲酸钠(PFA)和苏拉明等4种已知抗人免疫缺陷病毒(HIV-1)药物对马传染性贫血病毒的抑制作用。结果表明,PFA、AZTTP(三磷酸AZT)和苏拉明均能抑制病毒相关抗原的表达,AZT虽无此作用,但能抑制细胞内逆转录酶活性。用~3H-TMP掺入法比较了PFA、AZTTP、苏拉明对体外无细胞系EIAV逆转录酶粗提物和HIV-1基因工程产物逆转录酶活性的抑制作用表明,两种逆转录酶对苏拉明的敏感性相近,而HIV-1逆转录酶对PFA和AZTTP的敏感性较EIAV者高约100倍。又以无细胞系中逆转录酶活性测定法,检测了12种中药提取物的抑制作用,其中小柴胡汤对EIAV和HIV-1逆转录酶活性都有抑制作用,IC_(50)为717μg/ml和700μg/ml(生药浓度)。小柴胡汤对两种病毒感染细胞中抗原的表达和HIV引起细胞病变都有抑制作用,对HIV-1的抑制比EIAV强。这些结果表明,EIAV-DELDC体系可考虑作为抗HIV-1药物筛选模型。     

离子注入不同辐射敏感性微生物自由基与存活关系的研究

以不同辐射敏感性微生物辐射异常微球菌和大肠杆菌为试材,用电子自旋共振波谱法研究了离子注入后在两种微生物细胞内产生的自由基及其存活的关系。     

二乙基二硫代氨基甲酸钠对二氧化硫衍生物引起的心肌细胞钠电流增大的增强效应

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是生物体内专一的过氧自由基(superoxide anions,O2.-)清除剂,而二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate,DDC)则是公认的Cu,Zn-SOD的抑制剂。采用全膜片钳技术研究了DDC对二氧化硫(sulfur dioxide,SO2)衍生物引起的大鼠心肌细胞钠电流增大效应的作用,以期更进一步揭示SO2的毒性机理。结果表明:SO2衍生物对SOD活性无显著影响,SO2衍生物存在时,DDC仍可以显著降低SOD的活性。DDC(10￣100 mmol/L)剂量依赖性地增大钠电流(INa),半数效应浓度为(19.85±0.95)mmol/L。将20 mmol/L的DDC与10μmol/L的SO2衍生物同时作用于心肌细胞,INa仍表现为电压依赖性的增大,并使INa的电压依赖性激活曲线显著地向负电压方向移动,稳态失活曲线向正电压方向移动,差异极其显著。这表明DDC增强了SO2衍生物对心肌细胞钠电流的增大效应,提示SO2衍生物引起的大鼠心肌细胞毒性主要是通过自由基,特别是O2.-氧化损伤实现的。     

抗严重急性呼吸综合征病毒药物的研究进展

引起严重急性呼吸综合征的病毒是一种新型冠状病毒,对其特性仍知之甚少,故治疗上缺乏特效药物。本文综述了临床已经试用的抗病毒药物犀正在研制开发的抗该病毒药物的研究进展。     

鸡冠花幼苗热胁迫耐性与其SOD之间的关联

为探讨鸡冠花热胁迫耐性与其SOD之间的关联,选用耐热品种Variety-Centrury Green 10叶期幼苗为试材,用二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)进行48 h预处理,之后在45℃人工培养箱中进行热胁迫处理,观察其外观形态.结果表明,20 mmol/L DDTC预处理显著抑制叶片SOD活性,明显减弱鸡冠花的热胁迫耐性,表现为幼苗热胁迫耐受时间显著缩短,弯颈、死亡率明显提高.在自然状态下,叶片中有1种MnSOD、1种Cu/ZnSOD和3种FeSOD;迁移率大小依次为Cu/ZnSODFeSODMnSOD;谱带强弱依次为FesOD>Cu/znSOD>MnSOD.经热胁迫处理后,各种SOD同工酶条带亮度均呈现不同程度的增强—减弱的变化趋势,并诱导产生了1条新的Cu/Zn-SOD条带,与此同时MnSOD条带最先消失.由此推测,鸡冠花品种间耐热性差异与其SOD活性相关,与胁迫强度相对应,同时也与Cu/ZnSOD2的诱导产生相关联. 表现为幼苗热胁迫耐受时间显著缩短,弯颈、死亡率明显提高.在自然状态下,叶片中有1种MnSOD、1种Cu/ZnSOD和3种FeSOD;迁移率大小依次为Cu/ZnSODFeSODMnSO ;谱带强弱依次为FesOD>Cu/znSOD>MnSOD.经热胁迫处理后,各种SOD同工酶条带亮度均呈现不同程度的增强一减弱的变化趋势,并诱导产生了1条新的Cu/Zn-SOD条带,与此同时MnSOD条带最先消失.由此推测,鸡冠花品种间耐热性差异与其SOD活性相关,与胁迫强度相对应,同时也与Cu/ZnSOD2的诱导产生     

乙酸乙酯抽提法在ESR检测一氧化氮自由基中的应用

改进了用有机溶剂抽提检测一氧化氮(nitric oxide,NO)自由基的方法,并利用有机溶剂抽提法检测了小鼠心肌中NO的含量.有机溶剂可以把二乙基二硫代氨基甲酸钠(diethyldithiocarbamate, DETC)捕集NO的产物(DETC)₂-Fe²⁺-NO由水相中萃取并富集到酯相中,然后利用电子顺磁共振波谱仪(ESR)在常温下检测大体积样品中的NO.比较了几种不同的有机溶剂：正丁醇、乙酸丁酯、乙酸乙酯、三乙酸甘油酯、乙酸异戊酯等的萃取能力,发现乙酸乙酯是一种理想的提取溶剂.乙酸乙酯提取法可以使NO的量与ESR信号强度在20 μmol/L内有良好的线性,使ESR的检测灵敏度提高到200 nmol/L以下;(DETC)₂-Fe²⁺-NO对光比较敏感,见光易于分解;复合物在乙酸乙酯中避光保存于4℃可稳定十几天而无显著的变化.     

拉米夫定联合磷甲酸钠治疗慢性乙肝失代偿期肝硬化的疗效观察

目的 研究拉米夫定联合磷甲酸钠治疗慢性乙肝失乙肝失代偿期肝硬化的疗效。方法 选择慢性乙肝失代偿期肝硬化患者59例,随机分为拉米夫定组（13例）、磷甲酸钠组（15例）、联合组（16例）和对照组（15例）,拉米夫定组予拉米夫定治疗,磷甲酸钠组予磷甲酸钠治疗,联合组联合应用拉米夫定和磷甲酸钠治疗,通过对Child-Pugh积分及HBV DNA转阴率进行监测。结果 联合组治疗4周后Child-Pugh积分均值及HBVDNA转阴率较拉米夫定组P值分别为0．000和0．029,与磷甲酸钠组相比较P值分别为0．834和0．578;联合组治疗24周后与拉米夫定组Child-Pugh积分均值及HBVDNA转阴率相比较P值分别为0．006和0．353,与磷甲酸钠组比较P值分别为0．000和0．001。结论 应用拉米夫定联合磷甲酸钠治疗慢性乙肝失代偿期肝硬化的疗效较好,有协同作用、副作用小。     

微量直接法检测鸭乙型肝炎病毒DNA多聚酶

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA多聚酶(DNAP)是研究DHBV感染规律和观察药效的敏感指标,但常规方法测定DNAP需用较多量血清并超速离心,不适用于大批标本的检测。本文参照Sprengel介绍的掺入液条件,用微量血清(70～100μl)直接检测鸭血清中的DHBV-DNAP,比常规超速离心法和DHBV-DNA斑点杂交法简便。同时,观察了膦羧基甲酸钠(PFNa_3)对DNAP的抑制作用,以探讨方法的特异性和可行性。     

几种外源因子对大豆幼苗SOD活性的影响

高氧能促使大豆幼苗细胞内产生O_2~+速率增加,同时又使幼苗内SOD活性水平提高,以减轻O_2~+增加所引起的细胞伤害。高氧诱发O_2~+同时发生在叶绿体、线粒体和细胞溶质中,与细胞呼吸水平无明显相关。棓酸丙酯有清除体内O_2~+的能力,当浓度在1μmol/L时,能减轻大豆幼苗的氧伤害。相反,DDC是SOD的有效抑制剂,当它的浓度大于5 mmol/L时,显著抑制大豆幼苗SOD活性,增加了体内O_2~+的积累,影响了幼苗的正常生长以及幼苗氧伤害的加剧。