人的生殖及胚胎发育

胚胎发育是个体生命史的早期发育阶段,它伊始于成熟生殖細胞的結合,因此在討論胚胎发育之前,先从有关于人的生殖器官結构、生殖細胞生成和生殖生理等問題談起。 (一)男女生殖器官及其功能 1.男性生殖器官由睾丸、附毒、输精管、射精管、腺体(精囊腺及前列腺)及阴茎(尿道)所組成。睾丸的主要功能为产生精子,为由許多盘曲的小管(曲精小     

The cloning and expression characterization of the centrosome protein genes family (centrin genes) in rat testis

Centrins are members of the centrosome protein family, which is highly conserved during revolution. The homologous genes of centrin in many organisms had been cloned, but the sequences of the rat centrin genes were not reported yet in GenBank. We cloned the cDNA fragments of centrin-1, -2 and -3 from the rat testis by RT-PCR, and analyzed the homology of the deduced amino acid sequences. The expression characterization of centrin genes in rat spermato-genesis was carried out by semi-quantitative RT-PCR. The results show that the homology of the corresponding centrin proteins in human, mouse and rat is high. The expression of centrin-1 is testis-specific, spermatogenic cell-specific and developmental stage-related. Centrin-1 begins to be transcribed when the meiosis occurs, and its mRNA level reaches the peak in round spermatids. Centrin-2 and centrin-3 are highly expressed in spermatogonia and their mRNA level decreases markedly when meiosis occurs. These results suggest that centrin-1 may play roles in     

醋酸棉酚对体外子宫颈癌细胞的作用

大量的研究表明,醋酸棉酚具有抑制精子形成的作用。已被公认是一种有前途的男用节育药。然而,棉酚的多种生物学活性必然使其理论研究及实际应用的范围更加扩大。其实,早在60年代已有人研究棉酚对移植性动物肿瘤的作用,或者把它与手术结合应用于膀胱肿瘤的治疗。国内也有把棉酚试用于多种人体恶性肿瘤治疗的记载,并认为     

~(14)C-醋酸棉酚在大鼠体内的药物动力学研究——Ⅱ.在大鼠体内分布、排泄和代谢的动态的定量分析

1.大鼠口服标记棉酚后迅速通过粪、尿和呼气排出。粪排出量最多,占口服总剂量的83.5%;其次为呼气中的~(14)CO_2,占11.73%;尿中的含量最少,只占2.51%。经粪排出率最高,表明通过肝脏—胆汁—粪的代谢和排泄是排除体棉酚的主要途径和解毒过程。呼气中的CO_2是棉酚代谢过程中脱羰基作用的产物,这一过程也是体内棉酚解毒过程的一种方式。尿中排泄量低,可能与棉酚的非离子化态大分子结构不易通透肾小球而有利于肾小管的重吸收有关。2.大鼠一次口服标记棉酚20微居里/7.5毫克后,从体内排出总剂量的半量的时间(t(1/2))为2.5天,按排泄半量规律推算,从体内清除所需的时间约为服药后的第23天左右,与我们在第19天实测的体内残留率比例大体相符。3.分布于脏器组织中的标记棉酚的定量测定结果表明:胃、肠道内容物,胃、肠道组织和肝脏中的比活性最高,在服药后1天即到达它们的高峰强度水平。血液的活性在1天内亦到达高峰。但其比活性较上述脏器组织为低。心、肾、脾、肺、胰、膈肌和睾丸等主要脏器组织的比活性在服药后的初期较低。到第4天才达到它们各自的高峰水平。其中脾、肾、心的比活性较其他脏器为高,内分泌腺中的肾上腺、垂体和甲状腺的比活性亦较高。而神经系统中的丘脑下部、延脑和脊髓的比活性则均较低。各脏器的比活性随时间而递减下降,到第19天后均下降至微量水平。4.连续给药组脏器组织中的标记棉酚分布动态与上述一次给药组基本相同。连续每日服药2周后,所有组织均出现放射活性,其中脑组织的比活性最低,胃、肠道壁及其内容物以及肝的比活性最高。其次为脾、肺、心、肾、胰、膈肌和睾丸。这些主要脏器在连续服药3周后达到各自的比活性高峰水平。以后即逐渐下降。停药2周后均下降至微量水平。上述结果表明两个给药组的棉酚分布的变化动态基本一致,定质和定位的结果亦基本相符。5.棉酚的代谢:两个服药剂量组的胃、肠道组织,肝组织,胃、肠道内容物和粪中的游离棉酚(F)和结合棉酚(B)的比值,在服药后的初期均较小。以后随时间而逐渐递增。反映了棉酚在体内的早期代谢形式以结合棉酚为主,以后在脏器组织中通过氧化、分解或转化,游离棉酚及其代谢产物的比例增加,通过粪、尿和呼气(脱羰基后的CO_2)排出。     

真核基因转录与染色质修饰机制及转录因子间的关系

真核基因的表达调控是当前分子生物学研究领域的前沿科学,其中的发展日新月异,涉及面广,从染色质结构的改变到转录因子间的相互作用形成了一个复杂的网络关系,各因素之间的协调作用是真核生物体内基因表达调控的关键所在。     

波形蛋白、核纤层蛋白与排核关系的研究

以网织红细胞与K_(582)细胞融合形成的胞质体杂种细胞K-RRneo为研究对象,对Vimentin、Lamin蛋白与K-RRneo细胞分化排核的关系进行了研究。结果表明:随着K-RRneo细胞的分化,Vimentin mRNA、Lamin蛋白表达明显降低,与我们整装电镜观察及Western印迹分析所得到的结论相一致,证实了薛社普提出的Vimentin、Lamin蛋白在红系细胞分化排核中所起的作用,为最终阐明红系细胞分化排核机制提供了新线索。     

中心体蛋白Cenexin在大鼠精子发生过程中的表达特征

中心体蛋白Cenexin是成熟中心粒的唯一标志分子。为阐明中心粒在大鼠精子发生过程中的成熟以及功能,我们首先通过RT-PCR技术从大鼠睾丸组织中扩增出了Cenexin cDNA片段,原核表达重组蛋白后,用其免疫小鼠制备了高滴度的抗Cenexin的多克隆抗体,然后利用免疫荧光染色、Western Blot和半定量RT-PCR方法,研究了大鼠精子发生过程中Cenexin蛋白和基因的表达特征。结果显示Cenexin mRNA水平在精原细胞和精母细胞中较高,随后表达水平下降,而蛋白质分子在精原细胞到精子细胞中都定位于细胞的一个中心粒上,表示有成熟中心粒的存在,在长形精子细胞中该蛋白位于鞭毛的基体部。附睾的绝大多数成熟精子中Cenexin免疫染色消失。中心体蛋白Cenexin在精子变态期的表达变化可能与精子鞭毛形成的起始有关。     

小鼠红细胞分化-去核因子的发育期相关性表达与鉴定

以质粒pBS-SK-MEDDF上的小鼠 MEDDF cDNA片段为模板,通过PCR方法删除该片段的非编码序列,将编码序列克隆到pGEM-T-Easy质粒中,经DNA序列测定后,证明其克隆序列正确,再将MEDDF编码序列定向克隆到表达载体pET-30α(+)的BamHⅠ和HindⅢ位点之间,构建了原核表达载体,在获高效表达菌株中,特异表达蛋白质的量占细菌总蛋白的40%.以纯化的该蛋白质为抗原,免疫新西兰纯种大耳兔,获得高效价的抗血清.经免疫细胞化学验证,MEDDF在红细胞的表达具有发育阶段特异性,推测与小鼠红细胞终末分化的启动及细胞核浓缩相关.另外,MEDDF还在小鼠骨髓中的粒细胞系及巨核细胞系表达,说明该蛋白质与小鼠骨髓髓系细胞的分化有渊源关系.     

中心体蛋白Centrin家族在大鼠精子发生过程中的表达

中心体蛋白Centrin家族在大鼠精子发生过程中的表达@孙晓冬$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @俞作仁$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @李赛$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @马静$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @葛晔华$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @薛社普$中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学系! 中国北京100005 @韩代书$中国医学科学院基础医学…     

两个新的红细胞分化相关因子的cDNA克隆及功能探讨

曾报道在终末分化阶段的红细胞中可表达一些与珠蛋白基因增强子HS2序列特异结合的蛋白因子, 并利用杂交瘤技术制备了两株针对上述蛋白的单克隆抗体. 为获得编码这些因子的基因, 实验利用这两株单抗筛选构建于l gt11的人胚肝cDNA表达文库, 并获得阳性克隆. 经分析, 其中一株 cDNA克隆具有全长编码序列(EDRF1), 另一株为具有可读框的cDNA片段(EDRF2), 由它编码的氨基酸序列含有反式调节因子特有的亮氨酸拉链结构域. 与GenBank作同源比较后确定上述两株cDNA序列均未见报道. Northern印迹结果表明, 它们编码的蛋白质为红细胞分化相关蛋白. RT-PCR系统地观察了EDRF1, EDRF2在多种细胞株和组织中的表达, 提供了重要的功能线索. EDRF1和EDRF2主要在造血系统和早期的胚胎多种组织表达, 说明它与血细胞成熟和早期的组织发育相关, 也可能是传递早期造血与胚胎发育的分子语言.