副溶血性弧菌免疫逃逸及其可能机制的研究进展

副溶血性弧菌是全球范围内威胁人体健康和食品安全的食源性致病菌。在感染人体的过程中,副溶血性弧菌通过将其效应蛋白直接注射至宿主细胞中操纵宿主,介导毒力的发挥,并进化出了一套完美的免疫逃逸策略,成功躲避免疫系统的攻击,引起急性肠胃炎、败血症和坏死性筋膜炎等疾病。副溶血性弧菌入侵上皮细胞,使胞内囊泡酸化,在与溶酶体融合之前逃逸到细胞质中,并且限制活性氧的产生,促进其在胞内生存。副溶血性弧菌可以诱导自噬,抑制NLRC4炎症小体介导的caspase-1的激活,还可以通过抑制TAK1激酶,阻止MAPK和NF-κB信号通路的激活,干扰免疫系统激活,借助多种手段共同协作从而达到免疫逃逸。本文系统总结了副溶血性弧菌现已研究的免疫逃逸机制,并对其可能存在的免疫逃逸机制提供了新的见解和方向,对深入了解副溶血性弧菌的致病机理和防控药物靶向位点的选择及研发具有重要意义。     

纸坊病病毒病因的研究

1985年4～10月与1986年6～8月,在贵州省沿河县的纸坊村和崔家坨村先后发生了病因不明的传染病。纸坊村约有1/5的村民发病,病死率为12％,崔家坨村有1/10的村民发病,病死率高达30％。发病波及各年龄组,以青壮年为多,有家庭集聚现象。 本病起病急,轻症者只有头晕、乏力、肌痛、多汗、心悸伴以低热,有的初期有短暂的腹泻。重症者有高热(40℃以上)、大汗、心悸、游走性肌肉痉挛伴有明显疼痛和触痛,以腰骶部及四肢肌肉为好发部位。病人烦燥不安,2～5天内死亡。经实验室检查,排除了食物中毒、农药中毒、钩端螺旋体病和弓形体感染。从病人和接触者的粪便中分离到9株病毒,性状一致,为RNA型25nm的球形颗粒,耐酸,耐乙醚,能凝集人“O”型血球。经血清学鉴定为ECHO3型病毒。16份病人双份血清的检测结果表明,恢复期血清对该病毒中和抗体有4倍以上升高者共8例(纸坊村和崔家坨各4例)。病人单份血清也都有较高的抗体。有理由认为两年中先后在两个村庄发生的传染病与ECHO3型病毒有密切关系。查阅文献,尚未见有关ECHO3型病毒引起以肌痛、游走性肌痉挛为特征的疾病的报道。     

乌龟胚胎发育过程中钙,镁代谢的研究

本文对乌龟胚胎发育过程中钙,镁代谢特征进行了研究。结果表明：卵壳为乌龟胚胎发育提供５４．０７％的钙,１２．２６％的镁：其余的４５．９３％钙,８７．７４％的镁由 卵内容物（卵黄＋卵清）提供。     

社区居民对基因检测服务需求意愿及其影响因素调查分析

目的:了解社区居民对基因检测服务的知晓、需求状况及需求意愿的影响因素。方法:采用典型抽样方法,对杭州市下城区1647户居民进行问卷调查。结果:调查人群对基因检测知晓率为21.8%,需求率为12.7%,有需求意愿的占到61.9%。有无家庭成员患病(OR=1.619,95%CI=1.279-2.049)、对基因检测服务知晓情况(OR=2.368,95%CI=1.782-3.146)、有无家族遗传史(OR=2.784,95%CI=1.685-4.600)年龄(x2=27.210,P<0.001)、对婚前基因检测的认可度(x2=23.185,P<0.001)等五个因素对社区居民基因检测服务需求意愿有显著影响。结论:社区居民对基因检测服务需求意愿较强,但是知晓率、需求率均偏低。有待加强相关方面的宣传、教育、培训等工作。     

大豆油体与EGF融合基因的克隆及其在红花种子中的表达

目的：旨在建立一种在红花油体中表达EGF的转基因植物的方法。方法：通过PCR技术把大豆油体基因（DDoil）与EGF构建成融合基因,克隆至植物表达载体pCAMBIA1390R中,构建成植物表达载体p1390Do-EGF,然后转化进农杆菌 LBA4404 中用于侵染红花外植体,通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过PCR、实时荧光相对定量RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot分析目的基因的表达情况,通过MTT法检测EGF的促细胞增殖活性。结果：PCR结果显示,红花叶片中能检测到EGF基因;实时荧光相对定量RT-PCR结果显示,在红花种子中EGF能成功实现转录;SDS-PAGE和Western blot检测证明,在转基因红花种子中能有效表达出EGF,并具有其原有的免疫原性,MTT法实验结果表明EGF具有促进balb/c 3T3细胞增殖的生物活性。结论：大豆油体和EGF融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中,并实现了EGF外源蛋白在红花种子油体中的表达,为EGF蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径。     

自然氨基酸的溶剂可及性标准

提出一种新的计算蛋白质溶剂可及面积的方法.利用该方法计算了二十个氨基酸在三肽模型中的可及面积,与他人的结果作了比较.提供了一套在分子模建中很有用的数据.     

肿瘤标志物CEA、CA199对结直肠癌TNM分期的预判价值

目的:探讨肿瘤标志物CEA、CA199浓度变化在结直肠癌TNM分期中的预判价值。方法:回顾我院2010年1月~2013年10月收治的经手术治疗的结、直肠癌患者(共96例)的有关资料,分析其术前CEA、CA199浓度水平与术后病理确定TNM分期结果的相互关系,进行相应的统计学检测。结果:结直肠癌Ⅰ~Ⅳ期CEA浓度依次为4.28±1.78、6.92±2.01、23.99±6.49和362.64±158.80 ng/mL,CA199浓度依次为12.58±2.98、13.37±2.62、36.84±10.33和238.71±103.69 U/mL,肿瘤标志物CEA、CA199的浓度随TNM分期升级而增高,通过Kruskal-Wallis秩检验分析及Spearman秩相关分析,表明CEA、CA199的血清浓度与TNM分期明显相关(P0.01)。结论:CEA、CA199血清浓度与TNM分期呈正相关,而年龄与CEA、CA199在各期中的浓度无明显相关性。因此,应用CEA、CA199的血清学测定在一定程度上具有预判结直肠癌TNM分期的价值。     

13CMFA过程中GC-MS分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度

基于13C标记的代谢通量分析(13CMFA)由于具有准确性和应用性已成为国际上代谢工程研究的热点,其中一个至关重要的问题就是分析菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。用含20%全标记葡萄糖（［U-13C］）和80%天然葡萄糖的合成培养基喂养维生素B12生产菌Pseudomonas denitrifican,然后在稳态条件下取20mg带13C标记菌体用1ml 6mol/L盐酸95℃水解24h得到带13C标记的菌体蛋白氨基酸;氨基酸经分离、浓缩、真空干燥、MBDSTFA衍生化后得到的TBDMS衍生物可以用气相色谱-质谱(GC-MS)进行分析,最后分析质谱图得到15种菌体蛋白氨基酸的13C标记丰度信息。成功获得菌体蛋白氨基酸13C标记丰度信息的实验方法和样品处理技术,为13CMFA在国内进一步发展提供了参考意义。     

肌苷和鸟苷生产菌中嘌呤核苷合成途径三段基因序列的分析

为了研究肌苷和鸟苷生产菌中与产苷有关的嘌呤核苷合成途径的遗传背景,选择了pur操纵子的启动子序列、编码SAMP合成酶的purA基因和编码GMP合成酶的guaA基因,设计合适的引物,分别从野生菌、一株肌苷低产菌和肌苷鸟苷高产菌中扩增出相应片段,经克隆和测序后,对它们进行比较和分析。分析结果表明两株生产菌的purA基因发生了1个碱基缺失,导致阅读框发生移码突变;而鸟苷高产菌在pur操纵子的启动子部分和操纵子抑制蛋白结合区域发生了近10％的突变,可能影响整个操纵子的表达调控。     

人铜锌超氧化物歧化酶的大规模生产工艺

本文以干扰素生产中废弃的人红细胞为原料,采用乙醇－氯份沉淀→磷酸氢二钾盐析→丙酮沉淀手续和ＤＥＡＥ—５２层析步骤,进行了人铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）大规模生产工艺的实验研究。结果表明,生产的酶制剂中含量为９０．６％,比活性在２０００ＭｃＣｏｒｄ—Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ单位／ｍｇ蛋白以上,无菌、无热原质、安全性等项指标符合国家卫生部对血液制品的要求。