赤霉菌超氧化物歧化酶的纯化及部分理化性质

采用加热、Sephadex G—100凝胶过滤及DEAE-Sephadex A-50柱层析的方法,提纯了赤霉菌的超氧化物歧化酶(SOD),纯酶比活力为2640U/mg蛋白,最大紫外吸收峰为276nm,为Mn-SOD,由二个亚基组成,亚基分子量为14.5kD。此外还报道了该酶的氨基酸组成。     

根霉超氧化物歧化酶同工酶类型的鉴别

利用ＫＣＮ、Ｈ_２Ｏ２和ＳＤＳ的选择性反应引起的ＳＯＤ同工酶谱带变化即可鉴别粗抽提液中的ＳＯＤ同工酶类型;用这种方法对五株不同种根霉的鉴别实验表明,它们均不同程度地含有Ｃｕ,Ｚｎ型和Ｍｎ型两种ＳＯＤ,前者约占８０％左右,后者只占２０％左右。用邻苯三酚自氧化法对样品中ＳＯＤ活性测定结果与在同工酶谱上的鉴别结果基本一致。     

根霉葡萄糖淀粉酶的复性复活动力学研究

本文利用荧光、紫外差光谱研究了根霉葡萄糖淀粉酶在盐酸胍变性后的复性、复活动力学。结果表明,该酶在小于4mol/L盐酸胍中变性是可逆的,其复性过程遵循一级反应方程。酶复活过程是由两个一级反应组成的复合反应,构象变化速度与复活过程中较快的反应速度相差无几,这可能是在Trp及Tyr微区的构象变化基本完成之后,酶活力恢复还没有完成造成的。     

九株根霉可溶性蛋白和三种酶的电泳图谱比较研究

本文了根霉属９个菌株天然态及解态可溶性蛋白、酯酶同工酶、葡萄糖淀粉酶的ＳＯＤ电泳图谱的比较研究。结果表明：可溶性蛋白图谱和酯酶同工酶谱能显示五种已知供试菌种间的差异,尤其酯酶同工酶谱还能显示米根霉两个供试菌株之间的微小差异。经综合分析全部试验结果后得出的系统树图显示了９个供试菌株间的亲缘关系,并为未知菌株Ｆ１（ＢＲ１２）和Ｑ３０３提供了鉴定和命名依据。文中首次了根霉的ＳＯＤ同工酶,并对蛋白质和酶,     

九株根霉可溶性蛋白和三种酶的电泳图谱比较研究

本文报导了根霉属(Rhizopus) 9个菌株天然态及解聚态可溶性蛋白、酯酶同工酶、葡萄糖淀粉酶和SOD电泳图谱的比较研究。结果表明：可溶性蛋白图谱和酯酶同工酶谱能显示五种已知供试菌种间的差异,尤其酯酶同工酶谱还能显示米根霉两个供试菌株之间的微小差异。经综合分析全部试验结果后得出的系统树图显示了9个供试菌株间的亲缘关系,并为未知菌株F1(BR12)和Q303提供了鉴定和命名依据。文中首次报导了根霉的SOD同工酶,并对蛋白质和酶电泳图谱用于根霉分类研究进行了讨论。     

一株产乳酸的芽孢杆菌的分离及产物鉴定

从捣碎大麦芽的增菌培养液表面的悬浮物中发现很多细菌芽孢。纯化后经形态观察、生理生化特征和乳酸旋光性测定等表明,此菌呈革兰氏染色阳性反应,产芽孢,周身鞭毛,产物为DL-乳酸,系同型乳酸发酵类型。再经乳酸发酵试验,50℃发酵120小时,以葡萄塘为碳源,对葡萄糖的转化率为86.5%。以玉米糖化液为碳源,对糖的转化率为85.2%。     

大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶的定位突变及突变酶的动力学性质

利用人工合成的寡核苷酸探针,将编码大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶(EC3.2.1.23)的Lac Z基因中537位Glu密码子GAA分别用GAC(Asp)、CAA(Gln)、GTC(Val)来替代,替代后的突变酶的催化活性显著降低.同天然β-D-半乳糖苷酶相比,作用于ONPG底物时,突变酶的k_(cat)值分别为0.13%(Asp-537)、0.0006%(Gln-537)、0.0035%(Val-537),但它们的K_m值并无明显改变.无论是天然酶还是突变酶,底物类似物IPTG是一个强有力的抑制剂,而过渡态类似物2-脱氧-2-氨基-半乳糖和L-核糖只对突变酶有微弱的抑制作用.活化剂叠氮钠的激活作用小于β-D-半乳糖苷酶的Glu-461突变酶.催化甲醇成酯反应的能力小于天然酶.突变酶对热更不稳定.以上结果表明Glu-537残基是该酶催化反应的必需基团.     

根霉葡萄糖淀粉酶的简易纯化法及部分理化性质

从汾酒大曲中分离到一株根霉,经诱变处理后获得了具有高产葡萄糖淀粉酶的变异株。将此菌株用固体麸曲培养,水抽提得原酶液。经DEAE-Sephadex A—50、Sephadex G—100和CM—Cellulosc C52三步柱层析后,得到了紫外光谱和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳皆为均一的葡萄糖淀粉酶。总活力回收达70％左右,比活力提高23．70倍。该酶的A1%280nm=14．70,经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析表明其分子量约为78400,酶分子中赖氨酸含量较高,属典型的根霉型葡萄糖淀粉酶。     

变灰青霉固态发酵降解植酸的初步研究

从发霉植酸钠溶液中分离到一株产植酸酶的变灰青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｎｅｓｃｅｎｓ）Ｐ４。以麸皮：玉米面：黄豆饼粉＝７：２：１为主要培养基成份,用优选法确定最适培养基为在上述基本培养基中添加４％（ＮＨ４）２ＳＯ４,１％葡萄糖,１．５倍水,自然ｐＨ。发酵过程的动态分析表明,该菌在上述条件下２８℃恒温培养６ｄ后植酸降解率可达９０％;无机磷含量由０．１３％增至０．５７％;可溶性蛋白含量由３．８０％增至７．６０％。用４％ＣａＣｌ_２·２Ｈ_２Ｏ水溶液抽提     

卡拉胶包埋乳酸菌的研究

用5%K—卡拉胶包埋乳酸菌,经0.5％戊二醛和0.2M已二胺溶液加固处理,得到了一种较为满意的固定化乳酸菌。扫描电镜观察表明卡拉胶有效地包埋了大量乳酸菌,但固定化乳酸菌的产酸能力与游离乳酸菌的产酸能力无显著差异,同时温度、柠檬酸钠等因素对固定化乳酸菌产酸能力的影响小于对游离乳酸菌的影响。