番茄、芦苇、水杉、皂荚粗提液与辛硫磷、氯氰菊酯混用对赤拟谷盗杀灭作用的初步试验

赤拟谷盗是一种重要的世界性储粮害虫,防治困难.本文采用浸渍法测定了番茄茎叶、芦苇全株、水杉叶、皂荚果实等4种植物材料水提液与两种杀虫剂混用对赤拟谷盗的毒力效应.结果 表明,各提取液与40%辛硫磷乳油1000倍液、5%氯氰菊酯乳油500倍液以不同比例混配时,均表现出不同程度的增效作用.药液与植物提取液以4:1、1:1体积...     

费氏链霉菌HTP6分批发酵动力学

对费氏链霉菌HTP6产新霉素的分批发酵动力学进行了研究, 并建立了动力学模型。对数生长期最大比生长速率μm为0.0866 h-1, 产物合成期最大合成速率qp为1.1867×10-4 g/(mL×h)。对实验数据与模型模拟值进行拟合检验, 表现出很好的适用性, 实验平均相对偏差小于5%。表明该动力学模型对费氏链霉菌产新霉素的发酵生产具有实际意义。     

瑞香狼毒提取物对试验动物急性毒性及活性的初步研究

采用急性经口、眼刺激、皮肤试验方法,研究了瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物的急性毒性作用,同时以番茄晚疫病菌为供试菌,研究了瑞香狼毒提取物的抑菌活性.初步研究表明,瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物对小白鼠经口急性毒性为低毒,对白兔的急性皮肤刺激属无刺激性,对白兔的眼刺激属轻度刺激性,对鲫鱼的毒性属于中毒级;瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物及其分段物流分B、c、D对番茄晚疫病菌有较好的抑制活性,这为瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物进一步开发为产品提供了毒理学依据.     

费氏链霉菌中子辐射诱变菌株对新霉素的生物转化

对新霉素产生菌费氏链霉菌进行中子辐射诱变和突变株筛选, 获得不产新霉素的突变株。以突变株为转化菌种, 以新霉素为底物, 对转化发酵液进行高效液相色谱分析, 研究了不同转化条件对新霉素转化的影响。结果表明, 底物浓度、底物添加时间、底物添加方式、接种量、培养基装量、转化时间、碳源、氮源、pH、温度对新霉素转化具有不同程度的影响。以转化条件优化参数进行转化大量培养, 转化液经4步离子交换层析进行分离纯化, 薄层层析检测纯化样品为单一斑点。采用薄层生物自显影对获得的4个转化产物分离样品做生物活性检测, 发现4个样品对金黄色葡萄球菌和姜青枯假单孢杆菌都具有抑制活性, 1个样品对大白菜软腐样品具有明显的抑制活性。     

长沙某医院产质粒AmpC酶型肺炎克雷伯菌的多重PCR检测与分析

为了了解湖南长沙某医院临床分离的肺炎克雷伯菌中质粒介导AmpC β-内酰胺酶的产生情况及其基因型,收集了该医院2008年3月至2010年10月临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌104株,用头孢西丁纸片扩散法对这些菌株进行表型初筛,用多重PCR确定ampC耐药基因型;结果发现其中有19株对头孢西丁纸片不敏感,疑为产AmpC酶菌株;再经多重PCR扩增,有12株菌分别在约400 bp（11株）和约350 bp（1株）出现了阳性条带,特异性PCR证明此12株菌分别携带了DHA型（11株）和ACC型（1株）ampC耐药基因;产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌的分离率为11.5%（12/104）。该医院产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌的分离率较高,应对其检测与监测给予足够重视,以指导临床合理选用抗菌药物。     

天然产物对家蚕乙酰胆碱酯酶抑制作用研究

用Sephadex G-25、DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephadex G-200方法分离纯化家蚕头部中的乙酰胆碱酯酶(AChE),以有机磷化学农药为阳性对照,比较分析几种天然产物对AChE纯酶液与粗酶液的抑制效果.结果 表明,经过一系列步骤的纯化,最后所得AChE是纯度较高的酶液,并且纯化后的AChE对抑制作用更敏感.同时实验选取的大部分天然产物提取物对纯化后的AChE都有一定的抑制作用,其中绣线菊乙醇提取物对纯酶的IC50达到了0.091×10-3 g·mL-1.     

一株Sanguibacter sp.C4产几丁质酶基因的克隆与表达

Chi58是Sanguibacter sp．strain C4产生的一种胞外几丁质酶。通过chiA的特异性PCR引物探测到菌株C4中存在几丁质酶,并将扩增到的几丁质酶基因片段（chiA-F）克隆、测序后,提交GenBank数据库进行同源性搜索。对从GenBank中获得的高同源性序列进行比对,并根据保守区域设计2对PCR引物进行嵌套PCR,扩增出Chi58基因的开放阅读框（ORF）。测序结果表明该酶的ORF由1692个核苷酸组成,编码563个氨基酸,在N端有23个氨基酸的信号肽,其成熟蛋白的分子量应为58．544kDa。对其推导氨基酸的序列分析表明Chi58与沙雷氏菌的几丁质酶（如徂）有高度同源性（88．9％-99．6％）,其结构主要包括信号肽序列、PKD结构域和18家族糖苷水解酶结构域。将该基因克隆到pET32a（＋）载体构建重组质粒pChi58,转入大肠杆菌BL-21（DE3）进行融合表达。经IPTG诱导后,可见分子量约81．1kDa的融合蛋白的表达。     

直接注射法制作ICR小鼠肝癌原位移植瘤模型

目的：培养鼠肝癌H22细胞,直接注射法制作ICR小鼠肝癌原位移植瘤,为后续实验奠定基础。方法：鼠肝癌H22细胞体外培养,将调整好的对数生长期的肝癌细胞直接注射小鼠肝脏,2周后解剖观察,并进行组织HE染色。结果：所有实验小鼠均可见肿瘤生长,HE染色示肝细胞肝癌。结论：直接注射法制作ICR小鼠肝癌原位移植瘤模型简便易行,值得推广应用。     

均匀设计法对产几丁质酶细菌C4发酵条件的优化

系统研究了碳源,氮源,起始pH值、培养基装量、培养温度和时间等因素对细菌C4产几丁质酶的影响。结果表明,碳、氮源分别以胶体几丁质、KNO和蛋白胨最好;在起始pH值7．6—8．5,培养基装量为三角瓶体积的12％,培养温度28℃,振荡培养(180r／min)5d时最有利于几丁质酶的产生。在此基础上通过均匀设计法优化了发酵培养基配方。优化后的培养基配方为：胶体几丁质1．5％,蛋白胨0．55％,KNO3 0．3％,MgSO4 0．09％,Tween80 0．005％。在该条件下,几丁质酶活力达2．68U／mL,比在原基础培养条件下的酶活力提高90．1％。