铜绿假单胞菌XQ17提取物对革兰阳性菌的拮抗作用

从临床分离的1株铜绿假单胞菌能够产生拮抗物质,对其粗提物的初步研究表明,能有效杀灭受试的多数革兰阳性菌。通过比较其基本特征,与已知的铜绿假单胞菌产生的其他抗菌物质如Pyocyanin、Phenazine-1-carboxamide、Pseudomonic acid、pyocin等有明显区别,提示可能是一种具有潜在应用价值的新抗菌物质。     

宏基因组学技术在酶开发方面的应用

宏基因组技术是近些年发展起来的生物新技术。其针对环境样本中的全部微生物基因组DNA开展研究,可以覆盖过去无法研究的不可培养微生物,极大地拓宽了研究的广度,因而,一经提出就得到广泛应用,并取得丰富成果。本文主要针对宏基因组技术在酶开发方面的有关应用进行综述。     

宏基因组学:基本策略及在医学研究领域中的可能应用

宏基因组学（metagenomics）的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研究的方法。该文介绍宏基因组学的基本情况,并着重探讨其在医学研究领域中的可能应用。     

伤寒沙门菌bcfD基因敲除突变株的构建

目的:构建伤寒沙门菌Ty2菌株菌毛亚单位bcfD基因敲除突变株.方法:利用交错PCR得到bcfD基因缺失且含其两侧翼序列的片段,将该片段与pMD 18-T连接,亚克隆到pYG4,电转入大肠埃希菌S17-1/λpir菌株,阳性菌株与受体菌伤寒沙门氏菌Ty2进行固相杂交后筛选.结果:成功获得敲除bcfD基因序列954bp的敲除突变株.结论:交错PCR有利于细菌基因精确敲除突变株的构建,bcfD基因敲除株的构建将为进一步研究该基因在伤寒沙门菌中的功能奠定了基础.     

实验观察小鼠肠道菌群潜-生序形成的混沌过程

正常菌群转变为机会致病菌已经成为众人关注的难题,潜生体的研究有助于认识机会致病菌的形成,确定的非周期性揭示了常规方法研究的困难所在。微生物学是从对致病微生物的研究开始的,约１００年前Ｋｏｃｈ将微生物分成致病微生物和正常微生物群。近一个世纪的时间,人们重点研究致病微生物,曾采用了抗体、免疫疫苗、抗菌素等一系列措施,使致病菌在现代医学中已降到一个次要的地位。随之而来的是正常菌群转变为条件致病菌,成为现代医疗实践中的难题之一,而且医生和技术人员在此难题面前,束手无策。人们经过多方努力,针对正常菌群和条…     

绿脓杆菌定值、定位、定性检测技术研究*

为建立组织内细菌的定植、定位及定性检测方法,实验专用对绿脓杆菌定性、定量培养的DPA培养基,解决了同时定性、定量培养的难题,实验结果表明,同一标本有多个同种细菌生长可判定细菌定植。方法简单、可靠、重复性好。     

结核分枝杆菌38kDa-U1融合抗原的表达、纯化及其抗原活性测定

由于结核病人抗体反应存在异质性,把单一抗原用于血清学诊断存在阳性率较低的缺陷。为获得适于结核病临床诊断用抗原,本研究将结核分枝杆菌38 ku抗原和尿蛋白(urine protein 1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。用基因拼接法将结核分枝杆菌编码38 ku抗原和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到pMD18-T上,进一步构建重组质料pET28a-38kDa-U1,并转化E.coliBL21,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物。用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核病人血清对纯化产物的抗原活性进行测定。结果成功构…     

体内诱生抗原鉴定技术

体外不表达而只在体内才表达的基因称为体内诱导基因。研究表明,体内诱导基因涉及病原菌在体内的生存和致病过程,因此有重要意义。最近提出的体内诱生抗原鉴定技术(invivo-inducedantigentechnology,IVIAT)就是用于筛选病原菌体内诱导基因的一种方法。该方法不使用动物模型,而是采用经病原菌体外表达抗原吸收处理的病人血清来检测病原菌的表达文库,从而筛选体内诱导基因;方法简便、快速。这些筛选得到的体内诱导基因有助于病原菌致病机制的研究,同时也能够为抗菌药物、诊断试剂及疫苗设计等研究提供潜在靶标。     

利用转座子建立细菌单基因突变株库的策略和方法

构建细菌突变株是认识细菌基因功能的一个重要途径。如果针对某个细菌建立一个包括所有基因的单基因突变株库,对于该细菌基因功能的认识无疑具有巨大的推动作用。本文综述了利用转座子建立细菌突变株库的工作,并侧重于其构建策略和方法。     

伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达蛋白抗原的筛选

在感染过程中,病原体会表达一系列基因产物以适应体内环境.因此,病原体只在宿主体内表达或高表达的基因可能与致病机制密切相关.本研究用体内诱导抗原技术（in vivo induced antigen technology,IVIAT）来筛选伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达的抗原,共筛选到7个体内诱导（in vivo induced,IVI）抗原,分别是BcfD（菌毛结构亚单位）、GrxC（谷氧还蛋白3）、SapB（ABC转运系统）、T3663（ABC未知转运系统）、T3816（可能的有关硫氰酸酶的硫转移酶）、T1497（可能的TonB依赖受体）和T3689（功能未知）,其中BcfD,GrxC,SapB,T3663和T3689这5个抗原与吸附处理后的健康志愿者的血清无交叉免疫反应.这些筛选到的体内诱导抗原是新药和疫苗开发的潜在靶标,同时也有利于新诊断方法的研究.