| 大豆油体与EGF融合基因的克隆及其在红花种子中的表达 |
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| 引用本文： | 庞实锋,姜,潮,李文荣,冯治国,刘,敏,楚生辉,李校堃,郑克勤.大豆油体与EGF融合基因的克隆及其在红花种子中的表达[J].中国生物工程杂志,2014,34(4):71-77. |
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| 作者姓名： | 庞实锋 姜 潮 李文荣 冯治国 刘 敏 楚生辉 李校堃 郑克勤 |
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| 作者单位： | 1. 广东医学院基础医学院 东莞 523808;
2. 温州医科大学药学院 温州 325035 |
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| 基金项目： | 东莞市科技局科技计划资助项目(201010815209) |
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| 摘 要： | 目的:旨在建立一种在红花油体中表达EGF的转基因植物的方法。方法:通过PCR技术把大豆油体基因(DDoil)与EGF构建成融合基因,克隆至植物表达载体pCAMBIA1390R中,构建成植物表达载体p1390Do-EGF,然后转化进农杆菌LBA4404中用于侵染红花外植体,通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过PCR、实时荧光相对定量RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot分析目的基因的表达情况,通过MTT法检测EGF的促细胞增殖活性。结果:PCR结果显示,红花叶片中能检测到EGF基因;实时荧光相对定量RT-PCR结果显示,在红花种子中EGF能成功实现转录;SDS-PAGE和Western blot检测证明,在转基因红花种子中能有效表达出EGF,并具有其原有的免疫原性,MTT法实验结果表明EGF具有促进balb/c 3T3细胞增殖的生物活性。结论:大豆油体和EGF融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中,并实现了EGF外源蛋白在红花种子油体中的表达,为EGF蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径。
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| 关 键 词： | 油体 表皮生长因子 转基因红花 融合基因 |
| 收稿时间： | 2014-01-20 |
Cloning of Soybean Oleosin and EGF Fusion Gene and Expression in Safflower Seeds |
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| PANG Shi-feng,JIANG Chao,LI Wen-rong,FENG Zhi-guo,LIU Min,CHU Sheng-hui,LI Xiao-kun,ZHENG Ke-qin.Cloning of Soybean Oleosin and EGF Fusion Gene and Expression in Safflower Seeds[J].China Biotechnology,2014,34(4):71-77. |
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| Authors: | PANG Shi-feng JIANG Chao LI Wen-rong FENG Zhi-guo LIU Min CHU Sheng-hui LI Xiao-kun ZHENG Ke-qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Oil body Epidermal Growth Factor Transgenic safflower Fusion gene |
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