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1.
为了合理评价化合物的促神经再生活性.用溴化四唑蓝(MTT)、分化计数、图象处理等方法,借助FK506、GPI1046阳性化合物,建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统.结果表明,无论在细胞存活实验还是在分化实验中,FK506、GPI1046都可以明显增强神经生长因子(NGF)的效应,即有促神经再生的作用.也就是说,这一系统将有助于从组合化学方法合成的化合物文库中,筛选出具有促神经再生活性的化合物.  相似文献   
2.
通过一些典型应用实例介绍分子生物学实验中计算机辅助设计的概况,例如:使用GOLDKEY软件分别计算蓖麻毒素A链蛋白基因在pBV220载体中的5′和3′端部分RNA二级结构自由能和密码子使用偏性指数等参数,并按外源基因高效表达判别函数,指导基因突变,以构建高效表达载体。按判别函数对原始序列推断为低效表达,实验表明,未能获得表达产物。为此对基因的这两个片段按上述分析方  相似文献   
3.
为了合理评价化合物的促神经再生活性.用(MTT)、分化计数、图象处理等方法,借助FK506、GPI1046阳性化合物,建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统.结果表明,无论在细胞存活实验还是在分化实验中,FK506、GPI1046都可以明显增强神经生长因子(NGF)的效应,即促神经再生的作用.也就是说,这一系统将有助于从组合化学方法合成的化合物文库中,筛选出具有促神经再生活性的化合物.  相似文献   
4.
蓖麻毒素A链的可溶性表达设计   总被引:1,自引:0,他引:1  
蓖麻毒素A链(简称RA)在细胞浆中表现为一个特异的N糖苷酶,它攻击核糖体,移走一个特定的腺嘌呤碱基,从而抑制蛋白质合成。根据RA的这一生物学特性,可将其用生物导弹来抑制肿瘤细胞的生长。在大肠杆菌中表达的RA以包含体形式出现,因无法复性而得不到活性产物,因此希望设计出突变体能可溶性表达。 包含体的成因相当复杂。一般认为,外源基因在大肠杆菌中表达时,由于表达速度大大超  相似文献   
5.
蓖麻毒素A链突变体的设计,表达与活性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用蛋白质结构同源模建并结合表观静电势分析,设计了拟具有生物学活性的蓖麻毒素A链的突变体。将PCR扩增的突变体基因,导入pKK223-3载体中,于大肠杆菌(E.coli)中获得高效、可溶性表达,而且,确证了表达产物具有预期的生物学活性。  相似文献   
6.
蓖麻毒素A链突变体(MRTA)的分子设计   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用同源模建的方法,借助分子力学优化,分子力学模拟退火设计构建了删除部分氨基酸序列的蓖麻毒素A链突变体。采用泊松-玻尔兹曼方程对比分析了蓖麻毒素A链与MRTA表现静电势分布,研究了RTA与MRTA蛋白表面静电性质;  相似文献   
7.
蓖麻毒素A链突变体的设计、表达与活性研究   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
利用蛋白质结构同源模建并结合表观静电势分析,设计了拟具有生物学活性的蓖麻毒素A链的突变体.将PCR扩增的突变体基因,导入pKK223-3载体中,于大肠杆菌(E.coli)中获得高效、可溶性表达,而且,确证了表达产物具有预期的生物学活性.  相似文献   
8.
采用pExSecⅠ载体系统进行了蓖麻毒素A链的原核表达,经CM-Sepharose一步纯化后,获得了纯度约80%的重组蓖麻毒素A链.将其与几种天然单链核糖体失活蛋白进行了超螺旋DNA裂解研究和无细胞体系中蛋白合成抑制试验,结果表明,重组蓖麻毒素A链具有类似于天然单链核糖体失活蛋白的活性,但两种测活方法之间没有明显的相关性  相似文献   
9.
蓖麻毒素—A链结构功能研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
蓖麻毒素(ricin)是一种核糖体失活蛋白,是构建免疫毒素的一个重要成分,本介绍近年来ricin-A链的理化性质和制备,结构功能关系及其N-苷酶作用机制方面的研究进展.  相似文献   
10.
青霉产植酸酶理化性质的初步研究   总被引:11,自引:0,他引:11  
对一株青霉产生的植酸酶进行了部分纯化。理化性质研究表明,该酶的最适pH分别为5.3和3.5,最适温度为60℃,Km=1.10×10-3mol/L,Vm=2.3mM/hMg++、NaF、NaNO3、EDTA等对此酶皆无抑制作用,而Cu++、Zn++、Mn++、Fe++等有较强的抑制作用。此外,对该植酸酶的一些其他性质亦进行了研究。  相似文献   
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